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文档简介
活细胞高速激光共聚焦显微镜简介
生物技术研究室颜次慧2014-1-8一.活细胞观察的优势活细胞动态观察静态成像科研角度能够连续观察细胞及分子水平的动态变化,阐明机制,更能说明问题需要大量样品、时间点,样品的差异化问题,出现假阳性结果应用范围既能满足高分辨,又能够满足时间分辨要求比较高的实验无法做时间分辨比较高的实验,以及对细胞或分子实时动态三维观察实验过程实验简单化,操作步骤少,数据信息充足实验设计复杂,步骤多,数据信息少活细胞/活体荧光成像目标:在最大程度保证生物活性的前提下获得真实的连续动态影像要求:尽可能减少外界因素对生理功能的影响,把光毒性和光漂白减少到最低,尽可能降低激发光强度,所以荧光信号非常微弱高速活细胞转盘式激光共聚焦显微镜活细胞工作站二、活细胞观察的革命性技术共聚焦原理
点扫描激光共聚焦双转盘式扫描激光共聚焦高速活细胞激光共聚焦系统构成
共聚焦扫描单元单光子探测器Z轴防漂移显微镜用活细胞CO2培养室高精度XY电动平台激光光源、激光耦合系统高速压电陶瓷Z轴马达研究及倒置荧光显微镜系统软件高速活细胞激光共聚焦系统用途主要用于长时间观察并记录荧光标记的活细胞和固定细胞/组织的共聚焦图像,进而分析细胞内或细胞间发生的信号传导、蛋白表达、囊泡运动、细胞动力学、细胞与粒子之间的相互作用及生理学行为。单光子探测器AndoriXon探测极微弱信号,显著减少活细胞光漂白以及光毒性损伤1.减少光毒性和光漂白高速活细胞激光共聚焦系统特点CCD芯片接收光信号并将其转换为电信号,这一过程系统会产生一定的电子噪声电子信号经芯片上的增益寄存器可放大至1000倍ElectronMultiplyingCCD(EMCCD)2.先进的片上增益技术CCDEMCCD3.多维共聚焦成像3D:XYT、XYZ4D:XYZT、XYZ5D:XYZT6D:XYZTP4.多视野观察
SingleImageField~20Cells2x2Montage~80Cells3x3Montage~180cells增加了实验数据的样本量XY电动平台探测单元ZDCCoverGlass:170umGlassbottomdish5.
Z轴防漂移
Z轴零漂移系统785nmLase
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