牛人工授精技术培训

关于牛人工授精技术培训第一页，共五十六页，编辑于2023年，星期二牛冷配改良技术要点1、子宫解剖2、发情鉴定3、卵泡与黄体4、输精时间5、输精部位6、难孕牛治疗第二页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第三页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第四页，共五十六页，编辑于2023年，星期二1、子宫解剖第五页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第六页，共五十六页，编辑于2023年，星期二2、发情鉴定第七页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第八页，共五十六页，编辑于2023年，星期二3、卵泡与黄体第九页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第十页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第十一页，共五十六页，编辑于2023年，星期二牛冷冻精液配种的工作房间的要求

(1)有3-5平方米的面积，能放下一个液氮罐和一张工作用桌；使用一间独立的房屋或在一个避静、卫生的房间选用一个角皆可。地面以水泥或砖地为好，易打扫，灰尘少。

(2)房间应有水、电，房间及周围环境应干净、卫生、干燥、通风。

(3)每日应打扫地面卫生，擦去桌面和器具的尘土，一周(至少一个月)应大扫除一次。

(4)房间内不能存放有挥发性气味的药品，室内禁止吸烟、禁止堆放与工作无关的物品。

第十二页，共五十六页，编辑于2023年，星期二牛冷冻精液解冻注意事项

(1)所有直接接触冷冻精液的器具及容器都应是灭菌消毒过的。防止液氮罐内和解冻过程中的污染，如镊子、装解冻液和精液的容器等

(2)32－38℃是适宜的解冻温度，温度低了影响精子的恢复，高于42℃会使精子迅速死亡；

第十三页，共五十六页，编辑于2023年，星期二冷冻精液解冻后的存放注意事项

(1)解冻后就应将精液从水浴中取出，长时间放在较高的温度下，会加速精子的衰竭；

(2)解冻后尽快输精，常用的解冻液成分比较简单，不能长时间保存精液，解冻后输精越快越好，细管冷冻精液最多不能超过1小时，颗粒冷冻精液最多不能超过2小时；

(3)解冻后不能再次急剧的升温或降温，否则会影响冻精的活力；

(4)解冻后需要远距离运输的，可用10－15℃解冻，解冻后用棉花等包裹好，低温保存(5℃)和携带，可延长精子的存活时间数小时。第十四页，共五十六页，编辑于2023年，星期二用显微镜检查精液活力

载玻片、盖玻片和其它接触精液的器具应预热，加热时又要注意不能超过40℃。

注意使用器具的卫生和溶液的质量。

显微镜物镜不要直接沾上了精液。

对焦距时将显微镜镜头从下往上运动，先将镜头靠近盖玻片，再逐渐轻缓地上移聚焦，以免损坏镜头和载玻片。

用放大100－200倍观察即可，视野大，可看到精液的总体情况，操作容易。

第十五页，共五十六页，编辑于2023年，星期二输精时间 发情开始后8—24h

适宜输精时间

发情开始

发情结束

0 12 24 排卵

输精部位 卵泡侧的子宫角基部

子宫颈内口处的子宫体基部

输精次数 1---2次第十六页，共五十六页，编辑于2023年，星期二-第十七页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第十八页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第十九页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十一页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十二页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十三页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十四页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十五页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十六页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第二十七页，共五十六页，编辑于2023年，星期二直把输精操作技术

(1)输精员在操作前戴好长臂手套或徒手涂以润滑剂，输精器按操作规程装好精液备用，配种牛保定牢靠；

(2)将一只手（左手更方便些）伸入母牛直肠内，掏出粪便，清洗母牛外阴部并擦干。用伸入直肠的手隔着直肠壁找到子宫颈并轻握，主要用大拇指、食指和中指固定和调整子宫颈的位置。另一只手持输精器沿阴道上壁先斜向上，再平直向前，至子宫颈外口处；

(3)双手凭感觉协同操作，主要靠伸入直肠的手调整转动子宫颈的方向通过子宫颈。输精器通过子宫颈的螺旋皱襞后，把精液输入刚过子宫颈内口的子宫体基部或卵泡侧子宫角内。第二十八页，共五十六页，编辑于2023年，星期二直把输精操作注意事项

(1)插入输精管时要小心谨慎，不可用力过猛，以防输精器穿破子宫颈或子宫壁(没必要输入太深)。

(2)个别母牛努责，直肠壁收缩紧张，子宫颈也向后移。这时，可把手前伸，刺激肠壁，使其放松，然后握住子宫颈向前推，使阴道壁伸展，以便于输精管插入。

(3)有些母牛子宫垂入腹腔，可用手握住子宫颈慢慢往上提，才便于输精管通过。

第二十九页，共五十六页，编辑于2023年，星期二(4)有时输精管已到达子宫颈口，就是不好插入，这可能是子宫颈开张不好，有炎症、颈口有疤痕等，或许是已孕母牛假发情，遇到这些情况要认真检查，诊断清楚，妊娠牛强行深部输精会引起流产。

(5)操作时应主要靠直肠内的手调整子宫的位置，不能靠持输精器的手硬戳。

(6)术者最好先将阴唇掰开(或由助手协助)，把输精器插入阴道后再将操作手伸入直肠，也可将伸入直肠的手臂往侧下压，使阴门裂张开，这样输精器头部不会碰到阴唇外部，不易被污染。第三十页，共五十六页，编辑于2023年，星期二牛配种时间不宜过早母牛发情持续时间18-24小时

排卵发情结束后的6-12小时

精子在母牛生殖道的存活时间12-20小时

精子在子宫和输卵管内获能需数小时

卵子排出后能够保证正常受精的时间为数小时

第三十一页，共五十六页，编辑于2023年，星期二母牛发情适时输精时间

母牛发情后的12-24小时是适宜的输精时间，6-27小时也可以。

凌晨或上午发情的牛可在下午或傍晚配种，下午或傍晚发情的牛可以在第二天上午配种。

一次输精配种，在发情后18-24小时。

有些发情持续时间长、排卵延迟的牛需第三次输精，以确保精卵能够结合受精。第三十二页，共五十六页，编辑于2023年，星期二母牛一次发情输精次数

有经验的技术员，在发情开始后的18-24小时一次输精即可达到满意地受胎率(≥60％)。

两次输精法，即在母牛发情后约12小时(早晨或上午发情，在下午或傍晚配种，下午发情的牛第二天早配种)第一次输精，间隔约12小时第二次输精。

发情时间延长的母牛需第三次输精。

第三十三页，共五十六页，编辑于2023年，星期二输精部位

卵泡侧的子宫角基部。

子宫颈内口处的子宫体基部

两角及子宫体基部三点输精

子宫颈难通过的牛也可输入子宫颈深部，当然这会损失一部分精液。

常规操作轻缓地将精液输在刚通过子宫颈内口处的子宫体基部。

可用食指在子宫颈内口和子宫体部轻轻触摸输精器的头部确定位置。第三十四页，共五十六页，编辑于2023年，星期二为什么输精部位不能太深？

直把输精不是越深越好。没有必要将精液送得超过子宫角的弯曲部，这是因为：

(1)精子在发情母牛的子宫内运行的很快。十多分钟甚至几分钟即可到达输卵管，精子在子宫内运行有助于精子的获能。

(2)子宫结构

子宫角向下弯曲，发情时子宫水肿和充血，输精器插的太深容易损伤子宫内膜，影响了受胎。

(3)准确输精

如果是左手在直肠内操作，输精器很容易进入右侧子宫角内；如果是右手在直肠内操作，输精器容易进入左侧子宫角。盲目将精液输的太深，可能使排卵侧无精子而使卵子无法受精。

第三十五页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第三十六页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第三十七页，共五十六页，编辑于2023年，星期二细管冷冻精液的解冻和装枪

细管取出后首先在空气中停留几秒，然后用32-38℃水浴升温

水浴时间0.25ml细管停留约15秒钟，

0.5ml装的细管停留约20秒钟。

精液溶解后，从水浴中取出，用较干的酒精棉球或灭菌的棉花、卫生纸等擦干细管外壁，再用专用细管剪刀将细管的封口端垂直剪开，开口端朝前装入输精枪，钢芯对准细管棉塞部，法式卡苏枪将枪体放入塑料外套至头部，固定紧备用。日式金属输精枪无外套，将头部与体部旋紧即可。第三十八页，共五十六页，编辑于2023年，星期二使用细管冷冻精液注意事项

(1)不要在温水中浸泡时间太长。

(2)水浴解冻的容器最好能将细管冻精解冻时横置，如果需将细管垂直放入，将棉塞端朝下。

(3)细管冻精取出后不要急忙将细管放入水中，先在空气中放置几秒，让细管口内的液氮充分挥发，以防止细管“放炮”。

(4)剪塑料细管封口时，应使用专用的细管剪刀，这样剪的口齐而且园，输精时精液不易倒流。

(5)注意细管和细管剪刀的卫生，因为细管口部分要接触精液。第三十九页，共五十六页，编辑于2023年，星期二(6)往输精枪里装细管时，将输精枪的钢芯先插入细管的棉塞端口内，以防推精液时钢芯走到细管外。如果推精液时阻力很大，可能就是钢芯跑到细管外了或是钢芯不直。

(7)用法式卡苏枪将金属枪体放入塑料外套时要行至塑料外套的头部，否则输精时头部的塑料部分可能会打折。塑料外套长了，应剪去一段。

(8)输精部位不能太深，尤其是使用有塑料外鞘的输精枪，许多塑料外鞘的头部不光滑，很容易损伤子宫内膜。

(9)输精器枪体不要碰折，钢丝弯曲后推细管棉塞困难。

(10)个别青年母牛或土杂种母牛子宫颈开口小，没有输精枪体的直径粗，无法通过子宫颈。碰到这种情况，可用颗粒精液输精，颗粒精液的输精器比细管输精枪细。没有颗粒精液时，可将细管精液推入试管内，加入近1毫升生理盐水或其它解冻液，用颗粒输精器输精。

第四十页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第四十一页，共五十六页，编辑于2023年，星期二液氮罐在使用中需要注意什么问题？

(1)液氮罐放置在荫凉避静处，室内通风。

(2)运输和搬运中要防止震荡和碰撞。贮存罐不能作为运输罐使用。

(3)罐外保持卫生，罐内注意无菌。许多病菌在液氮低温下不会死亡，液氮罐内也可能传播病菌，因此不要用不卫生的器具接触液氮，不要将不卫生的绳袋等放入罐内。每年应将罐内清洗一次，液氮罐停用时，应将罐内的颗粒等清理干净，否则罐内会生霉菌。

(4)取冻精后及时盖罐塞。为了减少液氮消耗，罐口处可用塑料、胶皮等适当密封，但仍要留有通气的缝隙，不可绝对密封。

(5)注意液氮面，绝对不能干罐，干罐后罐内保存的东西即报废，液面高度剩1/3时应补充液氮。如果添加不方便，应将精液沉至罐底，浸入液氮中。第四十二页，共五十六页，编辑于2023年，星期二冷冻精液在取用中应注意什么问题？

(1)取冻精时，提筒只允许提至液氮罐颈口水平线下，严禁提出罐口，而且停留时间不能超过10秒，需要继续操作时，应将提筒浸入液氮后再提起操作。

(2)向另一液氮罐转移冻精时，提筒离开液氮面的时间不能超过5秒；

(3)颗粒冻精要放入系口的纱布袋内，不能直接放入提筒内，否则取冻精后提筒再次入液氮时，提筒内液氮沸腾，冻精会漂出提筒，可将纱布袋口线绳系一个可滑动的活扣，易开易合，取用方便。

(4)取冻精的镊子，拴冻精袋的线绳等接触冻精和液氮的物品要卫生。

(5)取颗粒冻精时，用止血钳比镊子好，冻精不易滑落。第四十三页，共五十六页，编辑于2023年，星期二6、难孕牛治疗第四十四页，共五十六页，编辑于2023年，星期二难孕牛的概念

母牛不孕症为暂时性或永久性的繁殖障碍。繁殖率降低，则产奶量下降，饲养管理和治疗及配种开支增大。诊断标准为全年配种牛的纯种奶牛，一般产奶量的母牛产后80天、高产奶牛120天，青年牛20月龄、超过这个时间即属难孕牛。农牧区饲养的牛，由于季节和饲养管理条件的限制，常季节性发情，正常配种3个情期不孕的牛或参加配种70天未受胎的牛为难孕牛。

第四十五页，共五十六页，编辑于2023年，星期二难孕牛诊断

(1)调查病史，查明原因、症状、发病头数、年龄、饲养管理、精液品质、输精技术、繁殖史、既往症等。

(2)临床检查全身、阴道、直肠检查。

(3)实验室检查在实验室做微生物、子宫内膜活组织和激素测定等。

第四十六页，共五十六页，编辑于2023年，星期二先天性不孕症治疗

(1)幼稚病—生殖器官发育不全；

治疗：

公畜刺激；

按摩卵巢子宫；

激光穴位照射。

激素治疗法有：HCG静脉注射或肌肉注射2500-5000单位；

PMSG1500IU肌肉注射；

雌二醇或苯甲酸雌二醇5-20mg；

已烯雌酚5-20mg。

第四十七页，共五十六页，编辑于2023年，星期二(2)两性畸形(雌雄间体，半阴阳)─无法治疗、淘汰；

(3)异性孪生不孕—受雄激素影响在性分化中造成，染色体异常，直检时摸不出正常的子宫和卵巢，阴道短小，为盲端，输精器无法插入；这种母牛应淘汰。

(4)生殖道畸形

单子宫角

子宫颈闭锁

双颈双口

膣肛第四十八页，共五十六页，编辑于2023年，星期二第四十九页，共五十六页，编辑于2023年，星期二后天性不孕症治疗

(1)营养性：瘦弱、过肥、饲料不全价、品质不良。

①VitA

10-20万单位，间隔5-7天，用3-4次；

②VitD

2.5-10万单位，间隔7天用3-4次，同时加强运动和光照；

③VitE100-200ml，间隔5-7天使用3次；

④日粮中补充比例适当的矿物质和微量元素。

(2)气候性：严冬、酷暑。

(3)管理性：高产、使役过度。

(4)繁殖技术性：漏配，技术操作不过关。

(5)衰老性：绝情期13-15岁。

第五十页，共五十六页，编辑于2023年，星期二休情母牛常用的治疗方法

FSH100-200单位生理盐水稀释3-4ml，肌肉注射；

LH100-200单位生理盐水稀释3-4ml，肌肉注射；

HCG静脉注射2500-5000单位，肌肉注射5000-20000单位；

LHRH-A200-1000微克肌肉注射；

PMSG1000-2000IU肌肉注射；

孕激素注射、埋植或阴道栓法处理9－12天；

雌二醇20-30mg一次肌肉注射。

三合激素按1ml/100kg肌肉注射；

LHRH-A25-100μg，隔9天后PGF2α；

电针、激光或催情的中药方剂；

垂体后叶素；

胎盘组织液20ml；

浓盐水灌注子宫。第五十一页，共五十六页，编辑于2023年，星期二持久黄体的诊断和治疗

未妊娠，近期也未配种的母牛，经2-3次检查，同部位存在着同一黄体20天以上可确诊为持久黄体。

治疗方法：PGF2α类似物，宫注1支