版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
关于高中生物___检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质第1页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验原理:某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。化学试剂+有机化合物→特定的颜色①还原糖+斐林试剂砖红色沉淀②脂肪+苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液→橘黄色(或红色)③蛋白质+双缩脲试剂→紫色④淀粉+碘→蓝色水浴加热第2页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂用的是甲液和乙液,须现配现用,混合均匀,水浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液,先加A液,后滴B液,不用水浴加热。第3页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六第4页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六双缩脲反应:含有两个或两个以上肽键的化合物与碱性硫酸铜作用,生成蓝紫色的复合物第5页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成,但二者有如下三点不同:①溶液浓度不同。斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.05g/mL;双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g/mL,CuSO4的浓度为0.01g/mL。②使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液;双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。③使用方法不同。使用斐林试剂时,先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,然后立即使用。使用双缩脲试剂时,先加入NaOH溶液,然后再加入CuSO4溶液。第6页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六第7页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六一、可溶性还原糖的检测:(1)原理:还原糖+斐林试剂砖红色沉淀。(2)选材:苹果、梨、白萝卜。含糖量较高,颜色为白色或近于白色的植物组织。(3)检测过程:水浴加热振荡混匀50~65℃水浴加热2min2mL组织样液刚配制的斐林试剂2mL呈现浅蓝色变成砖红色(Cu2O)还原糖:含有半缩醛羟基的糖类,主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。第8页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六当质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液与质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2悬浊液。Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热,能够生成砖红色的Cu2O沉淀。因此,利用该反应,可证明样液中含可溶性还原糖。R—CHO+2Cu(OH)2→R—COOH+Cu2O↓+2H2O甲液乙液等量混合,现用现配,切不可分开滴加,或者久置后才用。第9页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六制备组织样液梨或苹果研磨取5g,放入研钵中洗净、去皮、切块过滤滤液(用单层纱布)显色反应向试管中加入2ml组织样液向试管中加入2ml新配制的斐林试剂或本尼迪特试剂振荡混匀50~65℃水浴加热2min观察现象观察溶液颜色变化:浅蓝色→棕色→砖红色结论:生成砖红色沉淀,说明梨或苹果中含有还原糖。砖红色的糖(还原糖)非(斐林试剂)常好吃第10页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六2ml组织样液1ml新配制的斐林试剂5065℃水浴加热约2min观察颜色变化砖红色浅蓝色棕色【斐林试剂】:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液,使用前等体积混合均匀(生成浅蓝色的Cu(OH)2悬浊液),现配现用(时间一长,Cu(OH)2沉淀在溶液底部无法发生反应。且需要水浴加热。第11页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六还原糖的检测结果斐林试剂与可溶性还原糖在水浴热的条件下,生成砖红色的Cu2O沉淀。-CHO+Cu(OH)2悬浊液-COOH+Cu2O↓(砖红色)第12页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六二、脂肪的检测(1)选材:经浸泡去种皮的花生种子。(2)检测过程:制片选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央制成临时装片:滴12滴蒸馏水,盖上盖玻片染色:在薄片上滴加23滴苏丹Ⅲ染液,染色23min洗去浮色:用吸水纸吸去染液,滴加体积分数为50%的酒精12滴镜检观察:在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察。苏三(苏丹Ⅲ)送了我一个橘黄色的胭脂(脂肪)切片:花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片。视野中有橘黄色颗粒第13页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒脂肪+苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液橘黄色(或红色)第14页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六第15页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六注意事项:(1)若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡3~4小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽可能的薄。(2)染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色(酒精能溶解苏丹Ⅲ),染色和洗浮色时间不宜过长。第16页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六三、蛋白质的检测:(1)原理:蛋白质+双缩脲试剂紫色络合物(2)选材:黄豆、鸡蛋清(稀释)、牛奶、豆浆(3)检测过程:2ml组织样液2ml双缩脲试剂A液,摇匀3-4滴双缩脲试剂B液,摇匀观察颜色变化紫色双(双缩脲)子(紫色)弹(蛋白质)第17页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六
将尿素加热,两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。反应式为:双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性环境(NaOH)中能和Cu2+作用生成紫色的络化物,这个反应叫做双缩脲反应。蛋白质分子中含有的肽键结构与双缩脲结构相似,因此,蛋白质也可与双缩脲试剂发生颜色反应。双缩脲≠双缩脲试剂第18页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六无色紫色(创造碱性条件)(提供Cu2+)双缩脲试剂B3-4滴双缩脲试剂A2mL2mL组织样液在碱性条件(NaOH)下,蛋白质中的肽键(—NH—CO—)与Cu2+作用生生紫色络合物。因此,操作时,应先加A再加B,且A多B少,如果B过量,Cu2+的蓝色就会遮盖生成的紫色。第19页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六制备组织样液黄豆组织样液(或鸡蛋清稀释液)黄豆浸泡研磨过滤滤液去皮、切片蛋清液鸡蛋鸡蛋清稀释液稀释显色反应向试管中注入2ml组织样液向试管中注入2ml双缩脲试剂A加入3-4滴双缩脲试剂B观察现象观察颜色变化:无→紫色结论:加入双缩脲试剂A后,颜色呈现为无色,加入B后,变为紫色,说明鸡蛋清中有蛋白质存在。第20页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六蛋白质的检测结果第21页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六注意事项:(1)如果用鸡蛋清作为材料,则必须进行充分稀释,否则反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净。(2)【双缩脲试剂】:A液:0.1g/mLNaOH,B液:0.01g/mLCuSO4。先加A液后加B液,且B不能过量,不需要加热。(3)过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应,使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。(4)先加入A液2ml,摇匀;再加入B液3-4滴,摇匀。第22页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六四、淀粉的检测:(2)选材:马铃薯匀浆(1)原理:淀粉+碘蓝色(3)检测过程:2ml组织样液2滴碘液观察颜色变化蓝色蓝(蓝色)点(淀粉)点(碘)第23页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六制备组织样液马铃薯块茎研磨取5g,放入研钵中洗净、去皮、切块过滤滤液显色反应向试管中注入2ml组织样液加入5滴碘-碘化钾观察现象观察溶液颜色变化:无色→蓝色结论:溶液变蓝,说明马铃薯组织中有淀粉存在。第24页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六苹果、梨、白萝卜斐林试剂砖红色沉淀花生种子苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液橘黄色红色豆浆、牛奶、鸡蛋清双缩脲试剂紫色面粉、马铃薯匀浆液碘液蓝色注:鉴定还原糖需加热;脂肪的鉴定不一定要用显微镜,要观察脂肪颗粒,则必须用显微镜。第25页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六五、观察DNA、RNA在细胞中的分布实验原理:(1)DNA主要分布在细胞核内,RNA大部分存在于细胞质中。(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。(3)利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。(4) 盐酸能够改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色体中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA和染色剂结合。 甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色,通过观察两种颜色出现的部位来判断DNA和RNA在细胞中的分布。第26页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六方法步骤:(1)取材和制片在洁净的载玻片上滴1滴0.9%NaCl溶液用消毒牙签刮口腔内侧壁后涂抹在液滴上将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯上烘干(2)水解:将烘干的载玻片放入盛有30mL8%盐酸的小烧杯中,30℃水浴保温5min(3)冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10秒(4)染色吸水纸吸去载玻片上的水分在载玻片上滴加两滴2滴用吡罗红,甲基绿染色剂,染色5分钟吸去多余的染色剂,盖上盖玻片(5)观察:先低倍镜:选染色均匀,色泽浅的区域,移到视野中央。后高倍镜:观察细胞核和细胞质的染色情况。第27页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六0.9%生理盐水?人口腔上皮细胞8%盐酸?蒸馏水30℃水浴吡罗红甲基绿染色剂取材水解冲洗染色观察第28页,共30页,2022年,5月20日,17点33分,星期六思考与讨论:(1)9%Nacl溶液的作
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 隧道开挖承包合同样本
- 二零二四年主题公园游乐项目设计与施工合同3篇
- 2024二手房购房合同的成交价格和折扣条款2篇
- 歌手艺人经纪管理合同范本
- 技术合作开发合同范本
- 汤包店租房合同范例
- 2024版建筑施工质量检测与评估合同2篇
- 2024年度高端餐饮服务特许经营合同2篇
- 应收账款质押合同范本
- 美容院店铺设计与装修合同(2024版)
- 药物常识智慧树知到答案2024年江西师范大学
- 施工企业总承包合同范本2024年
- 液化气站双重预防体系手册
- DBJ15 31-2016建筑地基基础设计规范(广东省标准)
- 刮痧基础知识(共61张课件)
- 育婴员初级试题
- 2024年GINA哮喘防治指南修订解读课件
- 职业性传染病:交通警察防护措施
- 痛风性关节炎的诊治进展
- 【公开课】高三地理一轮复习-自然地理环境的整体性(课件)
- 道路施工资源供应计划
评论
0/150
提交评论