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文档简介

免疫学实验T淋巴细胞亚群检测1T淋巴细胞亚群分类方式？

检测T淋巴细胞亚群的临床意义？T淋巴细胞亚群的检测方法？思考2淋巴细胞类别及其亚类3淋巴细胞类别及其亚类4

检测T淋巴细胞亚群的临床意义病毒感染肿瘤患者自身免疫性疾病免疫缺陷病5

T淋巴细胞亚群的检测方法？免疫荧光法免疫酶标法PAP法

APAAP法

ABC法免疫金银法SPA花环形成法6

用碱性磷酸酶代替HRP建立的碱性磷酸酶(AP)-抗碱性磷酶(AAP)法，简称APAAP法。+++底物二抗/Ab2Ag兔源APAAP复合物AgAgAgAg-Ab1-Ab2-APAAP复合物APAAP法检测T淋巴细胞亚群7APAAP复合物+++底物二抗/Ab2Ag兔源APAAP复合物AgAgAgAg-Ab1-Ab2-APAAP复合物APAAP法检测T淋巴细胞亚群2个鼠抗人AP抗体+3个AP=APAAP鼠抗人的AP抗体AP8

APAAP法原理：++底物二抗/Ab2兔源一抗/Ab1AgAgAgAg鼠抗人的CD3、CD4和CD8单克隆抗体

羊抗鼠IgG抗体底物9

方法：1制备血涂片，干燥过夜，圈出要检测的视野范

围，滴加固定液一滴，1～2min后，PBS冲洗3

次，最后一次干燥。2

滴加一抗10～15μL，放入湿盒20～30min，

PBS冲洗3次，最后一次干燥。3

滴加羊抗鼠二抗10～15μL，放入湿盒20～30minPBS冲洗3次，最后一次干燥。

停留1min倒掉10

方法：4

滴加APAAP复合物10～15μL，放入湿盒20

～30min，PBS冲洗3次，最后一次干燥。5

滴加底物液20～40μL，放入湿盒20～30minPBS冲洗3次，最后一次干燥。6

滴加苏木素复染液一滴复染1～2min，自来水冲洗，干燥。7油镜观察。

11

实验结果：观察T淋巴细胞亚群检测实验结果，并绘图阳性细胞，胞浆蓝色胞膜红色，阴性细胞胞浆蓝色胞膜无色。阳性细胞阳性细胞12

实验结果：正常值：CD3+T细胞70-90%CD4+T细胞40-60%CD8+T细胞20-35%CD4+T细胞/CD8+T细胞1.5～2

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