标准解读
《GB/T 25220-2010 粮油检验 粮食中赭曲霉毒素A的测定高效液相色谱法和荧光光度法》是一项国家标准,旨在规范粮食及粮油制品中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)含量检测的方法。该标准提供了两种测定方法:高效液相色谱法(HPLC)与荧光光度法。
对于高效液相色谱法而言,首先需要对样品进行预处理,通常包括提取、净化等步骤。提取过程中,使用适当的溶剂将样品中的赭曲霉毒素A溶解出来;接着通过固相萃取柱或其他方式去除杂质,以获得较为纯净的目标分析物溶液。随后,在特定条件下利用HPLC仪器进行分离,并采用紫外检测器或荧光检测器来定量分析目标化合物。此方法具有较高的灵敏度和准确性,适用于复杂基质样品中微量组分的测定。
荧光光度法则基于赭曲霉毒素A在特定波长下能够发出荧光这一特性来进行定性和定量分析。同样地,也需要先经过提取和净化过程得到待测液。然后,在选定的最佳激发波长和发射波长条件下测量其荧光强度,根据标准曲线计算出样品中赭曲霉毒素A的具体含量。这种方法操作相对简便快捷,但对于某些干扰物质可能存在一定的局限性。
两种方法各有特点,选择时需考虑实验室条件、设备配置以及具体检测需求等因素。无论是采用哪种技术手段,都应严格按照标准规定执行实验操作流程,确保结果准确可靠。
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文档简介
ICS67040
X04.
中华人民共和国国家标准
GB/T25220—2010
粮油检验粮食中赭曲霉毒素A的测定
高效液相色谱法和荧光光度法
Inspectionofgrainandoils—DeterminationofochratoxinAingrainsbyhigh
performanceliquidchromatographyandfluorometer
2010-09-26发布2011-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T25220—2010
前言
本标准的附录和附录为资料性附录
AB。
本标准由国家粮食局提出
。
本标准由全国粮油标准化技术委员会归口
。
本标准负责起草单位国家粮食局科学研究院
:。
本标准参加起草单位上海国家粮食质量监测中心北京中检维康技术有限公司吉林省粮油卫生
:、、
检验监测站
。
本标准主要起草人王松雪王雄何志军刘焓薛斌张艳孙长坡马小妮王岩高晓春
:、、、、、、、、、。
Ⅰ
GB/T25220—2010
粮油检验粮食中赭曲霉毒素A的测定
高效液相色谱法和荧光光度法
1范围
本标准规定了采用高效液相色谱法和荧光光度法测定粮食中赭曲霉毒素的原理试剂和材料
A、、
仪器和设备操作步骤及结果表示
、。
本标准适用于小麦玉米稻谷中赭曲霉毒素的测定
、、A。
免疫亲和柱净化高效液相色谱法和免疫亲和柱净化荧光光度法的检测限均为离子交换
1μg/kg,
固相萃取柱净化高效液相色谱法检测限为
0.8μg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款凡是注日期的引用文件其随后所有
。,
的修改单不包括勘误的内容或修订版均不适用于本标准然而鼓励根据本标准达成协议的各方研究
(),,
是否可使用这些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本标准
。,。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
3免疫亲和柱净化高效液相色谱法
31原理
.
试样中的赭曲霉毒素用乙腈水提取后利用抗体与其相应抗原之间的专一性免疫亲和反应
A+,,
以含有赭曲霉毒素特异性抗体的免疫亲和层析柱净化提取液用配有荧光检测器的高效液相色谱仪
A,
测定外标法定量
,。
32试剂和材料
.
除另有规定外所用试剂均为分析纯实验用水应符合中二级用水要求
,,GB/T6682。
321乙腈色谱纯
..:。
322甲醇色谱纯
..:。
323氯化钠
..。
324冰醋酸
..。
325吐温
..-20(Tween-20)。
326碳酸氢钠
..。
327磷酸氢二钠
..。
328磷酸二氢钾
..。
329氯化钾
..。
3210浓盐酸
..。
3211赭曲霉毒素标准品纯度
..A(OchratoxinA,OTA):≥99%。
3212提取液乙腈水
..:(3.2.1)+=60+40。
3213磷酸盐缓冲溶液氯化钠磷酸氢二钠磷酸二氢钾
..(PBS):8.0g(3.2.3)、1.2g(3.2.7)、0.2g
和氯化钾溶解于约水中用浓盐酸调节至用水稀释至
(3.2.8)0.2g(3.2.9)990mL,(3.2.10)pH7.0,1L。
3214淋洗缓冲液氯化钠碳酸氢钠溶于水中加
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