痛觉研究与阿片系统课件

痛觉及其控制(kòngzhì)以及阿片系统研究进展陈强2009年3月第一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统一、痛觉的机理(jīlǐ)和控制疼痛是一种令人不快的感觉和情绪上的感受，伴随着现有的或潜在的组织损伤。疼痛是一种知觉体验(tǐyàn),痛本质至今仍是难解之谜。迄今我们知道痛是一种自身保护机制,但过度的痛反应能使机体产生一系列生理病理反应,重者甚至导致体克、死亡。第二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统疼痛(téngtòng)的意义疼痛是一种警戒信号,表示机体已经发生组织损伤或预示即将遭受损伤，通过神经系统的调节，引起一系列防御反应，保护机体避免伤害。疼痛长期持续不止，便失去警戒意义，反而对机体构成难以忍受的精神(jīngshén)折磨，严重影响学习、工作、饮食和睡眠，降低生活质量，产生一种不可忽视的经济和社会问题。第三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统疼痛(téngtòng)的产生由一定的刺激（伤害性刺激）作用于外周感受器（伤害性感受器），换能后转变成神经冲动（伤害性信息），循相应的感觉传入通路（伤害性传入通路）进人中枢神经系统，经脊髓、脑干、间脑中继后直到大脑边缘系统和大脑皮质，通过(tōngguò)各级中枢整合后产生疼痛感觉和疼痛反应。第四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统伤害性感受器通常是指接受身体和内脏伤害刺激的第一级神经元。它们大多数是游离神经末梢少数带有附属结构，分布在皮肤、肌肉、关节和内脏器官。目前已确定的伤害性感受器主要有以下三类：（1）与C类纤维(xiānwéi)有关的机械－热伤害性感受器，对高强度的机械、物理（冷和热）和化学刺激均可发生反应，又称多模式伤害性感受器。（2）与A类纤维有关的机械－热伤害性感受器，信号传导速度比第一种快。（3）非机械伤害性感受器，大多位于关节部位，正常时对机械性刺激不敏感，有炎症时可对机械刺激发生反应。第六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统游离的神经末梢，广泛分布于机体的皮肤、肌肉、关节和内脏(nèizàng)等不同组织。第七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统伤害性感受器一般是由伤害性脊神经节（dorsalrootganglion,DRG）神经元发出(fāchū)，这种伤害性DRG神经元的动作电位具有明显的特征，即在动作电位的下降支有一“驼峰”，这是Ca2＋离子缓慢内流所致，也是判断一个神经元是否为伤害性神经元的重要依据。第八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统伤害信息(xìnxī)的传入主要是Aδ和C纤维沿背根进入脊髓背角(bèijiǎo)再将伤害信息传向脊髓以上的结构，最后到达大脑皮层。第十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统伤害性信号的上行通路(tōnglù)主要有以下几条：躯干、四肢的痛觉通路：脊髓－丘脑束

脊髓－网状

脊髓－中脑束

后索-内侧丘系

脊髓固有束

头面部的痛觉通路：

三叉神经→三叉丘系内脏痛觉通路：

交感神经→脊髓丘脑束

第十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统丘脑内有三组核群与痛觉有关(yǒuguān)；它们是生脑腹侧基底复合体、后核群和内侧核群。大脑皮层的第二体感区与痛觉有很大的关系，并可引起情绪反应。痛觉(tòngjié)的整合中枢第十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统痛觉(tòngjié)的整合中枢第十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统疼痛的中枢(zhōngshū)机制闸门控制学说闸门控制学说是由Melzac&Wall在1965年提出来的该学说设想在脊髓后角存在一种神经调节机制，使神经信号在诱发痛知觉和痛反应前就受到闸门控制，这个闸门可以(kěyǐ)增强或减弱伤害性信号的传递。第十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统传导(chuándǎo)疼痛的神经纤维有二，即直径大的粗纤维和直径小的细纤维。前者传导(chuándǎo)浅表性的锐痛，后者传导(chuándǎo)深部性钝痛和灼痛。这两种纤维传到闸门外的信号的对比可以决定闸门的开和关。当粗纤维（Aδ

）传导时，形成闸门关闭效应，而细纤维（C）传达时，形成闸门开放效应。闸门的活动可以受到来自大脑的下行性影响。现已证明高位脑的下行抑制系统至少包括内源性阿片肽、5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NA)三种递质系统。脊髓背角的第二层,被认为是闸门所在第十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统NNN+-PainfibreSensoryfibreAscendingpain‘C’Descending

inhibitionPainSensationDescending

facilitation-NTouch‘A’第十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统疼痛(téngtòng)的效应疼痛可使机体各系统发生相应的改变，如疼痛刺激心血管系统，使脉博加快，血压升高，心肌耗氧量增加，对老年或有心脏病者就注意疼痛可能引起冠状动脉供血中足而产生心绞痛，组织缺血甚至心缺梗塞。在内分泌系统，疼痛使可的松（肾上腺皮质激素）释放增加，物质代谢增强，病人出现消瘦，伤口(shāngkǒu)愈合缓慢。第二十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统疼痛与心理活动(huódòng)的关系不同的病人疼痛的反应不同。病人的心理状态如病人的个性、对疼痛的耐受力、对疼痛的理解等均可影响病人的疼痛行为。焦虑和疼痛通常难以分清，疼痛病人常可表现出与焦虑有关的行为，如出汗、发颤、畏缩(wèisuō)等；而与焦虑有关的感觉如恐惧等常可影响痛的感觉。有证据显示，生活充满焦虑的人，表达疼痛的计分比较少焦虑的人为高。第二十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统疼痛(téngtòng)的控制麻醉性镇痛药如吗啡，非类固醇抗炎症药物如阿司匹林都具有明显的缓解疼痛的作用，但是有很多类型的疼痛仍然很难控制，并且这些药物的也有较大副作用。由于神经科学的快速发展，在痛觉(tòngjié)和镇痛方面的研究也已取得了很大成绩，关于镇痛药物的研究也已显露出了曙光。第二十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统阶梯用药止痛法：WHO提出止痛治疗的框架方案是依疼痛程度使用止痛药的系统方法。第一阶梯为非麻醉止痛药，如非类固醇类抗炎药非那西丁、阿斯匹林等，适用于因高度炎症性反应所致的外周性轻、中度疼痛、慢性疼痛，如类风湿性关节炎、头痛、腰痛等。这类药物能抑制外同周前列腺素合成中的关键酶――环加氧酶的活性，使受损伤细胞列腺素的产生和释放减少，从而(cóngér)使伤害性感受器的活动减弱。副作用为使溃疡病人的溃疡加剧甚至出血。第二十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第二阶梯为弱效麻醉性药物，如可待因等，可与非类固醇类抗炎药共用，两者有协同镇痛作用。适用于中等疼痛或第一阶梯止痛药效果不理想的病人。副作用为连续使用可发生耐受性及成瘾性，宜控制使用。第三阶梯为强效麻醉性止痛药，如度冷丁、吗啡等。适用于中重度疼痛如内脏(nèizàng)痉挛性疼痛、手术后疼痛、癌症疼痛等。此类药物能与脊髓及脑内的阿片受体结合，提高痛阈，还可改善疼痛心理反应，抑制焦虑情绪，止痛效果明显。副作用有恶心、呕吐头晕、呼吸抑制等，易产生成瘾性及耐受性。第二十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统镇痛药（analgesics）是指作用于中枢神经系统，在不影响患者意识(yìshí)状态下选择性地解除或减轻疼痛的药物。镇痛(zhèntònɡ)药物第二十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统阿斯匹林：属于非固醇类抗炎药nonsteroidalanti-inflammatorymedications(NSAIDs)的一种。人们一直希望找到一种具有多种功能的药，阿司匹林就是。它抑制机体的一个中间过程，即阻碍前列腺素（用于携带局部信息的关键激素）的产生。大多数激素是由专门的腺体产生，然后通过血液运送到全身。而前列腺素不同，它是由细胞产生，在被分解之前(zhīqián)，只作用于周围区域。它传递和增强疼痛信号，并缓解炎症。前列腺素有多种，但都由一种普通的前体分子产生。第二十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统环氧合酶完成脂肪酸产生前列腺素的第一步。它把2分子氧加到花生四烯酸上，从而激活一系列的反应，最后产生大量不寻常的分子。在环氧合酶的活性部位，阿斯匹林抑制花生四烯酸的聚合。由于这些普通的信号不被传递，所以(suǒyǐ)我们感觉不到疼痛，也不会引起炎症反应。第二十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统实际上，我们为不同的用途构造了两种环氧合酶（环氧合酶—1和环氧合酶—2）。环氧合酶—1在许多不同的细胞内存在，用来产生处理全身基本信息的前列腺素。第二种酶只存在于专门的细胞内，用来发出疼痛和炎症信号。可惜的是，阿斯匹林对两种酶都攻击。一旦环氧合酶—1被攻击，阿斯匹林就能导致令人讨厌的并发症状，如胃出血。但可喜的是，我们现在可以得到一些特殊(tèshū)的药物，它们只抑制环氧合酶—2，使环氧合酶—1可以执行它的基本功能。这些新药是选择性的止痛药和退烧药，并没有副作用。第二十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统塞来昔布(Celecoxib)

新型非甾体抗炎药、新型COX-2专一性抑制剂，由Pharmacia和Pfizer公司共同开发，1999年1月上市，上市当年即成为“重磅炸弹”级药物，一直位居全球药品销售额前十名，年销售额超过30亿美金。最近，该药用于家族(jiāzú)性结肠息肉的新适应症获得又FDA通过；其用于老年痴呆症的研究也已进入Ⅱ期临床阶段。一项新的研究表明，Celecoxib能够通过促进细胞死亡、抑制细胞增殖。Peoplewhotakenonsteroidalanti-inflammatorymedications(NSAIDs)suchascelecoxibmayhaveahigherriskofhavingaheartattackorastrokethanpeoplewhodonottakethesemedications.Theseeventsmayhappenwithoutwarningandmaycausedeath.

第二十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统阿片类镇痛药通过激动中枢神经特定部位阿片受体而发挥镇痛作用，故称为阿片类镇痛药（opioid

analgesics）。阿片类镇痛药包括阿片生物碱类及其人工合成品，镇痛作用强大，抑制呼吸(hūxī)和欣快（euphoria）作用明显，长期应用易产生耐受性（tolerance）和依赖性（dependence）。第三十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统

阿片（opium）为罂粟科植物罂粟（Papaversomniferum）未成熟蒴果浆汁的干燥物，含20余种生物碱，其中仅有吗啡（morphine）、可待因和罂粟碱具有临床药用价值。吗啡属于菲类生物碱，1803年德国学者Sertűrner首次从阿片中分离出来。可待因是阿片中的另一重要(zhòngyào)菲类生物碱，也能产生阿片样作用，但镇痛作用较吗啡弱。罂粟碱属异喹啉类生物碱，具有松弛平滑肌作用。第三十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统吗啡(Morphine)是鸦片中的主要生物碱，已有200多年历史(lìshǐ)。吗啡为白色针状结晶或结晶性粉末，有苦味，遇光易变质，溶于水，略溶于乙醇。吗啡为麻醉性镇痛药，有强大的止痛作用，对各种疼痛都有镇痛效果。临床上主要用于外科手术和外伤性剧痛、晚期癌症剧痛等，也用于心绞痛发作时止痛和镇静作用。久用可产生严重的依赖性，一旦失去供给，将会产生流汗、颤抖、发热、血压升高、肌肉疼痛和痉挛等明显的戒断症状。长期使用吗啡，会引发精神失常，大剂量吸食吗啡，会导致呼吸停止而死亡。吗啡可影响胆碱能系统活性致大鼠学习记忆障碍。第三十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统度冷丁(哌替啶)是人工合成的阿片受体激动剂，度冷丁普遍地使用于临床，它对人体的作用和机理与吗啡相似，但镇痛(zhèntònɡ)、麻醉作用较小，仅相当于吗啡的1/10—1/8，注射度冷丁后，血液和脑内的浓度迅速上升，容易引起“飘”感。它在体内会产生一种名为去甲哌替啶的毒性代谢物，对中枢神经系统有着明显兴毒性。度冷丁有一定的成瘾性，连续使用1--2周便可产生药物依赖性。第三十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统药物(yàowù)耐受性和药物(yàowù)依赖性耐受性tolerance是指人体对药物反应性降低的一种状态，按其性质有先天性和后天获得性之分。前者对药物的耐受性可长期保留，多与这类患者体内某些(mǒuxiē)药物代谢酶过度活跃有关。后者往往是连续多次用药后才发生的，增加剂量后可能达到原有的效应；停止用药一段时间后，其耐受性可以逐渐消失，重新恢复到原有的对药物反应水平。容易产生耐受性的药物如硝酸甘油、安定等。

第三十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统耐药性resistance又称抗药性是指病原微生物对药物反应性降低的一种状态。这种情况主要是由于长期应用抗菌药物，病原微生物通过产生(chǎnshēng)使药物失活的酶，改变原有代谢过程等机理，而产生(chǎnshēng)的一种使药物效果降低的反应。要想达到原有杀菌效果，往往需要加大药物剂量；有时加大药物剂量也不能再杀死这些耐药病菌。第三十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统药物依赖性dependence与成瘾性药物依赖性是指药物与人体相互作用所产生的一种精神状态，有时也包括身体状态，表现出一种强烈使用或定期使用该药行为反应，目的是为了体验这种药物的精神效应(xiàoyìng)，有的也是为了避免由于断药所引起的不舒适。第三十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统根据依赖情况，可分为：（1）身体依赖性，又称生理依赖性，是由于反复用药所造成的一种适应状态，中断用药后可产生一种强烈的躯体(qūtǐ)方面的损害，即戒断综合征，如肌肉关节疼痛、全身难受、四肢不适、全身乏力、心慌、烦躁不安、纳差、流涕、哈欠连连等，不同成瘾药物引起的戒断综合征略有不同，这种情况也就是通常人们所说的“成瘾性”。能产生身体依赖性的药物主要是中枢镇痛药物，如吗啡、度冷丁、阿片等。（2）精神依赖性，又称心理依赖性，它使人产生一种要周期性或连续性地使用药物的欲望，产生强烈的用药行为，以获得满足或避免不适感。产生精神依赖性的药物在断药时一般不出现身体戒断症状，这是与身体依赖性的区别点。常导致产生精神依赖性的药物主要有催眠类药物，如安定、舒乐安定、利眠宁、阿普唑伦等。为了避免药物耐受性、耐药性、依赖性和成瘾性的产生，关键要合理用药，而且要在医生指导下，根据病情需要使用。第三十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统二、疼痛(téngtòng)的动物模型与研究方法疼痛是多种疾病的症状，动物疼痛模型建立对阐明疼痛疾病的发病机理以及探讨药物作用原理都具有重要的理论意义和临床前研究价值。动物疼痛模型除了常用的热刺激法、电刺激法、机械刺激和化学刺激等试验方法外，近几年来建立动物疼痛模型，主要是通过疾病或外伤(wàishāng)诱发模型动物的疼痛来模拟人类疼痛的动物模型。第三十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统神经病理性痛模型神经损伤：神经瘤、慢性压迫性损伤、部分神经损伤、背根节慢性压迫、低温神经损伤中枢神经痛模型炎症痛模型癌症痛模型甩尾反射模型热辐射或热水甩尾机械刺激甩尾热(冷)板反应模型内脏痛模型化学诱导的躯体(qūtǐ)扭动模型膨胀结肠模型第三十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统扭体模型(móxíng)可采用小鼠或大鼠有多种刺激物都可诱发动物扭体(writhing)行为最常见的刺激物是醋酸(aceticacid)。将1克阿拉伯胶(arabicgum)加入9ml浓度为1%的醋酸溶液中，再注入实验(shíyàn)动物体内，观察注射后90分钟期间每15分钟内出现典型扭体症状的次数该模型可以模拟腹腔炎症引起的腹痛症状第四十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统白陶土(táotǔ)-鹿角菜胶炎症模型白陶土(Kaolin)是一种细颗粒状物质，成分为氧化铝，起机械刺激作用；鹿角菜胶(carrageenan)是由水生植物鹿角菜中提取的胶体物质，具有过敏刺激作用。鹿角菜胶单独实验即可诱发炎症，若与白陶土合并使用，则炎症更为强烈可采用家兔或大鼠麻醉动物，由一侧后肢足底注入4%白陶土混悬液0.1ml，并按摩5分钟使之在组织中分散。在注射后1小时，再注入2%鹿角菜胶溶液0.05ml并按摩5分钟。炎症过程一般在第一次注射后2小时内开始。动物后足红肿，皮温升高，PWT值降低等类似(lèisì)痛敏的症状一般能持续12小时以上，24小时后基本复原。因而本模型属于亚急性炎症痛模型范围本模型亦可采用关节腔注射第四十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统福尔马林(fúěrmǎlín)致痛模型模拟组织急性炎症损伤所致的持续性疼痛大鼠或小鼠足底(zúdǐ)福尔马林致痛模型：在动物一肢足底皮下注射稀释的福尔马林(formalin)溶液，动物的行为改变，如安静时的屈腿、运动时的跛行以及舔足等。这些行为的程度(如舔足时间)与福尔马林浓度成正比面部福尔马林致痛模型：把不同浓度的福尔马林溶液(0.2~10%)皮下注射到大鼠的右上唇，记录注射后每3分钟时间内动物用同侧前肢或后肢摩擦注射部位的秒数作为痛分数第四十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统各种症状普遍分为两个时相：急性相或第一相：前5分钟。之后有5-10分钟的间歇持续相或第二相：15~60分钟两相均可用于实验，但以第二相为常用。两个时相的发生(fāshēng)机制并不相同第四十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统炎症(yánzhèng)痛模型inflammatorypainmodel多发性佐剂关节炎模型含高浓度结核杆菌的福氏佐剂，向大鼠尾根部或足底作皮内注射，一侧或双侧后肢通常首先出现多个关节的炎症(yánzhèng)

单发性佐剂关节周围炎模型完全福氏佐剂注射到动物后肢足底，造成单个关节周围局部组织的炎症反应单发性佐剂关节腔炎模型将高浓度的福氏佐剂直接注射到大鼠后肢踝关节腔中，引起一个具有急性、慢性两相的高度局限的关节炎症福氏佐剂关节炎模型福氏佐剂足底炎症模型第四十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统ChronicInflammatoryPainModel-MonoarthritisAnklejoint:intra-articularinjectionofCFAWeek1:acuteperiodWeek2-3:subacuteperiodWeek4-9:chronicperiod第四十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统常用的痛刺激(cìjī)方法热刺激冷刺激机械(jīxiè)刺激化学刺激电刺激缺血第四十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统实验动物(dòngwù)的疼痛评价方法较理想的行为学评价方法应该具备能区分动物对伤害性和非伤害性刺激的不同反应痛刺激引起的行为反应随刺激强度从痛阈到耐痛阈间出现相应(xiāngyīng)改变测得的行为改变可以反映动物的痛感受动物的行为反应对镇痛药物的处理敏感能将非感觉性变化，如注意力、活动能力等与感觉性变化区分开反复刺激不引起或只引起极小的组织损伤第四十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统小鼠甩尾实验(shíyàn)或热板法热刺激的痛觉检测(jiǎncè)方法第四十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第四十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统化学(huàxué)刺激的痛觉检测方法第五十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统福尔马林试验（formalintest）和小鼠扭体试验（writhingtest）在本实验中主要是利用(lìyòng)福尔马林（化学刺激、延长的保护性活动）试验来评价阿司匹林的镇痛药效，并观察0.6%的醋酸溶液所引起的小鼠扭体反应。第五十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统称量小鼠的体重，用于注射福尔马林的后右脚掌进行标记，以便于行为学反应观察；将小鼠放入大玻璃烧杯（1500或2000ml）中，让它适应环境10－15min；下面放置倾斜30度的镜子，以便于观察小鼠的足部反应；配好药物：生理盐水（0.9%的NaCl溶液(róngyè)）和不同浓度的阿司匹林溶液(róngyè)（1mg/ml；10mg/ml；100mg/ml）；在注射福尔马林溶液前30min提前腹腔注射空白对照（溶剂对照）待测的药物；然后迅速将小鼠放回玻璃大烧杯中；第五十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第五十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统在腹腔注射后30min，将小鼠取出，将小鼠装入小纸筒或用手轻柔的抓住后，在其标记(biāojì)的后右脚掌的脚底中间皮肤下用微量进样器注射20μl的福尔马林溶液，迅速放回烧杯中；开始计时，并在注射后40min记录小鼠的行为学反应；一般福尔马林会引起两个时相的反应：0－10min出现的第I相（早期相），此反应主要是直接刺激C纤维所致；10－60min出现的第II相，一般认为有炎症机制参与。近年来用于用于记录方法有两种：第五十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第一种：记录每分钟内出现各级反应的秒数，并根据反应的分级标准（分级标准：舔、咬或抖足为3分；提足2分；轻触面但不负重，行走时跛行1分；正常负重，走动(zǒudòng)自如0分）来计算相应的每分钟的反应分数，即各级反应的秒数乘以相应反应的分数，以乘积之和为疼痛定量的指标（最大值为60秒×3分＝180）第二种：记录不同时相舔、抖被注射足时间为疼痛指标。重复以上实验操作，直至获得所需的实验动物只数。第五十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统第五十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统热板测痛仪第五十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统光热(ɡuānɡrè)测痛仪第五十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统三、内源性痛觉调节(tiáojié)系统人们设想脑内的阿片受体不可能专为外源性阿片碱类药物而存在(cúnzài)，在体内很可能存在(cúnzài)相应的内源性阿片样物质与之结合参与疼痛的调节。第五十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统（一）内源性阿片肽哺乳动物体内天然产生的具有吗啡或鸦片(yāpiàn)样活性的物质，在结构上属于肽类可以分为五大类。

强啡肽孤啡肽内吗啡肽β-内啡肽脑啡肽内阿片肽第六十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统（二）阿片受体是典型的G蛋白耦联受体,通过药理学试验可分为(fēnwéi)四大类．Opioidreceptorµreceptorδreceptorκreceptororphanreceptor第六十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统(三)内阿片(āpiàn)肽和阿片(āpiàn)受体的发现1973年采用放射性配基结合实验和药理学手段发现阿片受体。1975年运用生物化学方法分离(fēnlí)和纯化阿片受体的内源性配基——内源性阿片肽(脑啡肽，内啡肽和强啡肽)，这两个发现使人们对阿片类药物作用的分子基础有了深入的认识。第六十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统1992年采用分子生物学技术从NGlOS—15细胞上克隆出δ受体后，已相继从不同种属的动物上克隆出阿片(āpiàn)受体三个亚型μ、κ和δ受体。1994年从人和大鼠cDNA文库中筛选到另一类阿片受体，其药理性质明显不同于己发现的阿片受体，称之为阿片受体家族中的“孤儿受体”(orphanreceptor)。第六十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统1995年从猴及大鼠中分离到孤儿受体的内源性配基，称为孤啡肽(nociceptin)1996年-1998年阿片受体（μ、κ和δ）基因敲出小鼠制备成功，这将对三类(sānlèi)阿片受体在吗啡类镇痛及成瘾机理的进一步了解有十分重要的作用。第六十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统1997年的又一重要新发现：即从牛前脑皮层中分离(fēnlí)纯化得到两个高选择性μ受体的内源性配体，叫endomorphine-1（内源性吗啡-1）及endomorphine-2（内源性吗啡-2）。第六十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统(四)内源性阿片肽家族各成员(chéngyuán)概述脑啡肽(enkephalin)：包括蛋氨酸脑啡肽和亮啡肽，对δ受体的选择性较强，被认为是δ受体的内源性配体。前脑啡肽原基因编码263或267个氨基酸残基的前脑啡肽原，经酶切加工出蛋氨酸脑啡肽和亮啡肽。脑啡肽主要由脑内和下行痛觉调制神经元以及肾上腺髓质表达，在中枢脑啡肽是重要的镇痛介质，许多抑制性递质通过脑啡肽介导的阿片(āpiàn)受体作用发挥镇痛效应。脑啡肽在疼痛信号弱时释放不增加，而在强烈刺激时才有大量的释放。第六十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统亮脑啡肽序列(xùliè)和三维结构Tyr-G1y-G1y-Phe-Leu-OH第六十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统甲脑啡肽序列(xùliè)和三维结构Tyr-G1y-G1y-Phe-Met-OH第六十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统强啡肽(dynorphin)：强啡肽由前强啡肽原基因编码，经酶切加工出强啡肽A和强啡肽B，脑内和脊髓神经元都可分泌。强啡肽是κ受体的特异性配体。在脊髓水平，强啡肽的作用存在比较复杂。生理水平的强啡肽起镇痛作用，同时它能维持其他阿片肽在脊髓的镇痛效应，而在脊髓损伤和坐骨神经损伤时脑脊液中的强啡肽水平明显升高，研究表明，强啡肽能通过NMDA受体诱导脊髓损伤。许多慢性疼痛动物或病人(bìngrén)脑脊液内强啡肽水平并未减少，相反，随着疼痛时间延长，强啡肽的水平越高。第六十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统强啡肽A序列(xùliè)和三维结构图Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-Ile-Arg-Pro-Lys-Leu-Lys-Trp-Asp-Asn-Gln-OH第七十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统强啡肽B序列(xùliè)和三维结构图Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-Gln-Phe-Lys-Val-Val-Thr

第七十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统β-内啡肽(beta-endorphin)：β-内啡肽由POMC基因编码的β趋脂素经蛋白水解酶PC2水解产生，对u和δ受体均有较强的亲和力。在脊髓蛛网膜下腔内注射β-内啡肽，除了可以直接作用于μ受体外，还可以通过结合脊髓后角受体促进脑啡肽分泌而产生强镇痛效应。在中枢神经系统内只有(zhǐyǒu)腺垂体和下丘脑的神经分泌细胞分泌通路细胞器中含有PC2水解酶能够产生成熟的β-内啡肽，而感觉神经元和中间神经元不能分泌β-内啡肽。第七十二页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统β-内啡肽序列(xùliè)和三维结构图Tyr-G1y-G1y-Phe-Met-Thr-Ser-G1u-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-Asn-A1a-Ile-I1e-Lys-Asn-Val-His-Lys-Lys-G1y-Gln-OH第七十三页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统孤啡肽(nociceptin，OFQ)：孤啡肽的氨基酸序列结构与强啡肽比较相似，都是17肽，但它对δ、μ、κ受体的亲和力很弱，对孤儿(ORL1)受体亲和力强。孤啡肽可引起痛敏，脑室内微量注射可导致(dǎozhì)大鼠痛阈降低基因，并且可以抑制吗啡的抗伤害镇痛效应。

第七十四页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统孤啡肽序列(xùliè)和三维结构图Phe-G1y-G1y-Phe-Thr-G1y-Ala-Arg-Lys-Ser-A1a-Arg-Lys-Leu-A1a-Asn-G1n-OH第七十五页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统内吗啡肽(endomorphin)：一种四肽氨基酸，对μ受体具有高选择性、强效的亲和力，它的氨基酸序列是Tyr-Pro-Trp-Phe-NH２，主要分布于脑内。根据EM-1特异抗体又找到结构类似的EM-2，主要分布于脑内和脊髓内，与前者的区别在于(zàiyú)第三位上的氨基酸改为Phe，它对μ受体的亲和力比EM-1更高。第七十六页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统脑和脊髓蛛网膜下腔内注射(zhùshè)内吗啡肽或类似物，可产生明显的镇痛效应，对于炎性疼痛的治疗作用更为明显，对于神经痛EM也能有效镇痛，同时对吗啡耐受的大鼠神经痛仍具有效果。内吗啡肽是一个比较合适的治疗顽固性疼痛的分子。但是内吗啡肽成瘾还是不能解决的一个问题。

第七十七页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统EM-1:Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2EM-2:Tyr-Pro-Phe-Phe-NH2第七十八页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统内源性阿片肽的前体前阿黑皮素(POMC)是β内啡肽的前体。前脑啡肽(或称前脑啡肽A)是甲硫脑啡肽和亮脑啡肽的前体。前强啡肽(或称前脑啡肽Ｂ)是各类强啡肽的前体。

阿片肽是其前体经过—系列(xìliè)酶解后产生的。第七十九页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统(五)阿片(āpiàn)受体研究μ受体由398个氨基酸组成，具有G蛋白相关受体结构特征endomorphine-1（内源性吗啡-1）及endomorphine-2（内源性吗啡-2）是其高选择性的内源性配体。研究表明，μ受体主要介导吗啡镇痛、位置(wèizhi)偏爱和身体依赖性作用.第八十页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统δ受体有372个氨基酸组成，该受体有七个疏水性(shuǐxìng)的跨膜区域。第八十一页，共九十二页。痛觉研究与阿片系统2005年8月25日在国际著名学术期刊《细胞》发表了中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所张旭博士指导的感觉系统研究组及其合作者完成的研究论文，他们发现在传导痛觉的初级感觉神经元中新合成的P物质的前体分子与Delta阿片受体发生直接相互作用，并将该阿片受体带入可调控的分泌途径中，使Delta阿片受体在它的激动剂刺激下，或者在痛觉刺激下，能够出现在这些感觉神经元的表面，与相应受体激动剂结合，产生镇痛作用。他们还观察到没有P物质基因的小鼠，D