正交实验法优选白疕消软膏中的药材提取工艺

正交实验法优选白尼消软膏中的药材提取工H-4-【摘要】目的优选白泥消软膏中的药材提取工艺。方式以银屑病小鼠模型实验结果为指标，采纳L9（34）正交实验法，对其关键步骤如加水量、煎煮时刻、煎煮次数、醇沉时加醇量等条件进行优选。结果煎煮次数对小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层生成有显著性阻碍（POo结论最正确工艺为加药材量8倍的水煎煮3次，h/次，浓缩液加等量乙醇使沉淀。【关键词】白尼消软膏正交实验银屑病小鼠模型提取工艺白花消软膏为中药外用制剂，具有清热解毒、活血化淤、疏风通络功效，用于白尼血热、血淤证（寻常性银屑病）。其中的大黄等药材是通过银屑病抗体搭桥角肮/单一核白细胞粘连实验挑选出的抗银屑病中草药，因在进行抗银屑病中草药实验挑选时各实验药液的制备均采纳的是水提醇沉法，故本制剂中对大黄等药材提取也采纳同一方式。本文小鼠银屑病模型实验结果为指标，对阻碍水提醇沉的要紧因素如加水量、煎煮时刻、煎煮次数、醇沉时加醇量，进行正交实验优选，为合理挑选大黄等药材的提取工艺提供科学依据。1仪器与试药显微镜（日本奥林巴斯BX51,带JVC摄像头及图像搜集处置系统）。哈西奈德溶液（唐山集川药业利康制药生产，批号050501）,%氯化钠注射液（生理盐水，武汉滨湖双鹤药业有限责任公司生产，250ml/瓶，批号0）。2方式与结果正交实验设计以阻碍提取的几个要紧因素如煎煮时刻、煎煮次数、加水量、醇沉时加醇量为考察因素，每一个因素设立3个水平，因素水平安排见表1表1因素水平样品的制备按5倍处方量称取大黄等药材•，共9份，别离按表2的实验条件煎煮，过滤，减压浓缩至适量，加乙醇使沉淀，过滤，滤液减压回收乙醇，调整全量至每毫升相当于生药2g,即得。表2正交实验结果与分析银屑病小鼠模型实验[1-5]动物昆明种小鼠66只，3,体质量（土）g,一般级，由湖北省实验动物中心提供。方式取昆明种小鼠，常规饲料喂养，随机分成11组，每组6只，实验组用正交设计下的9份样品，阴性对照组用生理盐水，阳性对照组用哈西奈德溶液，在每只小鼠尾部均匀涂抹（约ml）,2次/d,持续15d,第二天处死小鼠，取距离根部约〜cm处尾部皮肤，10%甲醛溶液固定，石蜡包埋，HE染色，在光学显微镜下观看每一个小鼠的尾部鳞片（见图1）。凡两个毛囊口之间的鳞片表皮有排列成行的颗粒层者，称为有颗粒层的鳞片，计数每100个鳞片中有颗粒层的鳞片数，对各组数据进行比较，并作统计学处置。结果见表3o方差分析将正交实验结果用方差分析。结果见表4。3讨论最正确提取条件的确信正交实验结果经直观分析（见表2）能够看出，对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的增进作用最强提取条件为:A2B3ClD2o正交实验结果方差分析（见表3）能够看出，关于小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的增进作用，因素B均有显著性阻碍（PO,因素A无显著性阻碍。正交实验结果极差分析说明，4个因素对小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成的增进作用的阻碍顺序均为B>D>C>Ao依照上述正交实验结果的分析，结合生产体会，综合考虑，将最正确提取条件确信为A2B3C1D2,即加药材的8倍量水煎煮3次，h/次，煎煮液浓缩至适量后加等量乙醇使沉淀。表3对小鼠鼠尾鳞片表皮颗粒层生成的阻碍1与阴性对照组比较，P2与阳性对照组比较；n=6表4方差分析动物实验评判在表皮层中，角质层增厚，其间有排列成层的角化不全细胞，层与层之间充满空气，使鳞屑显为白色。在静止期病变,表皮角化过度或角化不全明显。在角化不全的部位下方，颗粒层的细胞很少或完全消失。银屑病的大体病理特点是表皮细胞增殖过快和角化不全，一种药物如能抑制表皮细胞的增生，或改善角化不全（增进颗粒层形成）者，就具有医治银屑病的药理作用[1,2]o正常情形下小鼠尾部鳞片的表皮胶质层角肮细胞保留有细胞核，而颗粒层颗粒细胞缺失，仅在毛囊处有少量的颗粒细胞，表皮较薄，其天然的角化形式与人类银屑病表皮相似，故可模拟该病角化不全的特点，Jarrett和Spearman等利用它作为实验模型，评判药物增进颗粒层形成的作用[4],很多学者在实验中证明医治银屑病临床有效的中药普遍具有增进小鼠尾鳞片表皮颗粒层形成作用[5]o本实验中利用这种动物模型对正交实验的各组药液对小鼠尾部鳞片表皮的颗粒层形成作用进行评判，实验结果显示，增进颗粒层的形成作用，与阴性对照组比较作用较强（除实验组1,4外，均有显著性不同，P<,但与阳性对照组比较那么作用较弱（除实验组6,均有显著性不同，PV或动物说明实验组6增进小鼠尾鳞片表皮颗粒层形成作用最强，其作用与哈西奈德溶液阳性对照组无显著性不同（P>）,与生理盐水阴性对照组有显著性不同（POo【参考文献】[1]沈志滨，金哲雄，张德连，等.香鳞毛蕨医治银屑病的药理作用研究[J].中草药，2002,33(5)：448.[2]吴军，张国成，黄海，等.芳维A酸乙酯对小鼠银屑病模型的实验医治[J].重庆医学，2002,31(3)：203.[3]杨世虎，张福仁，马守江，等.慈林凝胶医治银屑病的药效学研究[J].中国麻风皮肤病杂志，2003,19(5)：434.[4]