各种无机培养基配方

本文格式为Word版，下载可任意编辑——各种无机培养基配方1、毕赤酵母表达硒代重组人血清白蛋白：

基础盐培养基BSM:硫酸钙0.93g/L,硫酸钾18.2g/L,七水硫酸镁14.9g/L,柠檬酸三钠1.47g/L,微量元素2mL/L,甘油40g/L,硫酸铵10g/L,磷酸钾缓冲液(pH6.0)0.1mol/L。

微量元素主要成分:五水硫酸铜6.0g/L,碘化钾0.08g/L,一水硫酸锰3.0g/L,二水钼酸钠0.2g/L,硼酸0.02g/L,硫酸钙0.5g/L,氯化钴0.5g/L,氯化锌20.0g/L,七水硫酸亚铁65.0g/L,硫酸5.0mL/L,生物素0.2g/L。试剂均为国产生化试剂纯或分析纯。

发酵将50μL种子液接种于5mL的YPG培养基中,30℃振荡培养18222h,转接到装有100mL基础盐培养基的500mL带挡板的摇瓶中。转速180r/min,温度30℃培养,每8小时用浓氨水调理发酵液pH值至610。约48h时,取样检测甘油浓度,待甘油耗尽后参与甲醇开始诱导。诱导期培养温度为28℃,pH值调理至710[526],每12h补加体积分数015%的纯甲醇和10mg/L的亚硒酸钠,对照发酵液不添加亚硒酸钠。诱导96h后中止发酵。

2、重组人血清白蛋白在毕赤酵母表达中的降解控制

PBM：甘油40g/L，磷酸（85%）26.7g/L，二水硫酸钙0.6g/L，硫酸钾9.5g/L，七水硫酸镁7.8g/L，氢氧化钾2.6g/L，PTM12ml/L，生物素0.00004g/L，硫胺0.00019g/L，浓氨水调理为所需pH，试剂均为国产生化试剂纯或分析纯。PTM1：Invitrogen公司提供的标准配方。

发酵：生长期温度为30℃，pH用浓氨水调理，培养期间每4h调理一次维持原pH值，甘油耗尽后甲醇诱导，诱导过程中每12h补加体积分数0.5的纯甲醇，摇床转速180r/min，摇瓶为500ml的底部有挡板的三角瓶，装液量50mml。

3、High-LevelExpressionofRecombinantHumanSerumAlbuminfromtheMethylotrophicYeastPichiapastoriswithMinimalProteaseProductionandActivation

BasalBatchMedium

ComponentGlycerol甘油(NH4)2SO4硫酸铵KH2PO4磷酸二氢钾KCl氯化钾NaCl氯化钠MgSO4.7H2O七水硫酸镁ZnSO4.7H2O七水硫酸锌CuS04.5H2O五水硫酸铜FeCl3.6H2O六水氯化铁CaCl2.2H2O二水氯化钙Biotin生物素Concentration（g/L）50.02.020.04.00.48.00.10.020.10.40.001VitaminBlVB1VitaminB6VB6Na-Pantothenate泛酸钠Inositol肌醇0.10.010.10.5PBMmedium

ComponentsGlycerol甘油H3PO4(85%)磷酸CaSO4.2H2O二水硫酸钙K2SO4硫酸钾MgSO4.7H2O七水硫酸镁KOH氢氧化钾PTM1w/obiotinBiotin生物素Thiamin硫胺（VB1）Concentration(g/L)50.023.70.69.57.82.60.930.000040.00019发酵：3L发酵罐装1LBasalBatchMedium或PBMmedium，30℃，调理转速保持溶氧大于10%，甘油耗尽后流加PFM（每升含有2mlPTM1-不含生物素的甲醇），手动控制甲醇浓度低于1%（w/w），28%的氨水调理pH为5.85。

4、提高重组毕赤酵母表达hIFNβ-HSA的碳源控制策略

发酵培养基(BSM,g/L)：Glycerol20.0，(NH4)2SO45.0，KH2PO442.9，CaSO4

?2H2O1.0，K2SO414.3,MgSO4?7H2O11.7及1mL/LPTM4微量元素溶液.

PTM4微量元素溶液(g/L):CuSO4?5H2O2.0，NaI0.08，MnSO4?H2O3.0，

Na2MoO4?2H2O0.2，H3BO30.02，CaSO4?2H2O0.5，CoCl20.5，ZnCl27.0，FeSO4?7H2O22.0，生物素0.2，H2SO41.0mL/L.

诱导培养基(g/L)：(NH4)2SO45.0，KH2PO442.9，CaSO4?2H2O1.0，K2SO414.3，

MgSO4?7H2O