免疫增殖病的检验

免疫增殖病的检验何印蕾第一节免疫增殖病的分类一、定义免疫增殖病（immunoproliferativedisease）是指免疫器官、免疫组织或免疫细胞（包括淋巴细胞和单核—巨噬细胞）异常增生（包括良性或恶性）所致的一组疾病。

这类疾病的表现有免疫功能异常及免疫球蛋白质和量的变化。二、免疫增殖病的分类增殖细胞疾病T细胞ALL、淋巴母细胞瘤、部分非霍奇金淋巴瘤等。B细胞CLL、MM、传单、原发性巨球蛋白血症、淋巴瘤等组织-单核细胞急单、急性组织细胞增多症等其它毛细胞白血病、其他霍奇金病等第二节免疫增殖病的免疫损伤机制一、浆细胞异常增生浆细胞异常增生是指单克隆浆细胞异常增生并伴有单克隆免疫球蛋白或其多肽链亚单位合成异常。

对多发性骨髓瘤细胞的起源观察表明，骨髓瘤细胞起源于骨髓中的前B细胞进入淋巴细胞阶段，当受到抗原刺激后，其增殖产生记忆的B细胞，B细胞在淋巴结中完成免疫球蛋白类别转换，可变成为浆细胞的瘤细胞并移至骨髓定居并增殖。在通常情况下IL-6是支持浆细胞增殖分化的关键因子，所以浆细胞的瘤细胞的持续增殖当有IL-6的持续高水平存在。而临床检测表明骨髓瘤患者血清IL-6确有异常升高。因此，高水平的IL-6是浆细胞瘤的原因之一。二、正常体液免疫抑制正常的体液免疫是B细胞的增殖分化产生效应的过程，一系列细胞因子将有序地启动上述过程，IL-4可启动休止期的B细胞进入DNA合成期；IL-5促进B细胞继续增殖；IL-6促使B细胞分化为浆细胞，正常条件下IL-6可以反馈抑制IL-4控制B细胞的增殖分化过程，上述过程构成了一个生物信息调节回路，恰到好处地控制体液免疫应答过程的有序进行。

浆细胞瘤患者体内IL-6水平异常增高，其直接的效应是抑制IL-4的产生，从而抑制了整个体液免疫反应的过程。另外，浆细胞瘤可以分泌大量无抗体活性的免疫球蛋白，其Fc段与正常B细胞和原浆细胞以及其它有Fc受体的细胞结合，这些细胞表面将被无活性的免疫球蛋白封闭，影响对其他生物信息的接收，并可阻断B细胞的增殖、发育和影响抗原提呈。三、异常免疫球蛋白增生所造成的病理损伤浆细胞异常增生的后果是产生大量的单克隆型免疫球蛋白或其片段，这类免疫球蛋白或片段无正常的免疫功能。多为一种类型或为重链或轻链，其含量远远高于正常的免疫球蛋白。这些恶性增殖的免疫球蛋白可以沉积于组织，造成组织变性和淋巴细胞浸润，导致相应器官的功能障碍，因其血浆浓度过高而导致血液粘稠度增加，产生一系列直接或间接的病理损害。第三三节节常常见见免免疫疫球球蛋蛋白白增增殖殖病病单克克隆隆免免疫疫球球蛋蛋白白增增殖殖病病是是指指患患者者体体内内存存在在异异常常增增多多的的单单克克隆隆免免疫疫球球蛋蛋白白的的一一类类疾疾病病。。免疫疫球球蛋蛋白白电电泳泳位位置置在在丙丙种种球球蛋蛋白白区区域域，，故故又又称称丙丙种种球球蛋蛋白白增增殖殖病病，，由由于于单单克克隆隆细细胞胞增增生生，，所所以以其其产产生生的的免免疫疫球球蛋蛋白白理理化化性性质质高高度度均均一一，，但但无无抗抗体体及及其其它它免免疫疫活活性性，，所所以以这这类类免免疫疫球球蛋蛋白白亦亦叫叫副副蛋蛋白白或或M蛋蛋白白。。M蛋蛋白白可可通通过过肾肾小小球球从从尿尿中中排排出出，，即即本本-周周蛋蛋白白。。一、、多多发发性性骨骨髓髓瘤瘤(一一)定定义义多多发发性性骨骨髓髓瘤瘤（（multiplemyelomaMM)是是浆浆细细胞胞增增生生的的恶恶性性肿肿瘤瘤，，其其免免疫疫学学特特征征:血血清清中中和和尿尿中中出出现现M蛋蛋白白、、血血清清中中正正常常Ig水水平平明明显显降降低低、、骨骨髓髓中中不不成成熟熟的的浆浆细细胞胞比比例例显显著著升升高高。。(二二)、、临临床床表表现现和和病病理理变变化化1、、早期期：：无无特特殊殊症症状状，，仅仅表表现现为为ESR增增快快，，血血中中检检出出M蛋蛋白白、、蛋蛋白白尿尿、、浆浆细细胞胞增增多多。。2、、典典型型病病人人症症状状及及病病理理变变化化：：(1)骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞增增生生，，浸浸润润和和破破坏坏骨骨组组织织，，造造成成骨骨质质疏疏松松和和溶溶骨骨性性病病变变，，导导致致骨骨痛痛和和不不同同部部位位的的骨骨折折；；(2)、、恶恶性性增增殖殖的的骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞代代替替了了骨骨髓髓中中的的正正常常成成分分，，引引起起贫贫血血、、粒粒细细胞胞、、血血小小板板减减少少，，由由于于M蛋蛋白白增增高高，，引引起起血血粘粘增增加加，，或或沉沉积积于于肾肾小小管管中中，，造造成成肾肾小小管管上上皮皮细细胞胞淀淀粉粉样样变变性性，，发发生生肾肾病病综综合合征征，，严严重重时时可可导导致致肾肾衰衰。。血血粘粘增增高高可可引引起起神神经经功功能能障障碍碍。。(3)、、骨骨髓髓瘤瘤细细胞胞浸浸润润其其它它组组织织时时，，可可引引起起其其相相关关组组织织或或器器官官的的病病变变。。(三)、分分类根据M蛋白白的类类别不不同可可分为为：IgG型：：约占占50~60%IgA型：：约占占20~25%IgD型约约：占占1~2%IgE型约约：罕罕见根据浆浆细胞胞合成成功能能不全全分类类可分分为：：轻链病病和重重链病病二、原原发性性巨球球蛋白白血症症是一种种伴有有血清清IgM增增加的的B细细胞增增殖病病。病病因不不明。。临床床症状状：主主要表表现为为IgM过过多所所致的的血液液高粘粘性综综合征征，另另外贫贫血、、肝脾脾、淋淋巴结结肿大大、反反复感感染也也常见见。三、重重链病病由于浆浆细胞胞发生生突变变并异异常增增殖，，合成成功能能障碍碍，只只产生生免疫疫球蛋蛋白的的重链链或有有缺陷陷的重重链，，不能能与轻轻链组组成完完整的的免疫疫球蛋蛋白白分子子，致致使血血清中中和尿尿中出出现大大量游游离的的无免免疫功功能的的重链链，称称为重重链病病。四、良良性单单克隆隆丙种种球蛋蛋白病病是指血血清中中出现现M蛋蛋白，，而不不伴有有浆细细胞恶恶性性增殖殖的疾疾病。。本病病一般般无症症状，，往往往因其其它疾疾病就就诊时时发现现血中中有M蛋白白。如如果尿尿中出出现本本-周周氏蛋蛋白则则是危危险信信号。。第四节节免免疫疫检测测方法法免疫球球蛋白白异常常增生生病的的实验验室诊诊断主主要依依靠血血液学学和免免疫学学手段段，其其中免免疫学学检测测尤为为重要要。常常用以以下方方法进进行检检测：：一、血血清蛋蛋白区区带电电泳蛋白质质区带带电泳泳是血血清蛋蛋白的的经典典分析析方法法，血血清(或尿尿液)标本本中不不同性性质的的蛋白白质可可明显显分开开形成成不同同的区区带，，通过过正常常的电电泳图图谱进进行比比较分分析，，可发发现患患者者电泳泳图谱谱有一一狭窄窄而浓浓缩的的集中中带，，即M区带带。如如下图图二、免免疫球球蛋白白定量量测定定常用单单向扩扩散法法和免免疫浊浊度法法。恶恶性性单克克隆丙丙种球球蛋白白病呈呈现某某一类类丙种种球蛋蛋白的的显著著增高高(>30mg/ml)。良良性单单克隆隆丙种种球蛋蛋白病病增高高不显显著，，一般般在20mg/ml以下下。三、免免疫球球蛋白白的分分类鉴鉴定(一)、免免疫电电泳免疫电电泳是是将区区带电电泳和和免疫疫扩散散结合合起来来的一一种免免疫学学分析析法。。血清清标本本先经经区带带电泳泳将各各种蛋蛋白成成分分分开，，继而而用各各种特特异性性抗血血清进进行免免疫扩扩散，，根据据M蛋蛋白在在免疫疫电泳泳中所所形成成的特特殊沉沉淀弧弧，观观察其其电泳泳迁移移位置置与抗抗原特特异性性，可可将M蛋蛋白的的免疫疫球蛋蛋白类类型和和其轻轻链型型加以以鉴定定。图26-31、如果待待测标标本与与某型型球蛋蛋白重重链及及轻链链抗血血清产产生相相同迁迁移度度的特特殊沉沉淀弧弧，提提示存存在单单克隆隆丙种种球蛋蛋白(M蛋蛋白)，此此现象象多见见于IgG、、IgA、、IgM型多多发性性骨髓髓瘤或或原发发性巨巨蛋白白血症症。2、在同同一抗抗轻链链血清清的反反应中中，同同时出出现两两条相相邻的的特殊殊沉淀淀弧，，则可可能是是除M蛋白白外还还存在在游离离轻，，偶尔尔也可可见两两种M蛋白白，此此时应应进一一歩测测定尿尿中的的本-周蛋蛋白。。3、患患者者血清清仅与与其中中一种种抗轻轻链抗抗血清清产生生一种种特殊殊的沉沉淀弧弧，而而其它它五种种抗血血清均均不产产生沉沉淀弧弧，这这种情情况可可能是是：(1)伴有有肾功功能不不全的的轻链链病，，游离离轻链链较少少从尿尿中排排出而而滞留留于血血液中中；(2)存在在轻链链的四四分子子多聚聚体，，分子子量大大，不不易从从尿中中排出出而存存于血血液中中；(3)尚未未发现现的新新重链链的免免疫球球蛋白白。4、若若患者者血清清只与与IgG、、IgA或IgM中中的一一种抗抗重血血清产产生特特殊沉沉淀弧弧，但但在两两抗轻轻链抗抗血清清中无无沉淀淀弧，，提示示可能能存在在重链链病。。5、非分分泌型骨骨髓瘤血血清标本本在免疫疫电泳中中均不出出现特殊殊沉淀弧弧。(二)免免疫选择择电泳将含抗k或r血血清的的琼脂制制成薄层层琼脂板板，打孔孔后加入入待测血血清进行行火箭电电泳，与与标本相相应的免免疫球蛋蛋白形成成火箭样样沉淀峰峰。然后后于孔的的两侧各各挖一槽槽，加入入某型免免疫球蛋蛋白的抗抗血清或或另一型型轻抗血血，温育育扩散后后，按沉沉淀弧形形成的情情况，进进行鉴定定。(三)免免疫固定定电泳将待测血血清或其其它标本本在琼脂脂平板上上作区带带电泳，，分离后后于其上上覆盖含含抗k或或r轻链链或各类类重链的的抗血清清滤纸，，当抗体体与某区区带中的的单克隆隆免疫球球蛋白结结合后，，便形成成复合物物而沉淀淀下来，，再通过过漂洗与与染色，，呈现浓浓而狭窄窄的着色色区带，，即可判判断单克克隆丙种种球蛋白白的轻链链或重链链型别。。（四）其其它检测测方法本周蛋白白检测：：多发性性骨髓病病阳性率率极高本周蛋白白在PH5.0的条件件下，加加热至50~60ºC时出现沉沉淀，继继续加热热至90ºC后又重新新溶解。。根据这这种理化化性质，，又将其其称为凝凝溶蛋白白。小结：1、掌握握免疫增增殖病的的定义2、熟悉悉免疫增增殖病的的免疫损损伤机制制3、熟悉悉常见的的免疫增增殖病的的临床表表现及免免疫学特特征4、掌握握免疫增增殖病的的免疫学学检验9、静夜夜四无无邻，，荒居居旧业业贫。。。12月月-2212月月-22Thursday,December29,202210、雨雨中中黄黄叶叶树树，，灯灯下下白白头头人人。。。。03:52:3403:52:3403:5212/29/20223:52:34AM11、以我我独沈沈久，，愧君君相见见频。。。12月月-2203:52:3403:52Dec-2229-Dec-2212、故人江江海别，，几度隔隔山川。。。03:52:3403:52:3403:52Thursday,December29,202213、乍见翻疑疑梦，相悲悲各问年。。。12月-2212月-2203:52:3403:52:34December29,202214、他乡生白白发，旧国国见青山。。。29十二二月20223:52:34上上午03:52:3412月-2215、比不了了得就不不比，得得不到的的就不要要。。。十二月223:52上午午12月-2203:52December29,202216、行动出出成果，，工作出出财富。。。2022/12/293:52:3403:52:3429December202217、做前前，能能够环环视四四周；；做时时，你你只能能或者者最好好沿着着以脚脚为起起点的的射线线向前前。。。3:52:34上上午3:52上上午午03:52:3412月月-229、没有失败败，只有暂暂时停止成成功！。12月-2212月-22Thursday,December29,202210、很多事情情努力了未未必有结果果，但是不不努力却什什么改变也也没有。。。03:52:3403:52:3403:5212/29/20223:52:34AM11、成成功功就就是是日日复复一一日日那那一一点点点点小小小小努努力力的的积积累累。。。。12月月-2203:52:3403:52Dec-2229-Dec-2212、世间间成事事，不不求其其绝对对圆满满，留留一份份不足足，可可得无无限完完美。。。03:52:3403:52:3403:52Thursday,December29,202213、不不知知香香积积寺寺，，数数里里入入云云峰峰。。。。12月月-2212月月-2203:52:3503:52:35December29,202214、意志坚坚强的人人能把世世界放在在手中像像泥块一一样任意意揉捏。。29十十二月20223:52:35上午午03:52:3512月-2215、楚塞三湘湘接，荆门门九派通。。。。十二月223:52上上午12月-2203:52December29,202216、少年十五五二十时，，步行夺得得胡马骑。。。2022/12/293:52:3503:52:3529December202217、空空山山新新雨雨后后，，天天气气晚晚来来秋秋。。。。3:52:35上上午午3:52上上午午03:52:3512月月-229、杨柳散和和风，青山山澹吾虑。。。12月-2212月-22Thursday,De