无菌工艺WHO专题知识

AsepticProcessing

无菌工艺MrsRobynIsaacson1Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第1页无菌工艺过程—概要

一些药品必须是无菌：注射剂，眼科用药，输液及血液制品。无菌产品主要分为两大类最终灭菌产品用无菌工艺过程生产非最终灭菌产品2Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第2页无菌工艺过程目标为维持由无菌部件装配产品无菌性，维持操作条件无菌性，以防止微生物污染。无菌工艺过程—概要

3Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第3页目标回顾无菌制剂生产过程所需关注尤其事项：生产环境洁净区人员药液制备和过滤药液除菌过滤前微生物负荷过滤器完整性测试和验证生产设备和内包装材料准备和灭菌灌装过程无菌工艺过程验证隔离器，吹灌封技术，大批次产品生产时尤其注意事项无菌工艺过程—概要

4Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第4页

生产环境洁区划分各级比较表格15Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第5页生产环境洁区划分以空气悬浮粒子划分（表格2）静态-

-生产设备安装就位并空运行。动态-

-安装就位设备依据预定模式进行运行，现场并有要求数量人员进行操作。6Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第6页4个级别洁净区D级区等同于10万级，ISO

8级用于执行无菌生产工艺过程非关键性生产操作，如部件清洗后处理。C级区等同于10000级或ISO

7级用于执行无菌生产工艺过程非关键性生产操作，如药液过滤前配制。B级区等同于100级或ISO

5级用作A级区背景环境，如层流台所在房间。

生产环境7Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第7页A级区等同于100级(美联邦209E),ISO5(ISO14644-1):用于高风险操作，如产品灌装，放置胶塞锅，敞口西林瓶，无菌物料处理，无菌连接，半压塞产品往冻干机内装载转移。通常由层流工作台来确保生产条件每一级别洁净区都有微生物和空气悬浮粒子接收标准空气悬浮粒子标准参见表格2

生产环境8Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第8页

可存活微生物程度（微生物污染）表格3上表数值为平均值单个沉降碟放置时间小于4小时数值只作参考，并不代表标准应对微生物污染水平设置警戒和纠偏程度，并进行趋势分析以评定生产设施空气质量。生产环境9Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第9页环境监测物理参数粒子

压差换气次数，气流模式自净/恢复时间温度和相对湿度风速生产环境10Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第10页生产环境环境监测--物理参数粒子对于粒子监控主要是因为它们能造成污染和携带微生物对于灌装和加塞等关键生产过程，应在同一层流下里离工作位置不超出30厘米范围内对这些关键环境进行监测。推荐使用远程控制探头进行连续监测有些工艺过程会产生粒子，如粉末分装，粒子监测就比较困难需要设定恰当警戒和纠偏程度，监测结果超标后应明确纠偏办法。11Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第11页环境监测–物理参数压差不一样级区相邻房间压差应为10-15帕（门关闭情况下）最关键区域应设定最高压差值。压差应该被连续监测并频繁统计。压差异常时应该有声音报警。任何偏差都应该进行调查，并评定对空气质量影响。生产环境12Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第12页生产环境环境监测–物理参数换气/气流模式关键区域气流应为单向流（层流），并有足够风速以确保能及时吹走灌装/加塞过程中产生粒子B/C/D区域房间通常要求每小时最少换气20次。自净/恢复时间在操作完成后，A级区需要在20分钟“自净”后能够到达静态粒子水平（指导值）当A级区有产品或敞口容器暴露是，空气悬浮粒子计数必须符合“动态”要求。13Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第13页生产环境环境监测–物理参数温度和相对湿度环境温湿度不应很高，以免引发操作人员不舒适（轻易产生粒子，如18°C）气流速度层流台在操作位置风速应在约0.45m/s±20%范围内14Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第14页生产环境人员控制确保洁区内人数最少尤其在无菌工艺生产过程检验和管理活动在级区外完成。培训包含清洁和维修人员在内全部些人员初始培训和定时培训生产知识，个人卫生，微生物学进入洁区工作人员需经过正式验证和授权。特殊事项外来人员监管去污染规程（如处理动物组织材料工作人员）15Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第15页

生产环境人员控制(2)高标准个人卫生和清洁有疾病和开放性伤口时不得进入洁区定时进行健康检验不得有粒子脱落，人员移动应该迟缓和受控不得带入微生物风险不得将非洁区服装带入洁净区域，进入洁区前应该进行更衣更衣和洗衣规程不得佩戴手表，首饰和使用化装品灯检人员需要定时进行视力检验16Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第16页生产环境人员控制(3)适当着装D级区头发，胡须需要被遮盖防护工作服和鞋子C级区头发，胡须需要被遮盖连体或者分体式衣服（覆盖手腕，高领），鞋子或鞋套不得有纤维或粒子脱落A/B级区头套，头发胡须需要被遮盖，口罩，手套不得脱落纤维，不易藏纳粒子（防止在操作时有颗粒脱落）17Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第17页人员控制(4)非B/C级区衣物不得存放在通向上述区域更衣间内每次进入洁区进行更衣，或最少天天更换一次服装（需有数据支持）。每次进入需要更换手套和口罩操作时频繁对手套进行消毒衣物清洗-洗衣设施需要分开没有破损，依据验证程序进行清洗和灭菌进行操作人员日常微生物监测生产环境18Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第18页无菌工艺过程无菌工艺过程中，每个部件都需要灭菌，或者几个部件组合在一起灭菌。最常见工艺是溶液制备后进行除菌过滤，然后灌装到无菌容器中（如主药和辅料溶于WFI）也能够包含无菌混合预先灭菌物料，并分装到无菌容器中也可包含分装预先灭菌无菌粉末干热或辐射灭菌将除菌过滤后无菌溶液进行无菌操作，完成结晶或沉淀步骤该工艺处理过程需要更多操作步骤，污染风险更高19Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第19页溶液配制和过滤溶液除菌过滤需要在C级区环境进行如不进行过滤处理，溶液配制需要在B级区背景下A级区中进行（如油膏剂，面霜，混悬剂和乳膏剂）药液需要使用0.22μm孔径以下薄膜过滤器过滤到预先灭菌过容器内。过滤器去除细菌和霉菌无法去除全部病毒和支原体过滤需在正压条件下完成无菌工艺过程20Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第20页无菌工艺过程溶液配制和过滤（2）应考虑采取热力学处理以作为无菌过滤工艺补充推荐使用双重过滤或在灌装之前设置第二个过滤器过滤器不得脱落粒子，石棉材质过滤器不应该被使用除非经过验证，不然同一过滤器不该使用超出一天假如大批量产品药液储存在密封容器里，呼吸口应该用疏水材质除菌气体过滤器21Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第21页无菌工艺过程溶液配制和过滤(3)每个工艺过程应该设定时间程度，如：药液开始混合和灭菌（过滤）之间最长时间过滤后药液在灌装开始前最大储存时间产品在生产线暴露时间灭菌后容器和部件存放时间防止微生物渗透过滤器而设定产品过滤时间对于澄清药液和去除粒子上游过滤器需要设定最长使用时间（不然会造成微生物附着滋生）22Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第22页溶液配制和过滤(4)药液过滤后能够进行冻干。半压塞产品转移(B级区背景A级区条件)

通入冻干机空气/氮气需经除菌过滤无菌工艺过程23Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第23页过滤前药液微生物负荷需制订程度，并每批进行检测依据可控历史数据，检测频率能够考虑适当降低需要部件进行微生物负荷检测应该建立警戒和纠偏程度（通常以10为单位表示，比如10CFU/100ml），假如超出程度应该采取纠偏办法程度水平应该能表达日常监测微生物负荷水平无菌工艺过程24Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第24页过滤前药液微生物负荷(2)没有明确定义“最大程度”，但不应超出经验证过滤器微生物截留能力微生物负荷控制应该包含“生产工艺过程”控制中尤其在产品支持微生物生长和/或生产工艺过程需要使用培养基过多微生物负荷会对产品质量造成负面作用，而且能产生大量内毒素/热原无菌工艺过程25Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第25页过滤器完整性测试过滤液体或气体应使用0.22um或更小孔径过滤器如用于吹洗或保护已灌装产品气体过滤器或通往冻干机真空腔室气体过滤器完整性必须在过滤前后分别进行确认起泡点法压力保持法前进流法过滤器制造商要求了过滤器完整性测试方法，过滤器进行验证时确定了可接收程度无菌工艺过程26Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第26页过滤验证过滤器必须被验证证实能去除细菌最通用方法为挑战过滤器能够截流107CFU/cm2缺点型短小假单胞菌Brevundimonasdiminuta

微生物负荷检测过程发觉菌株或许比缺点型短小假单胞菌更适合确认过滤器截流能力研究挑战菌浓度通常是为了提供远超出日常生产过程微生物负荷安全余量挑战微生物最好能够加入正常产品中进行过滤。无菌工艺过程27Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第27页过滤器验证(2)假如产品含有杀菌性，则应该先过滤产品药液，然后再过滤挑战菌液（在消除全部截留在过滤器上过滤器验证应该在最差条件下进行，如：最大许可过滤时间和最大压力日常过滤器完整性测试可接收标准应该和验证时一致无菌工艺过程28Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第28页设备/容器准备和灭菌全部设备包含冻干机和全部产品容器和密闭系统必须用经过验证程序进行灭菌对用于最终灭菌产品生产设备灭菌要求相同尤其注意胶塞灭菌--包装不宜过紧，以防真空灭菌时胶塞贴在一起，影响抽真空。器具包裹应该有利于抽真空尤其注意过滤器，壳类及管子类物品无菌工艺过程29Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第29页设备/容器准备和灭菌(2)CIP/SIP程序尤其注意死角--对于CIP/SIP不一样方向要求灭菌隧道通惯用作玻璃材质西林瓶/输液瓶类容器灭菌和去热源时间短，温度高需要考虑传送带速度去热源需要验证（3个对数单位内毒素下降）最差情况位置灭菌隧道使用高效过滤器送风无菌工艺过程30Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第30页设备/容器准备和灭菌(2)设备应设计成宜于装配和拆卸，清洁，消毒和/或灭菌设备应该进行有效清洁--清洁时0型圈和垫圈应该被取走，防止污垢或残留淋洗用水应该为注射用水清洗后器具应该晾干除非立刻进行灭菌（预防聚积热源）玻璃容器和胶塞清洗程序应该进行去内毒素验证应该要求灭菌后贮存使用期（使用期应该恰当）无菌工艺过程31Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第31页工艺过程验证对于无菌工艺过程并不能定义无菌确保水平经过培养基灌装进行模拟生产工艺过程进行验证工艺过程模拟时使用适当培养基完成包含配液，过滤和灌装程序在内整个产品生产过程对于不一样药品剂型特点必须进行适当修正，如冻干产品、油膏、大容量无菌产品、灌装入半透明和不透明容器内滴眼剂、生物制品无菌工艺过程32Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第32页工艺过程验证(2)培养基灌装应该包含最差状态下活动最长允许灌装时间（如考查操作人员疲劳操作风险）有代表性正常干扰活动数量、种类和复杂性，非常规干扰和各类突发事件（如维修，灌装中止等）冻干无菌装机无菌工艺过程33Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第33页工艺过程验证(3)最差状态下活动人员数量及其活动，换班，休息，更衣等含有代表性数量无菌操作（如添加容器，密封件，无菌原料成份）或者转移设备无菌连接和拆卸样品无菌搜集生产线速度和模具规格无菌工艺过程34Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第34页工艺过程验证(4)最差状态下活动重量差异检验容器密封性系统无菌工艺过程中特殊用具书写BPR统计验证条件和活动不能用于例证有风险性生产行为无菌工艺过程35Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第35页工艺过程验证(5)连续时间取决于详细操作吹灌封，隔离器生产工艺过程--有足够时间进行操作和干扰对于传统生产模式需要囊括总灌装时间批量批量小于5000瓶，则培养基灌装验证可接收数量为5000-10000瓶对于频繁手工操作生产工艺应该选取较大数量进行培养基灌装验证隔离器生产工艺可选取较低数量进行验证无菌工艺过程36Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第36页工艺过程验证(6)频率和次数ft初始验证每班次连续3批验证随即每六个月针对不一样班次/工艺进行一次再验证全部日常操作人员每年必须参加一次培养基灌装验证全部变更必须进行评定，并按要求进行再验证生产线速度生产线速度依据生产过程类型决定无菌工艺过程37Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第37页工艺过程验证(7)环境条件)有代表性实际生产条件（人员数量，活动水平等）-没有特殊预防办法（不包含高效过滤器调整）如使用氮气保护应该用空气替换培养基一些情况下应该考虑使用厌氧性培养基应该进行促生长试验（包含使用从日常生产环境监测中得到分离菌株）AsepticProcessing

无菌工艺过程38Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第38页工艺过程验证(8)培养和检验温度在20-35ºC之间假如使用2种不一样培养温度，先从低温开始培养由有资质人员进行检验全部完好培养基瓶都应该被培养。任何没有进行培养培养基都应该说明原因。培养基瓶剔除（不进行培养）应该与日常操作规程一致（尽管假如进行培养能够取得干扰风险相关信息）物料平衡无菌工艺过程39Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第39页工艺过程验证(9)结果评价灌装量为少于5000瓶时不得有任何污染检出一瓶污染应考虑进行再验证，并进行调查灌装量为5000-10000瓶时一瓶污染应进行调查，并考虑进行重新进行培养基灌装验证二瓶污染应考虑进行再验证，并进行调查灌装量大于10000瓶时一瓶污染应进行调查二瓶污染应考虑进行再验证，并进行调查无菌工艺过程40Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第40页工艺过程验证(10)结果评价培养基灌装过程应由QC进行观察，污染瓶应可追溯到实际模拟活动，并时间一致（可全程录像）理想状态--没有污染。任何污染都应该进行调查任何分离菌都应该判定到菌属（遗传学判定进行溯源）无效培养基灌装应该非常少无菌工艺过程41Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第41页工艺过程验证(11)批生产统计回顾内容工艺过程和环境控制活动应该包含在批生产统计之内，并作为批释放时候主要部分给予回顾过程控制检测和试验室检测结果环境和人员监测结果工艺介质数据（高效过滤器/空调系统，注射用水，蒸汽发生器）设备功效（批报警统计，过滤器完整性测试结果）干扰、偏差、中止等--发生时间和连续时间生产线清洁相关书面指示电力供给中止无菌工艺过程42Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第42页对于隔离器和吹灌封工艺过程尤其注意事项隔离器去污染过程能使适当生物指示剂下降4-6个对数单位当表面有没有活性微生物要求时，需要证实最少能杀灭6个对数单位生物指示剂。对于手套完整性需要重点关注-

-每日检验，在隔离器内使用第二副手套应该保持传统无菌操作习惯无菌工艺过程43Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November无菌工艺WHO专题知识第43页(BFS)吹灌封技术D级区环境背景关键区域应该到达A级区水平（微生物）要求（动态时空气悬浮粒子水平极难到达）操作