临床微生物检验-弯曲菌与螺杆菌

弯曲菌与螺杆 弯曲菌属与螺杆菌弯曲菌目弯曲菌 螺杆菌 弯曲菌 螺杆菌 （Campylobacter 分弯曲菌原归属于弧菌属，197年正式命名为弯曲菌属，属弯曲菌科。2005年在伯杰系统细菌学手（Bergry’sManualofSystematicBacteri 分布广泛分布于温血动物肠道 临床意空肠弯曲菌（C.jejuni)主要引起肠道急性外周神经脱髓鞘神经根神 弯曲菌（Cfetus)等其他弯曲菌主要 性腹泻常见微生物病：诺 、轮 弯曲 途径：粪-口途径弯曲 性质：多为自限性疾 致病物质致病部位及表现 咽-颈-臂无吞呼感觉异面等2 2面 生物学特形态染 一端或两端有单鞭毛，运动非常活（“投镖样”运动） 大肠弯曲菌革兰 弧 培养特性

生物学特最适生长温度因菌种而---空肠/大肠弯曲菌最适生长温度 弯曲菌最适生长温度37℃培养时间：较一般细菌稍久（一般72h左右 菌落特征：有两种（血平板均不溶血 空肠弯曲菌ATCC33291在Camp-BAP上菌

大肠弯曲菌在Camp-BAP菌 生化反应

生物学特不能在3.5%NaCl环境中生氧化酶和触酶阳性，硝酸盐还原尿素（-）、硫化氢（-） 抵抗力

生物学特对外环境抵抗力不不耐干燥,对热和巴 敏感 微生物检验程 血液 粪便、肛拭 直接检增（布氏肉汤动力检 直接镜7天不生 生 分离培养（弯曲菌血平板、Skirrow’s平板等（多块选择平板弃 微需氧环可疑菌涂片染色镜 纯培养（布氏或弯曲菌血琼脂鉴关键：侧重于空肠和大菌培养，培养基的选择和最佳孵条件的给微生物检标采取新鲜粪便与肛拭子、血液、分泌物等立即如 送检应种入Cary-Blair运送培养基，4℃冰箱可保存3周 标本直接检直接显微镜检粪便与肛拭子可直接镜检：特殊形态和运动核酸检PCR方法直接检测粪便标本中的弯曲 分离培养与鉴分离培微氧环境培不同细菌培养温度不 鉴定要点形态培养特 生长温度(37℃、42℃)试验奈啶酸、头孢噻吩（唑啉）敏感试弯曲菌对奈啶酸耐药、对头孢噻吩 马尿酸盐水解试醋酸吲哚水解空肠弯曲菌阳性，弯曲菌 免疫学方胶乳凝酶免疫方法测定粪便中弯中抗体测定用于流行病DNA探针和PCR扩 Key革 逗点状或S形、海鸥展翅形菌,运动活微需氧：最佳生长环境为含5%O2,10% 85%N2，空气中不能生长最适生长温度因菌种而营养要求高，常用Skirrow’s和Campy-BAP培养主要通过食物和水经 CampylobacterareGram-negative,microaerophiles,whi eansthattheycansurviveinalowoxygen Whatisunusualabouttheorganism,though,isthatitalsoprefersarelativelyhighconcentrationofcarbondioxideintheenvironment.Youcanimaginethedifficultyofproducinganenvironmentsuitableforculturingthisorganism. ThemostcommonlyisolatedspeciesofCampylobacterisC.jejuni,anorganismthatcausesgastrointestinitis.Humansacquiretheorganismsbyeatingundercookedchickenordrinkingcontaminatedmilkandwater. 思考1.弯曲菌最适生长气体环境是什么2.空肠弯曲菌主要生化反应及结果是什3.空肠弯曲菌的鉴定要点主要有哪些4.弯曲菌可引起哪些 （Helicobacter 生理学和医学

UniversityoftheRyukyus(与病理学家RobinWarren合影）

BarryMarshallandRobin 幽门螺杆菌的发现历1875年德国解剖学家发现胃粘膜有螺旋样菌存1893年意大利的Dr.Bizzozero也有同上发1899年波兰的WaleryJaworski从灌胃液中发现螺旋状菌，猜测能是胃炎的病因 了波兰语的文章，未引起重视1955 的Dr.Palmeria检查了1180个胃粘膜标本未发现有上菌存在，结果写 （泼冷水）1975年Dr. 在临床病理杂志上文章第一次用电子显微观察到胃粘膜螺旋状菌存在（再热）年澳大利亚病理学家obinWn在病理标本中看到这个细菌，年与澳大利亚内科医生yMl合作。Ml年培养出细菌，年将他们发现的结果在布鲁塞尔国际微生物学会 ，年在《Lnt》上 “胃炎和消化性溃疡患者胃部发现的不明弯曲杆菌”，年自服含菌液患胃炎，结果 在澳大利亚杂志上，年 至 ，他们的发开始引起越来越多的关注， 正式命名幽门螺杆菌。 分弯曲菌目螺杆菌科螺杆菌属幽门螺杆菌(Helicobacterpylori曾命名为幽门弯曲菌(campylobacter 临床意 菌体周围微环境的pH值为7.0 与慢性浅表性胃炎或萎缩性胃炎有 与胃溃疡、十二指肠溃 胃镜下的胃溃 HP致病机尚不清楚，可能与下列因特殊的螺旋状和端鞭毛运动有利于细胞毒素相关蛋白（CagA）和空胞毒 生物学特形态结构革兰染菌体细长弯曲呈螺形、S形或海鸥形菌体一端或两端可有多根带鞘鞭毛，运动活泼 幽门螺杆菌纯培养革兰染 幽门螺杆菌纯培养革兰染 2020/2 培养特征微需氧：5%O2,10%CO2和空气中不生最适生长温度高湿度环境：湿度大于营养要求高：特殊血平板生 菌落特征生化反不活跃， 微生物检验程 胃、十二指肠活检标 ,胃微需氧高湿30、3-7微需氧高湿30、3-7酶试革病理免疫兰切片组化染特殊色染

30℃不生 37℃生 42℃不生初可疑菌革兰染色、氧化酶（+）触酶（+） 报标经胃镜活检胃部病变组受检者术前应停服铋剂或抗菌药物一 标本直接检直接显微镜检压滴观察：“投镖样”运直接涂片染色镜 组织切片染色镜免疫组间接免疫荧光法 （有创和无创检查两种3、核酸检4、粪便标本Hp抗原检 13C或14C标记尿素呼 分离培养与鉴分离培 鉴形态和染色菌落特征，37℃生在1%甘油和1%胆盐中均不生 抗体检 补体结合试胶乳凝集试ELISA，应用最为广 Key革 弯曲菌，动力微氧高湿度培养环境，营养要求较氧化酶和触酶（+）、脲酶强不分解糖 TheHelicobactergenusfeatures：Gram-negative,micraerophilicorganismsthatareverysimilartoorganismsoftheCampylobacter SufficientcolonygrowthcanbeseeninthreedayswhentheorganismisplatedontoBrucella-sheepbloodagarandplacedinamicroaerophilicenvironment. AGram-stainwillreavealweaklystainedrod