临床试验设计实例

A药与B药治疗支气管哮喘有效性和安全性的随机、

双盲、多中心平行对照临床研究设计案例和分析简介

第一节研究方案一、背景资料A药与B药均是治疗成人和儿童哮喘的主要药物之一，并对运动性哮喘具有预防作用。文献报道三12岁362例重度哮喘病人应用A药与B药随机双盲对照试验显示：药吸入用药与含相当剂量的B药相比具有更好的疗效和更少的不良反应，在儿童哮喘的研究中也获得同样结果。可能发生的不良反应有流感综合症、疼痛、心率加快、神经紧张、颤抖、病毒感染、鼻炎、鼻窦炎、鼻塞、恶心等。实验室异常有血糖轻度增高、血钾轻度降低。二、试验目的1）比较A药和B药治疗成人哮喘的临床疗效。2）比较上述两种药物的安全性。三、试验设计采用多中心、平行、完全随机、双盲对照试验。共有三个研究中心，200例哮喘患者参加。比较A药和B药治疗成人哮喘的疗效和安全性。以18岁至60岁哮喘病人为受试对象，试验组（服用A药）和对照组（服用B药）各100例。研究分为两个阶段：1周的筛选期和4周的治疗期，有些病人在必要时有2周治疗后随访期。四、随机分组由生物统计学专业人员制定随机分组方案，按此将试验药和对照药进行分配与包装，并备相应编码应急信件，以备在遇到严重不良反应紧急情况时可以破盲。将随机数字表和药品按3个中心配置和分发。一旦病人符合入组条件，各中心研究者将按时间顺序从最小数字开始给病人编号，病人将会被随机地分到两组中。研究开始前将提供每个研究中心密封的随机分组信封以备紧急揭盲之用。五、受试对象（一）入选标准年龄18—60岁，性别不限。根据病史、症状、体征和肺功能测定确诊非急性发作期，轻度和中度哮喘，其诊断和分度根据中华医学会呼吸病学1997年《支气哮喘防治指南》规定诊断标准和非急性发作期病情评价的界定。愿意参加本临床试验，并签署知情同意书。能够正确使用峰速仪，并能按时正确记录日记卡。（二）排除标准喘息型慢性支气管炎慢性阻塞性肺病（COPD）和中度以上急性发作期哮喘患者。已知对试验药和对照药过敏者。孕妇和哺乳和未采取避孕措施的育龄妇女。冠心病、高血压和高血压心脏病、心律紊乱，以及其他各种心血管疾病患者。糖尿病患者。近2周内或目前有上呼吸道病毒感染，以及鼻炎、鼻窦炎患者。严重肝肾功能不全患者，和全身性疾病、精神异常或可能影响结果判断的疾病1月内或目前接受其他药物临床试验者。非常住人口和容易失访以及依从性差的患者。（三）治疗期入组标准经1周的筛选期后，符合下列条件的患者将进入治疗期，开始给药：本次随访中测得FEV1〈1OO%的预计值。天PEF支气管舒张试验＞15%，且绝对值增加200ml以上或在筛选观察期一周内至少有日内变异率三20%天PEF病人正确的完成了日记卡。4•患者能够正确使用蜂流速仪和记录PEF。患者目前无呼吸道感染。原B2-激动剂已停用。（四）治疗期排除标准在1周的筛选期中如果出现以下任何一种情况，患者将退出研究1．患者合并呼吸道感染。原B2-激动剂仍在使用。3．哮喘症状加重，不能参加试验。（五）病人退出在研究过程中如出现有下述情况，患者将退出研究：按入组标准或排除标准需排除的患者（包括筛选期和进入治疗期的标准）。在筛选期或治疗期改变哮喘合并用药。发生严重不良事件或药物不良反应，根据医生判断，如果继续治疗对病人有害患者依从性差。急性支气管炎发作合并哮喘加重，需要改变哮喘用药。患者要求退出。六、研究药物和治疗（一）研究药物用药方法试验组：A药口服1.15mg/次，每日3次，疗程4周。对照组：B药口服2.4mg/次，每日3次，疗程4周。（二）哮喘合并用药原吸入和口服b2-受体激动剂一律停用。2．原吸入表面激素原则上按原来方案应用。原口服茶碱类药物按原来剂型应用。疗程中若病情改善明显PEF昼夜波动率每降低10%,减少茶碱1次剂量。（三）哮喘加重的处理如果患者哮喘症状加重，患者将：增加喘乐宁气雾剂的使用次数以缓解哮喘症状（根据喘乐宁气雾使用说明不要超过最大推荐使用剂量）尽快与医生取得联系在日记卡上记录症状，PEF和喘乐宁气雾剂的使用在研究期间，如果患者哮喘加重需要干预治疗，那么患者将退出本研究。如果患者需要住院治疗完成不良事件表，对其不良事件必须进行随访，并记录详细情况。七、研究步骤病人随访程序：随访1：进入筛选期随访2：1周筛选期结束后，进入治疗期随访2A*:重复1周筛选期后，进入治疗期随访3：进入治疗期后1周随访4：进入治疗期后4周（治疗结束）随访5：治疗结束后1-2周*如果病人经过1周筛选期的评价不符合进入治疗期标准，患者将继续筛选观察一周。一周后如果符合入组标准，患者仍可以进入本研究。一）随访1（进入筛选观察期）向病人解释临床试验的详细情况,获取书面知情同意书。根据筛选期入选及排除标准评估病人是否进入筛选期。采集病史及人口统计学资料，并进行体格检查。测量身高和体重。记录合并用药。肺功能检查和支气管舒张试验。分发峰速仪和日记卡，指导病人正确使用峰速仪，记录最大呼气流量（PEF）和日记卡。约定患者下次随访的时间（1－2周后），嘱患者下次随访时带回日记卡，且随访前4小时停用喘乐宁气雾剂和口服短效支气管扩张剂。嘱患者下次随访当日空腹，准备进行血、尿化验检查。（二）随访2/2A（进入治疗期）开始试验药物治疗。收集并核对日记卡,评价病人记录日记卡的能力。肺功能的测定或支气管舒张试验。如果患者在筛选期随访时，支气管舒张试验阳性，那么本次随访仅做肺功能检查，即FEV1的测定。根据下列要求评价患者是否符合入组标准：♦在随访1或随访2/2A时，患者吸入全宁喋400yg后，FEV］增加＞15%，且绝对值增加200ml以上或在筛选期一周内PEF日内变异率有一天＞20%♦患者按照要求完成了日记卡如果患者满足上述所有条件，并且患者符合入组标准。如果不能满足上述所有标准，患者继续记录一周日记卡，重复一周筛选期，即为2A，但在CRF上仅记录2A的结果。符合入组条件的患者继续进行以下步骤：1）进行口咽部检查，如有指征做咽拭子真菌检查。2）实验室检查:留取血、尿标本做血、尿常规和血生化检查。3）根据随机分组程序分发研究药物和新的日记卡。4）约定患者治疗1周±1天复诊，嘱患者下次随访前4小时尽可能停用喘乐宁气雾剂和口服短效支气管扩张剂。5）嘱患者下次随访时带回研究药物、日记卡。（三）随访3（研究药物治疗1周±1天）核对血生化和血、尿常规检查结果。如有明显异常根据研究者的临床判断决定患者是否退出研究。收集并核对日记卡。记录不良事件。询问患者是否改变目前用药，如有改变，记录在合并用药表中，如果患者改变了哮喘用药，患者将退出本研究。进行口咽部检查，如有指征做咽拭子真菌检查。测定FEV1与患者确认其用药依从性约定下次随访时间（治疗4周±3天后），嘱患者下次随访时带回日记卡、研究用药。嘱患者下次随访前4小时尽可能停用喘乐宁气雾剂和口服短效支气管扩张剂。四）随访4（研究药物治疗4周±3天）收集并核对日记卡。记录不良事件。询问患者是否改变目前用药，如有改变，记录在合并用药表中。进行体格检查。进行口咽部检查，如有指征行咽拭子真菌检查。测定FEVI。留取血、尿标本做血、尿常规检查和血生化检查。收回研究药物，与患者确认其用药依从性。用其他适当的哮喘药物替代研究用药物。对于有不良事件发生者安排下次随访时间（7-14天后）。（五）随访5（治疗结束后1-2周）仅对有不良事件者1.不良事件和合并用药：记录使用药物的改变、伴随疾病和不良事件。如果上次随访有不良事件发生，应对其结果作出判断、分析和评价;血、尿常规和血生化检查：如果患者在上次随访时检查结果异常，此次随访应重复该项检查直至结果正常或已明确该项检查异常的原因。八、疗效及安全性评价指标（一）疗效评价指标及其测定1．主要疗效指标日记卡资料-早晨PEF值的变化2．次要疗效指标日记卡资料夜间PEF值的变化-PEF昼夜波动率临床随访资料-FEV］和FEV］占预测值的百分数病人对疗效的自我评价3．指标测定1）日记卡的记录病人进入筛选期开始记录日记卡，直至研究结束。研究者必须指导患者正确记录日记卡，每次随访时要求病人带回记录完成的日记卡。研究者将向病人解释：•如何测量和记录PEF•病人在完成随访1的当日晚上开始记录日记卡2）功能放大呼气流量（PEF）测定：每例配备峰速仪。要求病人在每日早晨6：30-7：30和夜间（21：00-22：00）固定时间各测定1次，每次测3遍，取均值，计录在病情日记中。PEF日间变异率的技术方法如下：PEF昼夜波动率日最高卩已尸―日最低REF%100%3）FEV1的测定患者每次随访时，都要测定FEV。FEV每次至少测量三遍，最佳两者误差小于5%，记11录最大值。操作者应在打印出来的检测报告上签署姓名和日期，记录病人编号。尽可能保证在研究过程中使用同一台肺功能仪，而且对于同一个病人而言，每次随访时FEV］的测定最好保证在一天的同一时间（±1小时）进行。应根据厂家要求定期校准肺功能仪，保留肺功能校准记录表。注：打印出来的FEV］检测报告必须和患者的病例保存在一起。鼓励患者在每次随访前4小时内停用喘乐宁气雾剂和口服短效支气管扩张剂。4）支气管舒张试验在随访1或随访2/2A，患者将进行支气管舒张试验检查。鼓励患者在随访前4小时停用喘乐宁气雾剂。在吸入全宁喋400pg前和吸入后15分钟分别测量FEV］，每次测量三遍，记录最大值。并计算FEV］的改善率和增加的绝对值。如果FEV］的改善率＞15%，且绝对值增加200ml以上，则该患者支气管舒张试验阳性。气道阻塞可逆性测定:FEU改善率=吸药后吸药前吸药前呷*100%二）安全性评价1．不良事件试验期间发生的所有不良事件（包括严重不良事件）。2．试验室检查治疗前和治疗结束时留取血、尿样本进行血常规、血生化和尿常规检查，分析治疗前后的变化。

1）血液学指标：血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数2）血生化指标：ALT、AST、BUN、血糖、血钾3）尿液分析：尿糖、尿蛋白、红细胞和白细胞镜检心电图：治疗前后心电图的变化3．体格检查治疗前和治疗结束时进行。4．病人退出如果停止治疗对病人有利，医生可以随时终止病人参加研究。病人可以随时退出研究，并不影响他（她）以后的治疗。必须在CRF上注明退出研究的具体原因（如不良反应，未就诊，违背方案）。未就诊的病人应该电话或通信确定原因。应尽量使退出的病人完成临床和实验室检查。因不良事件退出的患者两周后安排一次随访，并进行追踪随访。如果病人没有按照预约时间随访，研究者应尽量通过电话与病人取得联系，让病人尽可能回访。如果病人不能回访，请完成病例记录表的研究总结。5．合并用药记录试验过程中所有的合并用药,并且在CRF上评注该合并用药对该临床试验的有效性结果是否有影响，对安全性是否有影响。九、统计学处理（一）样本量估计根据以往研究资料估计，B药治疗后的晨间PEF值增加25L/min,A药的晨间PEF值增加30L/min，两种药的PEF增加量差异为5L/min，因此统计检验可分辨的差异A应小于5L/min，故取可分辨的差异A=（30-25）x0.9=4.51，标准差为12L/min。按照a=0.05的检验水准和80％的把握度，每组需要样本量为+Z02+Z02)2°2(1.96+0.84)2122二1124.52A4.52两组各需要112人。考虑率到可能有脱落，两组各入组120例，即一共240例病人入选。（二）分析人群全分析集（FullAnalysisSet,简称FAS）：指尽可能接近按意向性分析原则的理想的受试者集。包括所有进入研究并被随机化，接受过最少一次研究药物治疗并可提供一天日记1可分辨的差异A是指如果两个总体均数的差异大于A时，该统计检验的P值〈a的概率大于等于所设定的Power=1-卩。对于本例而言，如果两种药的晨间PEF值的人群平均增加量的差异大于或等于5L/min，则每组完成该研究的人数为112人，则统计检验的结果为P<0-05的概率为80%。卡资料的患者。符合方案集（PerProtocolSet简称PP集）：此组人群为从意向性评估人群中剔除严重违反方案和依从性差的病例。包括所有符合试验方案、依从性好（实际服用药量占应用药量80%以上）、试验期间未服禁止用药、完成CRF规定填写内容的病例。安全分析集（SafetySet）：用于进行安全性评价，包括所有进入研究并被随机接受过最少一次研究药物治疗，有治疗后安全性评价的患者，不论其有无疗效记录。对主要变量的统计分析，分别选用全分析集和符合方案集的数据进行分析；基线评价和其他疗效指标比较采用全分析集分析；安全分析集仅用于安全性评价。使用全分析集进行主要变量分析时，主要变量的缺失值，可以采用最接近一次观察的结转（lastobservationcarryforward,简记LOCF）估计。（三）统计分析方法1．均衡性检验对于基线资料，进行两组病人均衡性分析，比较两组的可比性。均衡性分析中，定量资料的统计描述包括均数、标准差、标准误、中位数、正态分布性W检验及p值；假设检验采用试验药组和安慰剂组数据比较的t检验或Wilcoxon检验（当数据不服从正态分布时）。定性资料的统计描述包括构成比；假设检验采用X2检验或精确概率检验，比较两组构成。2．疗效分析：分试验组和对照组按随访阶段分别进行统计描述，连续性资料采用均数、标准差、中位数及可信区间等统计量。分类资料（如病人的自我疗效评价）以率或构成比进行描述。采用方差分析方法评估有效性指标，由于本研究是一个多中心临床试验，在作此分析时，将考虑中心效应对主要疗效指标的影响。以发药前3天的日记卡记录资料作为数据分析基线值，进行各随访阶段的组内和组间假设检验：组内比较：采用配对t检验或符号等级和Sign-ranktest（非正态分布用）分别比较试验组和对照组治疗前后各疗效指标有无变化变。组间比较：根据正态性检验的结果，采用不同的假设检验方法检验各随访阶段试验组和对照组的差异，以及两组改变量间的差异。对主要疗效指标采用广义线性模型（GLM过程），以中心、基线值为协变量，比较两组的差别。对按症状自我评价的临床疗效（无效好转显效痊愈）采用CMHX2卡方检验。3．安全性分析对每个阶段的心电图、血尿常规、血生化等进行分析，计算异常率（异常且经医生判断有临床意义）并用X2检验进行试验组和对照组的比较。对不良事件按试验组和对照组分组列表，并分析试验组和对照组不良事件与药物的关系的构成有无差异，采用X2检验或精确概率检验。对不良反应按试验组和对照组分组列表。十数据管理和揭盲（一）数据管理数据的正确性对保证临床试验的质量极为重要,数据管理按照SFDA的GCP要求进行。♦研究者应根据受试者的原始观察记录，保证将数据正确、完整、清晰、及时地载入病例报告表。研究过程中,监查员负责监查试验的进行是否遵循试验方案,确认所有病例报告表填写正确完整,与原始资料一致,如有错误和遗漏,及时要求研究者改正。修改时需保持原有记录清晰可见,改正处需经研究者签名并注明日期。数据管理员负责数据的录入和整理；事先建立数据库,并保证其完整、正确和安全。每一份病例报告表应由两个录入员独立地输入数据库中,并进行比较,直至完全一致。数据管理员将根据研究方案和病例报告表,建立相应的逻辑检查文件,对录入数据进行检查。数据管理员发现任何问题,应及时以疑问表的形式通知监查员,并要求研究者做出回答,疑问表将保存备查。资料完全录入并经过审核认为所建立的数据库正确后,将由主要研究者、申办者、生物统计学专业人员和保存盲底的有关人员对数据库进行锁定。锁定后的数据文件不允许再做变动。（二）揭盲在临床研究完成,数据管理结束并且数据库锁定以后进行揭盲。揭盲后的数据库交生物统计学专业人员进行统计分析,并将数据保存在磁盘中备查。揭盲程序将以文件形式记录并存档。（三）紧急揭盲每个病人都有相应的应急信封供紧急揭盲用。当发生紧急医疗情况时,在中心负责的研究者同意的情况下可以进行紧急揭盲,同时要通知主要研究者和申办方。只有当必须了解受试药物,否则会影响病人治疗时才允许紧急揭盲。紧急揭盲需记录原因并由研究者签名存档。十一、不良事件（一）不良事件不良事件是药物应用以后发生在病人身上的任何异常医学表现。它可以是一种疾病或以前疾病的加重、复发,单个或一系列有关的症状和体征。不一定与研究药物有因果关系。在给药前就存在,并在研究过程中一直持续的异常医学表现不记为不良事件。但如果该异常表现在用药后其发生频率增加、程度加重或性质改变，应作为不良事件记录。对异常的实验室检查指标，如经医生判定有临床意义，也应记录为不良事件。研究人员将对所有的不良事件进行评估，并记录在相应的CRF页上，包括开始和消除的时间、严重程度、采取的治疗措施、疾病转归并判断该症状与药物的相关性。与研究药物的关系按有关、很可能有关、可能有关、可能无关、无关5级评定。由主管医师和负责医师共同评判，并写明理由。与药物有关、很可能有关和可能有关的不良事件即定义为不良反应。研究者负责作出与临床试验相关的医疗决定，保证受试者在试验期间出现不良事件时得到适当的治疗。（二）严重不良事件致命、致残、需经抢救、导致患者住院治疗、延长住院时间、发生恶性肿瘤、造成先天性畸形的不良事件为严重不良事件。临床研究期间若发生严重不良事件，临床研究单位应立即采取必要保护措施保护受试者安全，并通知主要研究者和申办方。首次报告可通过电话或传真，但仍需提供更为详尽的书面报告。第二节主要疗效指标的统计分析主要有效性指标“晨间PEF”的统计描述均数标准差中位数P25P75最小值最大值基线试验组202.4699.57176.67133.33240.0063.33533.33基线对照组181.8376.25176.67120.00230.0052.67446.67治疗后试验组240.0479.53219.93184.53269.31127.79505.04治疗后对照组207.0360.98203.32157.05245.96102.16418.25治疗后改变量试验组37.5720.0643.2629.3351.20-28.9567.04治疗后改变量对照组25.2015.3126.2514.4036.90-28.4249.63注：主要疗效指标“晨间PEF”值的改变量=治疗后“晨间PEF”值一基线“晨间PEF”值对上述研究中的主要疗效指标“晨间PEF”值的改变进行分析。以治疗前后PEF改变量来说明两组疗效的差别，考虑到打可能与治疗前PEF（称为基线PEF,记为mpefO）大小有关，需要对此校正后再比较两组的差别，采用协方差分析，校正基线对有效性评价的影响。p=p+Pxgroup+Pxmpef0dd012根据上述“晨间PEF”值的改变量的总体均数可知：试验药（group=l）的“晨间PEF”值的改变量的总体均数为p=p+P+PxmPef0dd012对照药(group=2)的“晨间PEF”值的改变量的总体均数为卩二卩+2卩+卩xmpef0dd012在同样的基线“晨间PEF水平mpef0情况下，对照药的“晨间PEF”改变量总体均数一试验药的“晨间PEF”改变量总体均数=0。如1果0>0，说明对照药的“晨间PEF”改变量总体均数大于试验药的“晨间PEF”改变量总1体均数，因此根据“晨间PEF”意义可知：对照药的疗效好；反之，如果0<0，说明试验1药的“晨间PEF”改变量总体均数大于对照药的“晨间PEF”改变量总体均数，因此说明试验药的疗效好。Stata中数据及其结果如下：groupmpefv0mpefv9d11260285.4925.4921533.33505.04-28.2931156.67203.8547.1841141.67191.0449.3751236.67265.428.7361206.67242.9736.37186.67147.260.5381243.33273.0529.7291263.33288.4325.110131032717111283.33306.1522.82121163.33209.5646.23131166.67211.1444.47141163.33210.6947.36151533.33504.38-28.95161393.33393.90.57171220253.0533.05181145193.0148.01191281.67302.9721.3201240269.3129.31211103.33160.5257.19221110166.1556.15231196.67236.4239.75241180221.8541.85251186.67228.4441.77261176.67219.9343.26271116.67170.5853.91

281103.33160.9657.6329183.33143.0259.69301140188.8948.89311230262.9132.91321200238.9938.99331236.6726629.33341126.67179.5652.8935193.33153.2759.94361200237.437.437166.67133.7167.04381226.67260.0533.38391410406.1-3.9401186.67227.1540.48411120174.5854.58421280301.4921.49431353.33359.155.82441143.33192.8249.49451280301.5521.55461203.33240.7137.38471240271.131.1481236.67266.3529.68491156.67203.5746.9501323.33335.6112.28511386.67388.331.66521216.67252.6736531175218.6743.67541111.67168.1656.49551516.67492.33-24.34561226.67258.6832.01571201.67239.5737.9581143.33193.1549.82591175219.1444.14601117.33172.1954.86611310324.5714.57621306.67324.0917.42631230263.1233.12641223.33257.1633.83651476.67455.94-20.73661200237.3337.33671106.67164.0157.34681120173.553.5691168.33212.4444.11701166.67210.7344.06711143.33191.3748.04721263.33288.4325.1731183.33225.9242.59741123.33177.9654.63751123.33176.5653.23761123.33178.254.87771146.67195.4848.8178183.33144.761.37791143.33192.3349801146.67195.1148.44811143.33192.8549.52821193.33233.1539.82831133.33184.5351.284163.33127.7964.46851126.67179.5652.89861120173.2953.29871156.67204.2447.57881116.67170.5553.88891153.33200.8347.5901106.67164.1157.44911103.33162.4259.09921303.33321.8318.5931296.67314.517.83941323.33335.7512.42951136.67186.8350.16961163.33208.2444.91971201.67238.8637.1998286.67131.7645.09992185210.6225.621002186.67210.1723.51012156.67187.1430.471022203.33224.8921.561032413.33390.99-22.341042106.67146.7840.111052183.33208.4925.161062206.67226.8420.171072173.33199.3626.031082340333.36-6.641092291.67294.843.17

1102100140.8340.831112260269.029.021122133.33167.6434.311132256.67266.8110.141142193.33215.4822.151152250261.7511.751162103.33144.1840.851172333.33328.34-4.991182120157.0537.051192230245.6415.641202230245.9615.961212200222.7322.731222190213.5823.581232116.67152.6736124280124.6444.641252120156.8236.821262143.33176.2332.9127283.33129.5946.26128266.67114.8448.171292110151.2741.271302236.67248.511.831312100140.1240.121322113.33153.2939.961332250263.3913.391342123.33162.2638.93135266.67113.246.531362163.33191.4728.141372323.33320.28-3.051382283.33287.814.481392203.33223.2219.891402183.33208.3825.051412163.33191.2427.911422156.67187.5830.911432183.33209.5826.251442236.67251.0714.41452233.33247.514.171462243.33255.9912.661472246.67258.9312.261482230244.1514.151492210228.6518.651502115152.7737.77

1512336.67331.93-4.74152296.67138.8442.171532253.33266.4813.151542280286.666.661552150181.0131.011562253.33263.7210.391572256.67267.3310.661582166.67193.1326.461592446.67418.25-28.421602186.67213.226.531612176.67203.3226.65162252.67102.1649.491632173.33200.3527.021642186.67211.5424.871652176.67203.2826.611662140172.9532.951672263.33272.278.941682190214.2124.211692203.33224.2220.891702213.33231.8918.56171260109.6349.631722123.33159.4936.161732110150.5840.581742123.33160.2336.91752193.33217.0923.761762146.67180.1633.491772236.67250.8414.171782206.67228.5721.9179283.33129.6546.32180276.67124.9148.241812133.33168.8135.481822126.67163.4636.79183276.67123.7347.061842223.33238.815.471852216.67235.9719.31862220237.5317.531872110149.8639.861882100142.8742.871892173.33200.1826.851902146.67178.1131.441912136.67170.9634.291922283.33288.284.951932165192.9127.911942166.67191.9525.281952131.67165.433.731962110149.6839.68group是分组变量，1为A药，2为B药。mpefvO是基线峰流量也就是协变量，mpefv9是治疗后的峰流量，d是治疗后与基线的差值。用Stata软件对上述资料进行协方差分析，主要命令和结果如下：regdgroupmpefv0reg因变量分组变量协变量d|1+-Coef.Std.Err.tP>|t|[95%Conf.Interval]group|-16.51718.1398451-118.110.000-16.793-16.24135mpefv0|-.2009387.0007882-254.940.000-.2024933-.1993842_cons|94.77352.2818624336.240.00094.217695.32945协方差分析要求资料残差正态，两组残差的方差齐，治疗分组(group)与协变量(mpefvO)无交互作用，因此对上述分析结果进一步考察：predicte,residual计算残差swilke进行正态性检验残差的正态性检验结果p=0.29784,按照=0.05的检验水准可以认为残差近似服从正态分布。Shapiro-WilkWtestfornormaldataVariable|ObsWVzProb>z+e|1960.991411.2600.5310.29784sdteste,by(group)对两组的残差进行方差齐性检验VarianceratiotestGroup|1+---ObsMeanStd.Err.Std.Dev.[95%Conf.Interval]1|974.99e-09.0936965.9228037-.1859861.18598612|1+---992.89e-10.10186681.013562-.2021513.2021513combined|1962.61e-09.0690874.9672232-.1362544.1362544

Ho:sd(1)=sd(2)TOC\o"1-5"\h\zF(96,98)observed=F_obs=0.829F(96,98)lowertail=F_L=F_obs=0.829F(96,98)uppertail=F_U=1/F_obs=1.206Ha:sd(1)<sd(2)PHa:sd(1)<sd(2)P<Fobs=0.1788Ha:sd(1)!=sd(2)P<FL+P>FU=0.3571Ha:sd(1)>sd(2)P>Fobs=0.8212残差方差齐性检验结果p=0.3571，按照a=0.10的检验水准可以认为残差的方差齐。gengmpef=group*mpefv0生成分组变量和协变量的交互作用项regdgroupmpefv0gmpef加入交互作用项再进行回归分析gengmpef=group*mpefv0生成分组变量和协变量的交互作用项regdgroupmpefv0gmpef加入交互作用项再进行回归分析d|1+-Coef.Std.Err.tP>|t|[95%Conf.Interval]group|-16.68925.3394998-49.160.000-17.35888-16.01962mpefv0|-.2021865.0023773-85.050.000-.2068755-.1974974gmpef|.0009078.00163140.560.579-.00231.0041256_cons|95.01443.516887183.820.00093.9949296.03393加入治疗分组（group）与协变量（mpefvO）的交互作用项分析，结果交互作用的p=0.579,远远大于a=0.05的检验水准，表明二者之间不存在交互作用。以上分析表明，该资料符合协方差分析的要求，因此协方差分析的结果是有效的。结论是校正基线影响后，不同分组的总体疗效有差别，且group的回归系数01<0并且P<0.001，说明：在同样基线的情况下，A药的疗效优于B药附录随机分组方案根据样本量估计，每组需要120对。本研究采用随机区组的方式随机分组（RandomisedBlock）,BlockSize为4,每个Block中2名受试者为试验组和2名受试者为对照组。对于每个适应症的受试者按就诊的先后编号，连续4个受试者为一个Block，共有60个Block，每个编号对应产生一个随机数，在每个Block中，最小的2个随机数对应编号的受试者为试验组，最大的2个随机数对应编号的受试者为对照组。随机数由Stata7.0软件产生，种子数为3176，结果如下：随机分组（分药编盲版）药物编号Block随机数用药110.365064A药210.636736A药

药物编号Block随机数用药620.334253A药720.540661A药1030.309937A药1130.200412A药1440.133041A药1540.371488A药1850.368592A药2050.323056A药2260.36477A药2360.739154A药2770.294115A药2870.416021A药2980.420215A药3080.189262A药3490.128179A药3690.371477A药38100.158064A药40100.131228A药41110.547104A药44110.325209A药45120.533688A药46120.104271A药50130.539171A药51130.011595A药54140.6491A药55140.307486A药57150.370967A药59150.337711A药63160.22872A药64160.069209A药65170.097671A药66170.243851A药69180.073738A药72180.335231A药74190.05849A药76190.123655A药78200.321107A药79200.563435A药82210.404149A药83210.184641A药药物编号Block随机数用药85220.29625A药88220.428985A药91230.344823A药92230.476935A药95240.033653A药96240.641774A药97250.576885A药98250.347163A药101260.013109A药104260.218672A药106270.482318A药107270.007564A药109280.044567A药112280.349653A药113290.14565A药116290.457331A药118300.02528A药119300.144596A药122310.022772A药124310.43941A药125320.606854A药128320.386352A药131330.536955A药132330.115021A药134340.087139A药136340.152259A药139350.34534A药140350.423287A药141360.58744A药143360.490712A药146370.330456A药148370.726387A药149380.616856A药150380.19934A药153390.308319A药155390.084485A药158400.062989A药160400.111335A药163410.441626A药164410.412599A药

药物编号Block随机数用药167420.434392A药168420.551687A药169430.220682A药172430.051313A药173440.064747A药176440.193183A药177450.279572A药180450.058196A药181460.316501A药182460.600875A药185470.146827A药188470.054352A药190480.277705A药192480.328539A药195490.33929A药196490.170893A药197500.773683A药198500.477147A药201510.215429A药203510.479518A药207520.333455A药208520.048027A药210530.674649A药211530.560835A药213540.221014A药216540.116899A药218550.233601A药220550.478624A药222560.377899A药223560.224878A药225570.265521A药228570.8442A药229580.244424A药231580.583133A药233590.575301A药236590.043879A药239600.245033A药240600.206999A药310.843243B药410.771987B药

药物编号Block随机数用药520.922709B药820.643657B药930.579863B药1230.544146B药1340.733686B药1640.698287B药1750.773458B药1950.750712B药2160.842415B药2460.85914B药2570.623501B药2670.813532B药3180.691556B药3280.785287B药3390.918376B药3590.525362B药37100.850248B药39100.349112B药42110.889305B药43110.893145B药47120.753505B药48120.804178B药49130.802591B药52130.598643B药53140.80456B药56140.886093B药58150.649753B药60150.622014B药61160.487682B药62160.523537B药67170.971631B药68170.731075B药70180.762767B药71180.793892B药73190.690763B药75190.715534B药77200.577799B药80200.698196B药81210.633548B药84210.910839B药

药物编号Block随机数用药86220.52686B药87220.806574B药89230.536872B药90230.853005B药93240.779976B药94240.899675B药99250.82785B药100250.756887B药102260.475108B药103260.872345B药105270.779198B药108270.849254B药110280.42703B药111280.365618B药114290.876072B药115290.457432B药117300.945917B药120300.218919B药121310.536904B药123310.475518B药126320.961904B药127320.838242B药129330.540068B药130330.988763B药133340.612573B药135340.877497B药137350.657147B药138350.63169B药142360.806697B药144360.945B药145370.955382B药147370.979689B药151380.733722B药152380.644554B药154390.357174B药156390.649394B药157400.611101B药159400.741367B药161410.867349B药162410.665927B药

药物编号Block随机数用药165420.772215B药166420.643999B药170430.957509B药171430.966306B药174440.829388B药175440.718641B药178450.601323B药179450.764186B药183460.728125B药184460.830425B药186470.179033B药187470.595188B药189480.869071B药191480.468946B药193490.920094B药194490.433421B药199500.881272B药200500.845424B药202510.846429B药204510.49129B药205520.996845B药206520.515008B药209530.968113B药212530.793921B药214540.345678B药215540.245969B药217550.857045B药219550.962268B药221560.411937B药224560.852117B药226570.952996B药227570.917948B药230580.899433B药232580.740378B药234590.913436B药235590.882997B药237600.839123B药238600.505099B药随机分组（揭盲版）药物编号Block随机数分组110.365064A药210.636736A药310.843243B药410.771987B药520.922709B药620.334253A药720.540661A药820.643657B药930.579863B药1030.309937A药1130.200412A药1230.544146B药1340.733686B药1440.133041A药1540.371488A药1640.698287B药1750.773458B药1850.368592A药1950.750712B药2050.323056A药2160.842415B药2260.36477A药2360.739154A药2460.85914B药2570.623501B药2670.813532B药2770.294115A药2870.416021A药2980.420215A药3080.189262A药3180.691556B药3280.785287B药3390.918376B药3490.128179A药

药物编号Block随机数分组3590.525362B药3690.371477A药37100.850248B药38100.158064A药39100.349112B药40100.131228A药41110.547104A药42110.889305B药43110.893145B药44110.325209A药45120.533688A药46120.104271A药47120.753505B药48120.804178B药49130.802591B药50130.539171A药51130.011595A药52130.598643B药53140.80456B药54140.6491A药55140.307486A药56140.886093B药57150.370967A药58150.649753B药59150.337711A药60150.622014B药61160.487682B药62160.523537B药63160.22872A药64160.069209A药65170.097671A药66170.243851A药67170.971631B药68170.731075B药69180.073738A药

药物编号Block随机数分组70180.762767B药71180.793892B药72180.335231A药73190.690763B药74190.05849A药75190.715534B药76190.123655A药77200.577799B药78200.321107A药79200.563435A药80200.698196B药81210.633548B药82210.404149A药83210.184641A药84210.910839B药85220.29625A药86220.52686B药87220.806574B药88220.428985A药89230.536872B药90230.853005B药91230.344823A药92230.476935A药93240.779976B药94240.899675B药95240.033653A药96240.641774A药97250.576885A药98250.347163A药99250.82785B药100250.756887B药101260.013109A药102260.475108B药103260.872345B药104260.218672A药

药物编