河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用详解

河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用详解演示文稿目前一页\总数四十四页\编于一点优选河北农业大学免疫学课件第二十二章免疫学检测原理及临床应用目前二页\总数四十四页\编于一点目录基于抗原-抗体反应的检测方法免疫细胞检测免疫分子检测免疫学诊断与监测目前三页\总数四十四页\编于一点第一节基于抗原-抗体反应的检测方法抗原与抗体在体内体外均能发生特异性结合反应，因抗体主要来自血清，因此在体外进行的抗原抗体反应又称为血清学反应或免疫血清学技术。目前四页\总数四十四页\编于一点一、抗原-抗体反应的特点1.特异性与交叉性交叉反应是区分血清型和亚型的重要依据！！目前五页\总数四十四页\编于一点2.抗原-抗体结合的带现象与可见性目前六页\总数四十四页\编于一点3.可逆性目前七页\总数四十四页\编于一点4.反应阶段性第一阶段：特异性结合阶段

特点：反应快（数秒至数分钟）、无可见反应第二阶段：反应的可见阶段

特点：反应慢（数分钟至数小时）、表现为凝集、沉淀、补体结合等反应，所受影响因素较多。目前八页\总数四十四页\编于一点二、影响抗原抗体结合的因素电解质：生理盐水、缓冲液温度：37或4摄氏度酸碱度：pH值在6~8抗原和抗体的性质（抗体特异性和亲和力）振荡：适当杂物和异物目前九页\总数四十四页\编于一点三、抗原-抗体反应检测方法反应类型及试验名称反应类型及试验名称凝集试验直接凝集试验标记抗体技术免疫荧光抗体技术间接凝集试验免疫酶标记技术乳胶凝集试验放射免疫测定技术沉淀试验絮状沉淀试验化学发光标记技术琼脂免疫扩散试验免疫复合物散射反应免疫电泳血清学新技术免疫传感技术火箭免疫电泳免疫印记技术补体参与的试验补体结合试验、补体依赖性细胞毒试验、免疫黏附血凝试验免疫胶体金技术免疫沉淀技术免疫核酸探针技术中和试验病毒中和试验免疫电镜技术毒素中和试验免疫蛋白芯片技术目前十页\总数四十四页\编于一点1.凝集反应

直接凝集

目前十一页\总数四十四页\编于一点间接凝集目前十二页\总数四十四页\编于一点间接凝集抑制试验目前十三页\总数四十四页\编于一点

协同凝集试验

人血清IgG可与葡萄球菌A蛋白（SPA）结合，将已知特异性抗体IgG结合至SPA,IgGFab暴露在金黄色葡萄球菌菌体表面，其与相应抗原特异性结合，导致金黄色葡萄球菌凝集。

目前十四页\总数四十四页\编于一点2.沉淀反应单向免疫扩散双向免疫扩散目前十五页\总数四十四页\编于一点

双向双扩散沉淀线与抗原成分的关系目前十六页\总数四十四页\编于一点免疫电泳目前十七页\总数四十四页\编于一点3.补体参与的反应溶血空斑试验目前十八页\总数四十四页\编于一点4.免疫标记技术（1）免疫荧光法目前十九页\总数四十四页\编于一点唾液腺中的狂犬病毒单纯疱疹病毒

目前二十页\总数四十四页\编于一点（2）酶免疫测定用酶标记的抗体进行抗原抗体反应。一般用酶标仪测定光密度值（OD值）以反应抗原或抗体含量。灵敏度可达ng~pg/ml水平。常用标记的酶为辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（AP）等。目前二十一页\总数四十四页\编于一点酶联免疫吸附试验（enzymelinked-immunosorbentassay,ELISA）:将已知抗原或抗体吸附在固相载体表面，在固相表面经行抗原抗体反应，通过洗涤固相表面抗原抗体复合物与液相中游离成分分离。目前二十二页\总数四十四页\编于一点酶标仪目前二十三页\总数四十四页\编于一点目前二十四页\总数四十四页\编于一点目前二十五页\总数四十四页\编于一点酶联免疫斑点试验（enzymelinkedimmunospotassay,ELISPOT）目前二十六页\总数四十四页\编于一点BAS-ELISA（生物素-亲和素系统ELISA）目前二十七页\总数四十四页\编于一点免疫组化技术目前二十八页\总数四十四页\编于一点免疫胶体金技术目前二十九页\总数四十四页\编于一点目前三十页\总数四十四页\编于一点免疫胶体金检测技术用于怀孕诊断（怀孕）（未怀孕）目前三十一页\总数四十四页\编于一点目前三十二页\总数四十四页\编于一点免疫印迹目前三十三页\总数四十四页\编于一点目前三十四页\总数四十四页\编于一点5.血凝抑制试验血凝试验：检测抗原（新城疫、流感病毒等）血凝抑制试验：检测抗体目前三十五页\总数四十四页\编于一点第二节免疫细胞检测外周血单个核细胞的分离：

用淋巴细胞分离液（葡聚糖-泛影葡酸）密度梯度离心法。淋巴细胞亚群分离或计数：

流式细胞术、磁分离技术、花环试验等。树突状细胞诱生和分离：

诱生：IL-4、GM-CSF鉴定：CD1a和CD83一、免疫细胞及其亚类计数目前三十六页\总数四十四页\编于一点流式细胞技术的一般过程目前三十七页\总数四十四页\编于一点E玫瑰花环试验目前三十八页\总数四十四页\编于一点二、淋巴细胞功能测定1.T细胞转化试验（T细胞增殖试验）

目前三十九页\总数四十四页\编于一点2.溶血空斑形成试验目前四十页\总数四十四页\编于一点3.巨噬细胞吞噬功能的检测1234目前四十一页\总数四十四页\编于一点5目前四十二页\总数四十四页\编于一点4.测定淋巴细胞功能的体内试验机体对特定抗原产生初次细胞免疫应答，再用相同抗原做皮肤试验，出现以局部红肿为特征的迟发型超敏反应。结核杆菌、免疫缺陷病等目前四十三页\总数四十四页\编于一点第三