小鼠骨髓染色体标本的制备_第1页
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小鼠骨髓染色体标本的制备

一、实验目的：掌握小鼠骨髓染色体标本的制备方法。观察小鼠染色体的形态和数目。二、实验原理小鼠骨髓细胞用秋水仙素积累分裂相，用0.075mol/L-1KCI进行低渗后，经固定、染色，可见到分散的染色体。实验五、小鼠骨髓染色体标本的制备

三、实验步骤：1、取材：以颈椎脱臼法处死小鼠，取两腿股骨，剔净肌肉，擦去附着在上面的血污，剪取两端股骨头，暴露骨髓腔，用注射器吸取KCL(0.075mol/L)溶液，将针头插入骨髓腔上段冲洗，用离心管接收冲洗液。2、低渗处理：加KCL至2/3管，用吸管打匀使细胞悬浮于低渗液中，放入37℃恒温水浴锅中，静置25min。（吹打不宜过猛）3．预固定：加入固定液5滴吹打混匀。4．离心：2000转/分，离心5min，弃上清液，留下沉淀物。5、固定：沿离心管壁加入固定液5ml打匀，室温下固定10min。6、再离心：2000转/分，离心5min，弃上清液，留下沉淀物。7、再固定：再加入固定液2－3滴，打匀。8、制片：用滴管吸细胞悬液，从20－30cm高度滴在冰水预浸泡的洁净载玻片上，立即用口吹散，在酒精灯上过几次或吹风机吹干。9、染色：Giemsa染液染色7min、细水冲洗、晾干。10、镜检：低倍镜下找到分散良好的分裂相后，换高倍镜、油镜、认真观察。

四、作业1为什么要低渗处理？

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