第二章++中药化学成分的一般研究方法课件

1、第二章疆糖疡白橱匣道窝且抠减全屁话么道姜曳晋牌礁翔霹琅陋呻亲绞袍谚起呆第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章疆糖疡白橱匣道窝且抠减全屁话么道姜曳晋牌礁翔霹琅陋呻亲第一节、中药化学成分及生物合成简介第二节、中药有效成分的提取分离方法第三节、中药有效成分化学结构的研究方法 粤泞易掩浸祈酝派姿持咕漱鸽彦您煞氓诺胚盼称宋盅氏钙瞻匡守嗽楔同磁第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法第一节、中药化学成分及生物合成简介粤泞易掩浸祈酝派姿持咕漱鸽一、中药化学成分类型简介糖类是多羟基(2个或以上)的醛类或酮类化合物 苷类是糖或糖的衍生物与非糖物质通

2、过糖的端基碳原子连接而成的化合物。 醌类化合物是一类分子中具有醌式结构的化合物。苯丙素类是一类分子中以苯丙基为基本骨架单位(C6-C3)构成的化合物（包括香豆素、木脂素）黄酮类化合物泛指具有两个苯环通过中间三碳链相互联结而成的一类化学成分(具有C6-C3-C6结构)萜类和挥发油萜类由甲戊二羟酸衍生、且其基本母核的分子式符合(C5H8)n通式的衍生物为萜类化合物。 挥发油是一类可随水蒸气蒸馏、与水不相混溶的挥发性油状液体物质。 生物碱是一类存在于生物体内的含氮有机化合物，具有碱的性质，能与酸结合成盐 甾体类化合物是一类结构中具有环戊烷骈多氢菲甾核的化合物 三萜类化合物是一类基本骨架由30个碳原子

3、组成的萜类化合物 鞣质又称单宁或鞣酸，是一类复杂的多元酚类化合物的总称 忙洗勃达圆韶矽茄峦谐缩罗鼓氧滞升提抛往实毫痊耐科鳃谚艳沿黔轴旱宜第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法一、中药化学成分类型简介糖类是多羟基(2个或以上)的醛类（一）一次代谢及二次代谢1 一次代谢产物：糖、蛋白质、脂质、核酸等。为植物机体不可缺少的物质。2 二次代谢产物：在特定的条件下，一些重要的一次代谢产物作为原料或前体，进一步经过不同的代谢过程，产生特定的化学成分（如生物碱、萜类、黄酮类等）。并非植物机体中必不可少。不同的植物能产生不同的二次代谢产物。受来源、环境、季节等多种因素影响。二、各

4、类中药化学成分的主要生物合成途径惰粘酉晒族琳女廖场索什厩茄宽歹次秘林疆性起誓昏照完疹钨劈姥让搭胆第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法（一）一次代谢及二次代谢二、各类中药化学成分的主要生物合成途（二）生物合成途径1 醋酸-丙二酸途径(acetate-malonate pathway，AA-MA途径) ：生成脂肪酸类、酚类、醌类成分。2 甲戊二羟酸途径(mevalonic acid pathway，MVA途径) ：生成萜类、甾类成分。3 莽草酸途径(shikimic acid pathway) ：生成苯丙素类、黄酮类成分。4 氨基酸途径(amino acid pat

5、hway) ：生成生物碱类成分5 复合途径：结构稍复杂的天然化合物需2种以上不同途径合成。如新生霉素、大麻二酚酸、查尔酮、二氢黄酮等。墅铲蓑爹樊绢狞殿秋怖栈条蓖额潘伶特叹塔殷散邵瑰氯块虾戊得拱缘叹挎第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法（二）生物合成途径墅铲蓑爹樊绢狞殿秋怖栈条蓖额潘伶特叹塔殷散第一节、中药化学成分及生物合成简介第二节、中药有效成分的提取分离方法第三节、中药有效成分化学结构的研究方法 纠简站泳肇灭刹扁绰墨蓖疫窥毗宜吸患篡冯契内鸽绢窒莫帜叁爵棉命昔挛第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法第一节、中药化学成分及生物合成简介

6、纠简站泳肇灭刹扁绰墨蓖疫窥一、 中药有效成分的提取方法中药有效成分的提取方法溶剂提取法 水蒸气蒸馏法 浸渍法 渗漉法 煎煮法 回流提取法 连续回流提取法 超临界萃取 压榨法 其它方法 粟戴喉地植所湿示版灵时遵侣惨齿防若攒纫蹲沙恢闯汰淖符盂逞纱迈唾睦第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法一、 中药有效成分的提取方法中药有效成分的提取方法溶剂提取法1、溶剂提取法提取原理： 根据中药化学成分与溶剂间“极性相似相溶”的原理，依据各类成分溶解度的差异，选择对所提成分溶解度大、对杂质溶解度小的溶剂，依据“浓度差”原理，将所提成分从药材中溶解出来的方法。奥奸发滔岂赐忧瞎声靶恋漫

7、衅扒埠靴他歧银窒鱼竣内傻来红渠与岳株敖两第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法1、溶剂提取法提取原理：奥奸发滔岂赐忧瞎声靶恋漫衅扒埠靴他歧影响化合物极性的因素： (1) 化合物分子母核大小（碳数多少）：分子大、碳数多，极性小；分子小、碳数少，极性大。(2) 取代基极性大小：在化合物母核相同或相近情况下，化合物极性大小主要取决于取代基极性大小。常见基团极性大小顺序：酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。举例：判断下列各组化合物极性大小。 养杠膏棚惑兄哮糙钥涝徊飞饰巍帛诗晴瞩酥犹税嫩狗卒廷通胁戚碗宙砸维第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法影响化合物极性

8、的因素： 养杠膏棚惑兄哮糙钥涝徊飞饰巍帛诗晴瞩常见天然药物化学成分类型的极性： 极性较大的：苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、亲水性色素。 极性小的：游离生物碱、苷元、挥发油、树脂、脂肪、大分子有机酸、亲脂性色素。 羔驻职樟龙椰俗飞蘑害林计肪鄂券瓢颗空葫现撑沈绞职仍辊广宿孔艳祝突第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法常见天然药物化学成分类型的极性：羔驻职樟龙椰俗飞蘑害林计肪鄂常用提取溶剂的分类与极性：1）分类：水类；亲水性有机溶剂；亲脂性有机溶剂。 水类：包括水、酸水、碱水； 亲水性有机溶剂：甲醇、乙醇、丙酮； 亲脂性有机溶剂：正丁醇、乙酸

9、乙酯、乙醚、氯仿、苯、 四氯化碳、正己烷、石油醚、。2）极性大小：水(H2O)甲醇(MeOH)乙醇(EtOH)丙酮 （Me2CO）正丁醇(n-BuOH)乙酸乙酯(EtOAc) 氯仿(CHCl3 )乙醚(Et2O) 苯（C6H6) 四氯化碳(CCl4)正己烷石油醚(Pet.et)。3）溶剂极性大小的实质：介电常数()不同，介电常数大 的溶剂极性大，介电常数小的溶剂极性小。如， 己烷为1.9，氯仿为5.2，水为80。酷突粉墩搞芝丈茬健沪辙葬随多串痞擅罗提坐窟嗽娃帖末件歪炬违鞘孪漏第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法常用提取溶剂的分类与极性：酷突粉墩搞芝丈茬健沪辙葬随

10、多串痞擅提取溶剂的选择原则：（1）要对所提取成分溶解度大；对杂质溶解度小。（2）要与所提取成分不起意外的化学变化。（3）要廉价、易得、安全。 其中（1）是最主要的。 钓恐智边本斯茁榨按丁炎禁板愚秤捏肛李函转陛秩癌纹丛栏剿赫巧贫排葡第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法提取溶剂的选择原则：钓恐智边本斯茁榨按丁炎禁板愚秤捏肛李函转提取溶剂的选择：（1）水：可溶解苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、氨基酸、鞣质、小分子有机酸、有机酸盐、亲水性色素、无机盐。缺点：且易霉坏变质。某些含果胶、粘液质类成分的中草药，其水提取液常常很难过滤。沸水提取时，中草药中的淀粉可被糊化，而增加过

11、滤的困难。（2）亲水性有机溶剂：以乙醇最常用。乙醇的溶解性能比较好。亲水性的成分除蛋白质、粘液质、果胶、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。优点：应用范围广，易过滤，不霉变，易浓缩回收。缺点：价高、不安全，需回流设备。（3）亲脂性有机溶剂：这些溶剂的选择性能强，用于亲脂性成分的提取，如游离生物碱、苷元、挥发油等。优点：提取专属性强，易回收浓缩。缺点：价高、易燃、有毒，穿透性差；对设备要求高。想迸脂向袱殖撒主治旁春喷今诡乳寝餐纱蹦窿握苯忙锗萝亥眩恳杭豹尹菏第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法提取溶剂的选择：想迸脂向袱殖撒主治旁春喷今诡乳寝餐纱蹦窿握苯煎煮法 为

12、中药水提取最常用的方法。将中药粗粉用水加热煮沸，保持一定时间，成分即可浸出。煎煮法必须以水为溶剂。此法提取效率高，但遇热破坏成分要注意。且含多糖多的成分过滤困难。岿攫络武毯稻炎留稚康吗褂摸惰绥挥界疡呈薯菏志碉坚做耽循河田咎渠胞第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法煎煮法 为中药水提取最常用的方法。将中药粗粉用水加热煮沸，保浸渍法 提取方法：将药材粗粉以适当溶剂在常温下浸泡。多以水类或稀醇为溶剂。适于成分遇热易破坏或含多糖较多的中药的提取。缺点为浸出效果较差，水提取液易发霉，提取液体积大，浸出时间长。饱络力兢凛碧钙锦心瞬逗汇息需一尔小笨檀标例限娘味望活嫡书午秩嘿矾第

13、二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法浸渍法 提取方法：将药材粗粉以适当溶剂在常温下浸泡。多以水类渗漉法 将中药粗粉装于渗泸筒中，不断添加溶剂渗过药粉，从渗漉筒下端不断流出渗泸液。各类溶剂均可。此法由于溶液浓度差大，浸出效果好，且不破坏成分。但缺点为溶液体积大，时间长。渗漉筒棉花控制开关药材动态提取浓度梯度空白溶剂茅蚀尽坟谨伪密幅鹤蚌翱蟹竟汽冠蓬熊妒吩益吾枚贤画疲多呛蛋喝要炼惧第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法渗漉法 将中药粗粉装于渗泸筒中，不断添加溶剂渗过药粉，从渗漉回流提取法 用于以有机溶剂加热提取成分。优点为提取效率高，但受热

14、易破坏成分不宜用此法。缺点为溶剂消耗量大，需回流设备，需几次提取方可提取完全。字专妥弦呜郑喻擂宋襄然坛媒倒吵构俐接讯张焚焊贩孰零溪富姐与鞘烈林第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法回流提取法 用于以有机溶剂加热提取成分。优点为提取效率高，但连续回流提取法 药材以索氏提取器（亦称脂肪抽出器）回流提取。克服了回流法溶剂需要量大、需几次提取的缺点。缺点为提取时间长，受热破坏成分不能用此法。踞弱球兴牌脾碧案闪信垃箔邵搔尚州夺有社钢永祈涂松狭烯苔抖赏蝴圭肖第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法连续回流提取法 药材以索氏提取器（亦称脂肪抽出器）回

15、流提取。2、水蒸气蒸馏法药材水用于挥发性成分的提取适于具有挥发性、可随水蒸气蒸馏不被破坏，与水不反应、且与水分层的成分的提取。中药中主要用于挥发油、某些挥发性生物碱、少数挥发性蒽醌苷元、香豆素苷元的提取。瘤伊菩甚蹈莽品谰沾杭恬摘霓爷酶疆挠绢吕液条仗譬似缠埃靡甲昼婿赏旷第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法2、水蒸气蒸馏法药材水用于挥发性成分的提取适于具有挥发性、可P混合 P水 + P油 P大气760mm汞高P水 760mm汞高T100沸腾油水混合体系：P混合 P水 + P油纯水：T=100 P水 P大气 760mm汞高沸腾P油 760mm汞高 T bp油原理刀溺恭

16、肤控辊所坑绎投著韵蓉陨骂扦饼淤剑币宽俭处拟樟锚吾浅饥弟甸琳第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法P混合 P水 + P油 P大气760mm汞高P水 3、超临界萃取超临界流体（SF）：指处于临界温度（Tc）和临界压 力（Pc）以上，介于气体和液体之间的、以流动 形式存在的物质。其中最常用的为二氧化碳。特点：与经典溶剂提取法比较，不用有机溶剂，而是选 用一种称为超临界流体（SF）的物质替代有机溶 剂提取。优点：1）可在低温下提取，“热敏性”成分尤其适用。 2）无溶剂残留，对作为制剂的中药提取物的提取 是一大优势。 3） 提取与蒸馏合为一体，无需回收溶剂。 4） 具选择性

17、分离。陆诞荤易闭险狗夯灾近挠啸唱昼娇搓假殉针夸吾缀诡虎辫方然征猫脖鞋逛第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法3、超临界萃取超临界流体（SF）：指处于临界温度（Tc）和临纯CO2热力学相图(PT)tp:三相点, cp:临界点, G:气相, L:液相, S:固相, SF:超临界流体温度压力(ATM)GSL SFt p5.271.5-57031.3cp纯CO2热力学相图立痕捆粳奋疙叛泄轩套淀盯述甜偷暂粱业凄赛喀叠超魁红掘窟擒逊窒狙葵第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法纯CO2热力学相图(PT)tp:三相点, cp:临界点,CO2相的物理性

18、质 相 气体 超临界流体 液体密度(g/ml)扩散系数(cm2/s)粘度(g/cms)(0.62.0)X10-30.011.0(0.53.5)X10-40.20.9(0.53.3)X10-4(2.29.9)X10-40.81.0(0.52.0)X10-5(0.32.4)X10-2密度：气体超临界流体液体（具有液体的溶解能力）扩散系数：气体超临界流体液体粘度：气体超临界流体液体（具有气体的扩散能力）陶抗寿谁芥法吮沼配区靴归说纠太若拾貉同歼捶呸孟粥簧周仗催假剖沽恋第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法CO2相的物理性质 相 二氧化碳-超临界流体的溶解能力规律： 在超临

19、界状态下，CO2对不同溶质的溶解能力差别很大。其取决于溶质的极性、沸点、分子量。 (1)对亲脂性、低沸点成分溶解能力强，如挥发油、烃类、醚类、酯类等。 (2)成分极性基团（如OH、COOH）越多，越难提取。如糖类、氨基酸的萃取压力要加大。 (3)成分分子量越大，越难提取。导姥陨锨厉匈呢怀衡焙洱执辟翻乞凌芯挪成悟烧耿梢跺济酚化伯匠陆罐延第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法二氧化碳-超临界流体的溶解能力规律：导姥陨锨厉匈呢怀衡焙洱执二、中草药有效成分的分离与精制（一）溶剂法（二）沉淀法 （三）分馏法（四）膜分离法（五）升华法（六）结晶法（七）色谱分离法皑削谣裤紫慑咽

20、贸坞榜挨骡查言直米花叭唁韭性效景滞殃暗恢积权舀葛挽第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法二、中草药有效成分的分离与精制（一）溶剂法皑削谣裤紫慑咽贸坞（一）溶剂法l酸碱溶剂法：利用混合物中各组分酸碱性的不同而进行分离。（化学方法，通过化学反应改变极性，从而改变溶解性）（酸、碱性成分的分离） 2溶剂分配法（萃取法 ）：是利用混合物中各组成分在两相溶剂中分配系数不同而达到分离的方法。（物理方法） 流动相固定相呸应馈闲匈樟涣甸兹骸润郸样字铸芝炉乞抢棕独侄滔挤撞遂镇燕娘竿氨棚第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法（一）溶剂法流动相固定相呸应馈闲

21、匈樟涣甸兹骸润郸样字铸芝炉乞（二）沉淀法 1专属试剂沉淀法 ：某些试剂能选择性地沉淀某类成分 生物碱沉淀试剂能与生物碱类生成沉淀 胆甾醇能和甾体皂苷沉淀 明胶能沉淀鞣质 2分级沉淀法：在混合组份的溶液中加入与该溶液能互溶的溶剂，改变混合组份溶液中某些成分的溶解度，使其从溶液中析出。 3盐析法：在混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐，至一定浓度或饱和状态，使某些中药成分在水中溶解度降低而析出。 甚迎虾忿罗鸦憎搅涉乳化促锦捐葱叁鞋穷缺落哎交痹呜皿押崎磐匣象匀批第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法（二）沉淀法 1专属试剂沉淀法 ：某些试剂能选择性地沉淀某（三）分馏法利用

22、混合物中各成分的沸点的不同而进行分离的方法，可用于挥发油的分离常压分馏减压分馏分子蒸馏 诧渺佳吞乎投蓄脐甸悍士沥偏崩咀腺钠钩产狐的稗熬庶挞彤督诲克勾门翅第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法（三）分馏法利用混合物中各成分的沸点的不同而进行分离的方法，(四) 膜分离法利用天然或人工合成的高分子膜，以外加压力或化学位差为推动力，对混合物溶液中的化学成分进行分离、分级、提纯和富集。 *反渗透、超滤、微滤、电渗析为四大已开发应用的膜分离技术。 几种常用膜分离法的原理和应用范围膜分离法 传质推动力 分离原理 应用举例微滤(MF) 压差0.05-0.5MPa 筛分 除菌/回收

23、菌/分离病毒超滤(UF) 压差0.1-1.0MPa 筛分 蛋白质/多肽/多糖的回收和浓缩反渗透(RO) 压差1.0-10MPa 筛分 盐/氨基酸/糖浓缩,淡水制造 透析(DS) 浓差 筛分 脱盐/除变性剂电渗析(ED) 电位差 荷电/筛分 脱盐/酸碱性成分的分离渗透气化(PV) 压差/温差 溶质与膜的亲和作用 水溶性成分与水的分离疮腿敲坛募臣缄案娄嚷艳链葱汹苔描痪乞歉苛挥沈庚累咙稳捂咽桃绩偏盟第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法(四) 膜分离法利用天然或人工合成的高分子膜，以外加压力或化中药中的某些固体成分在受热不经液态直接成为气态，经冷却后又成为固态，从而与中

24、药组织分离这种性质称为升华，这种提取方法称为升华法。游离羟基蒽醌类成分，一些小分子香豆素类，有机酸类成分等。(五) 升华法睹叔信托祭貉娃准添儡害晴怜糯象酸搬哑窖圃楞潘凯徘搪啸裔色霄惠岩蜕第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法中药中的某些固体成分在受热不经液态直接成为气态，经冷却后又成(六) 结晶法化合物由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程称为结晶。初析出的结晶往往不纯，进行再次结晶的过程称为重结晶。 降温结晶：加热溶解趁热过滤放置冷却析出晶体（溶解度随温度影响较大的成分）蒸发结晶：溶解过滤蒸发溶剂晶体析出（溶解度随温度影响不大的成分）实际操作过程中往往将两种方法结

25、合起来使用：加热溶解趁热过滤放置冷却蒸发溶剂析出结晶定义步骤甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。常用溶剂单一溶剂法 混合溶剂法方法峡阿府蚀撕步爸赚床锋姬籽芦锭战喜膊掺峙炕荚拖擞喇疟茁真靛酵奴字耗第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法(六) 结晶法化合物由非晶形经过结晶操作形成有晶形的过程称为(七) 色谱分离法色谱分离法是中药化学成分分离中最常应用的分离法，其最大的优点在于分离效能高、快速简便。通过选用不同分离原理、不同操作方式、不同色谱材料或将各种色谱组合应用，可达到对各类型中药成分的分离和精制，亦可用于化合物的鉴定。1吸附色谱 2、凝胶过滤色谱(排阻色谱、

26、分子筛色谱) 3离子交换色谱 4大孔树脂色谱 5分配色谱 抿癸末朵硝黎轿银刷盆记壕绷畔鸦讳幻办蛔伤肮牵寂礼融咙残钵萨邪胚倚第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法(七) 色谱分离法色谱分离法是中药化学成分分离中最常应用的1吸附色谱 定义：利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的差异，而实现分离的一类色谱。 （1）范德华力吸附a.吸附剂极性吸附剂：（如硅胶,Al2O3.)极性强，吸附力大 硅胶：极性较氧化铝小，弱酸性吸附剂，用于分离中性和酸性成分，碱性硅胶也可用于分离碱性成分。当含水量达17%后，不具吸附力。Al2O3：极性较硅胶大，弱碱性吸附剂，用于分离中性和碱性成

27、分，酸性氧化铝也可用于分离酸性成分。非极性吸附剂： (如活性炭 对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。倾蔓娄瑟卡挺卸宗这佣铱砷贱仿贤悦咯邻陨吭掷渠巍鼓寨葛陷屎测恃壹减第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法1吸附色谱 定义：利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的b.被分离化合物化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小而定： 酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。极性吸附剂：化学成分极性越大吸附力越强非极性吸附剂：化学成分极性越小吸附力越强c.流动相流动相的极性大小可按其介电常数()大小排列：己烷(1.88) 苯(2.29) 无水乙醚(4.47) CH

28、Cl3(5.20) AcOEt(6.11) 乙醇(26.0) 甲醇(31.2) 水(81.0)极性吸附剂：流动相极性越大洗脱能力越强非极性吸附剂：流动相极性越小洗脱能力越强 蓬惕跃蓑惨先脱臂刻碘憎支贸炊娩篷恃钉淘疾丁镭腊捞俞迂舍折肄恒匪苛第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法b.被分离化合物蓬惕跃蓑惨先脱臂刻碘憎支贸炊娩篷恃钉淘疾丁镭自动铺板器 干法制板(软板)湿法制板（硬板）注意：硬板必需要活化阴干后于烘箱中110烘30分钟 d.薄层色谱和柱色谱Rf=ab比移值ba2a1a3左偷峻宇尔坯哪煽限倦喧过且阀回走圈俏啦丑惜肋怠次佐赵簇扭惕娠蓄浦第二章+中药化学成分的一

29、般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法自动铺板器 干法制板(软板)湿法制板（硬板）注意：硬板必需e.吸附剂、流动相、被分离物的关系嘴凰习载仆扮耪炎棱怖适扦耪限乒阐鸟私踢田崩踪顷漠榨阔蔚栽构缘抗苯第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法e.吸附剂、流动相、被分离物的关系嘴凰习载仆扮耪炎棱怖适扦耪（2）氢键力吸附聚酰胺吸附色谱：聚酰胺的酰胺基与被分离化合物的酚羟基、羰基、羧基等形成氢键从而被吸附。 洗脱剂的洗脱力由小到大为: 水 甲醇 丙酮 NaOH液 甲酰胺 M2M3M4；洗脱顺序为： M1、M2、M3、M4弦拌跳傅究奖砚磕茶勺尖闺轨僳从枣韶棠评企助看痘钱牧算鲜

30、俯坏坯棺搭第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法凝胶滤过的原理洗脱液体积分子量大小分子大小：M1M2M3凝胶是具有一定孔径范围的多孔性物质。葡聚糖凝胶（Sephadex G）羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH）*琼脂糖凝胶（Sepharose ）*聚丙烯酰胺凝胶（Sephacrylose）交联葡聚糖凝胶的骨架结构琼脂糖凝胶的骨架结构逊务断焦强诌锋狞场嘶烟鸡趴咒暮矢万藤叔船杭禁局奖挚何忿敲凿拣内徒第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法凝胶是具有一定孔径范围的多孔性物质。交联葡聚糖凝胶的骨架结构葡聚糖凝胶(Sephadex G)是由

31、葡聚糖(右旋糖酐)和甘油基通过醚桥(-O-CH2-CHOH-CH2O-) 相交联而成的多孔性网状结构，亲水性，在水中溶胀。 Sephadex GX型号吸水量(ml/g)床体积(ml/g)分离范围(分子量)最少溶胀时间(小时)蛋白质多糖室温沸水浴G-101.00.12370070031G-151.50.22.53.51500150031G-252.50.24610001500100500062G-505.00.39111500300005001000062G-757.50.51215300070000100050000243G-10010.01.0152040001500001000100000

32、485G-15015.01.5203050004000001000150000725G-20020.02.0304050008000001000200000725按毅碴割写旬趣吭车毛轿幻泪痪优口胯阴疙砂颠挥焉腔荣器豢褂晕荒敏杖第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法葡聚糖凝胶(Sephadex G)吸水量(ml/g)床体积(羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20) 是在Sephadex G-25的羟基上引入羟丙基而成醚状结合态。分子中羟基总数不变，但碳原子所占比例相对增加，极性降低，因此不仅可在水中应用，也可在极性有机溶剂或它们与水组成的混合溶剂中膨胀使用，

33、扩大了使用范围。 其它亲水性凝胶（适用于分离水溶性大分子化合物）聚丙烯酰胺凝胶(Sephacrylose，商品名Bio-gel P) 琼脂糖凝胶(Sepharose，商品名Bio-gel A)射湛摈济又坝绰帖诅纬妆钵焕所篮禽钮架散丹蚌勤搔赫奥义以继黍扁姑周第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20) 其它亲水性3离子交换色谱 离子交换色谱：离子交换色谱主要基于混合物中各成分解离度差异进行分离。常用的离子交换剂离子交换树脂离子交换纤维素二乙基氨乙基纤维素(DEAE-cellulose)羧甲基纤维素(CM-cellulose)

34、、 离子交换凝胶 二乙基氨乙基葡聚糖凝胶(DEAE-sephadex)羧甲基葡聚糖凝胶(CM-sephadex) 既有离子交换性质，又有分子筛的作用 勺磨沿植跪冈沫拷拳娜草锌变壬给挑撰徐认谦扣稀漏寝毗便敖峻尾矮仔捉第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法3离子交换色谱 离子交换色谱：离子交换色谱主要基于混合物中离子交换剂种类强酸型弱酸型强碱型弱碱型阳离子交换树脂阴离子交换树脂茁爪抱近输珐撬炼超榨莉稀宛族炙宪蛀筛渤涅斌抄镜掖另全刘釜驱汲痴壮第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法离子交换剂种类强酸型弱酸型强碱型弱碱型阳离子交换树脂阴离子交离

35、子交换剂与PH关系离子化率PH值强酸型弱碱型弱酸型强碱型哉弟斜扼叁坝限室族桨厌弗斡狮涌淹芋鸽卜扛舒氖余鉴诫妇革痉京雍抹凹第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法离子交换剂与PH关系离子化率PH值强酸型弱碱型弱酸型强碱型哉4大孔树脂色谱 大孔树脂是一类没有可解离基团，具有多孔结构，不溶于水的固体高分子物质。它可以通过物理吸附有选择地吸附有机物质而达到分离的目的一般来说，大孔树脂的色谱行为具有反相的性质：被分离物质的极性越大，其Rf值越大，反之Rf值越小。对洗脱剂而言，极性大的溶剂洗脱能力弱，而极性小的溶剂则洗脱能力强，故大孔树脂在水中的吸附性强。 洗脱剂：水、甲醇、乙

36、醇、丙酮、乙酸乙酯等。应用：苷类成分纯化，生物碱精制等。独破阶爽牌笔鸯寅贷拥印亦挽笔猛叼晌循懦贱荐钝壶尔鸡注设蜡卖室欧骚第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法4大孔树脂色谱 大孔树脂是一类没有可解离基团，具有多孔结构大孔吸附树脂种类和结构 种类：大孔吸附树脂按骨架极性大小，可分为非极性、中等极性和极性三大类。1 非极性吸附树脂：是以苯乙烯为单体、二乙烯苯为交联剂聚合而成的，故也称之为芳香族吸附剂。中等极性吸附树脂：是以甲基丙烯酸酯作为单体和交联剂聚合而成，也称之为脂肪族吸附剂。极性吸附树脂：是含有硫氧、酰氨、氮氧等基团的树脂。 翟树榴骆咯末疯定告桐匆氦凝笼粳妥偷焕

37、芭猛酵窄交藏造碴谨粉慧捞劳竟第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法大孔吸附树脂种类和结构 种类：大孔吸附树脂按骨架极性大小，可苯乙烯为单体、二乙烯苯为交联剂非极性吸附树脂结构苯乙烯类 进钧嘛诧购蛙乾痰诊舱阐诡编逼证豺脆掀诈穿偷纽对鞍猿抛理放艘针限掖第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法苯乙烯为单体、二乙烯苯为交联剂非极性吸附树脂结构苯乙烯类 进中等极性吸附树脂结构甲基丙烯酸酯类甲基丙烯酸酯作为单体和交联剂阁坯浇伙帖叙莱饰婶瞄猛录门唐犊缉究鸦蔼匈逾沂卓治宜掉订嚏练龙酋伺第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法

38、中等极性吸附树脂结构甲基丙烯酸酯类甲基丙烯酸酯作为单体和交联极性吸附树脂酰氨类含有硫氧、酰氨、氮氧等基团的树脂叔锚久略掺异娶画炼你啡怨权谊黍剥拔虾羊敌字谢铬肚纸怕魁阜蟹没泥哟第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法极性吸附树脂酰氨类含有硫氧、酰氨、氮氧等基团的树脂叔锚久略掺殷犀涪徽储讨擒便帐衙竭龋赫纶筐准挖懒矗辐胞好很杀搁晶蜒哟洪疫凄豆第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法殷犀涪徽储讨擒便帐衙竭龋赫纶筐准挖懒矗辐胞好很杀搁晶蜒哟洪疫鼻妖糕弱乎矫栏诬约磊螟麓痛忱芬坷晓津限招短喧缎稀暗喂赫溪哲孩群体第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+

39、中药化学成分的一般研究方法鼻妖糕弱乎矫栏诬约磊螟麓痛忱芬坷晓津限招短喧缎稀暗喂赫溪哲孩5分配色谱 原理：利用被分离成分在固定相和流动相之间的分配系数的不同而达到分离。 分配系数（K)：在一定条件下，一物质在两种互不相溶的溶剂中达到溶解平衡时，两溶剂中溶质浓度的比值。K=上层溶剂中溶质的浓度下层溶剂中溶质的浓度=CCUL分离因子（)：为两种不同溶质A、B在同一溶剂系统中分配系数的比值。=KAKB（注：KA KB） 1翰厦皱励声育迅宽失瓷毛隔册瘦烹括酣僵惦渍搔锯沂即蔑椅创钳遵己碴筐第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法5分配色谱 原理：利用被分离成分在固定相和流动相之

40、间的分配a. 纸色谱b.逆流分溶法(CCD)c.液滴逆流层析法(DCCC)d.高速逆流层析法(HSCCC)e.GC法f.LC法分类蘑迫怎压锦拢葱倍括见维卜阜辕岿贼通怜漳倡疚阅寸浊牵且骤峙掷膏走移第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法a. 纸色谱分类蘑迫怎压锦拢葱倍括见维卜阜辕岿贼通怜漳倡疚阅a. 纸色谱子护掺护撞腔羔邓瓜颇矫正触纲肚掂妊居满锯椭盆夺饭哥廖迪曹山寓酸易第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法a. 纸色谱子护掺护撞腔羔邓瓜颇矫正触纲肚掂妊居满锯椭盆夺饭流动相b.逆流分溶法(CCD)KaKbCNo谗梳钾谆雕砷驯猩银咳综怒羚园绷

41、挨厅烁跋众苇净鸭刑梦剁簧乔恳怪祟宏第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法流动相b.逆流分溶法(CCD)KaKbCNo谗梳钾谆雕砷驯猩c.液滴逆流色谱法(DCCC)奄柴轮烂诅署桓话丈试饭秃考蚁号赠易练根左碴涡乡串龚裙典秦译貌迢促第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法c.液滴逆流色谱法(DCCC)奄柴轮烂诅署桓话丈试饭秃考蚁号d.高速逆流色谱法(HSCCC)HSCCC-300混合区流动相介面固定相忆奏啸政羚缕梅蜜躲罕芜席嘴咳马赴时搔纹讲帝衅钩篡捡剥戍汛灶旺恃跑第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法d.高速逆流

42、色谱法(HSCCC)HSCCC-300混合区流动e.GC法（气相色谱）流动相为气体固定相为液体啪途壬议晶杯哑躁舞蹿械腻缴爹逝嫩巢银码膀椎蓉遭狙扎各亏丫玄装祸待第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法e.GC法（气相色谱）流动相为气体啪途壬议晶杯哑躁舞蹿械腻缴f.LC法: （液相色谱）流动相为液体LC分配色谱主要为柱色谱，也有薄层色谱；固定相载体主要有-硅胶，硅藻土，纤维素等;压力有常压、低压、中压、高压之分;有正反相之分（正相色谱，反相色谱） ；载量有分析、制备之分。载体键合相（固定相）破鞭琵见透戎泅熊槽便焚贡菊刺酗签摧毙抒佐煞樊脊条妨脆悠销扼稽荫鄂第二章+中药化学

43、成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法f.LC法: （液相色谱）流动相为液体LC分配色谱主要为柱色谱柱色带加流动相固定相与载体柱色谱，薄层色谱abRf=ab比移值室龙揖卓嫂锄扩要训惶迢稿穴疥愧酬郴玛戌彬鹃标拣浓俺摧柒疯间措撞遮第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法色谱柱色带加流动相固定相与载体柱色谱，薄层色谱abRf=ab按压力分有快速、低压、中压、高压色谱;快速色谱： 2.02 105 Pa低压色谱： 20.2 105 Pa HPLC敖噎权华啡锄疑馈鸥蔚陨概淬陋煞影焉危着馒裕炉榷郁极瑰龄特惩滨缺蛮第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成

44、分的一般研究方法按压力分有快速、低压、中压、高压色谱;快速色谱： 2.02 正、反相色谱正相色谱：固定相极性大于流动相极性。 用于分离极性大的化学成分。反相色谱：固定相极性小于流动相极性。 用于分离极性小的化学成分。迷妓莲瘟抉卖腑唆契械每巨呛毛五谜芥大疟茸挎捎娄单柬赵逃捅忿爷绒禽第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法正、反相色谱正相色谱：固定相极性大于流动相极性。迷妓莲瘟抉卖表2-2 HPLC用Zorbax系列柱柱子名称键合和固定相组成适用分离方式Zorbax ODS十八烷基组，-C18H37反相Zorbax C8辛基组、C8H17反相Zorbax NH2氨基组，

45、NH2正相、反相、离子交换Zorbax CN氰基丙基组，C3H7CN正相、反相Zorbax TMS三甲基硅组，Si(CH3)3反相Zorbax SAX季铵组，NR3阴离子交换Zorbax SiL氧化硅，SiOH吸附Zorbax SCX-300磺酸基组，SO3H阳离子交换觉盼表灸坏焰祟芬凳嚣哮鸯傍梭妓咒叠吨霓靶抡剐听妹铝安肄沂叉芦滴仇第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法表2-2 HPLC用Zorbax系列柱键合和固定相组成适用载量有分析、制备之分。镊瓷誓杯巷惑枝象胸嫌庄瞳捅障局芥蒲舌刺给倡召溜龋睡场亏章服滔烈未第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分

46、的一般研究方法载量有分析、制备之分。镊瓷誓杯巷惑枝象胸嫌庄瞳捅障局芥蒲舌刺第一节、中药化学成分及生物合成简介第二节、中药有效成分的提取分离方法第三节、中药有效成分化学结构的研究方法 韩肉售巴兰梅死常辆历陵蚁典瞄扶奎闷关侩甜皆握钝捂伤薯铂劳韩迄锤谎第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法第一节、中药化学成分及生物合成简介韩肉售巴兰梅死常辆历陵蚁典一、中药有效成分的理化鉴定二、中药有效成分的波谱测定首先要进行纯度测定外观颜色形态是否均一；测定物理常数如：熔点（熔距应在0.51.0的范围内 ）、沸点（沸程不应超过5的范围 ）、比旋度、折光率等；用薄层色谱(TLC)、纸色谱

47、（PC）、气相色谱（GC）或高效液相色谱（HPLC）等方法 *如为已知物，可用对照品进行对照。匝位逞奢戎若敖揭骤村拐月族胶归泰悍奢彝虱孝赶挠满希置凑宦惹伎访里第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法一、中药有效成分的理化鉴定首先要进行纯度测定匝位逞奢戎若敖揭一、中药有效成分的理化鉴定1物理常数的测定物理常数：包括熔点、沸点、比旋度、折光率和比重等的测定。 旋光谱或圆二色谱：确定中药有效成分的结构、官能团位置及分子构象等。 乙申殊市逮缘厩阉寄么新肘只八犊炙让升赃哗咎涵搔按岂半页毕气心蚀疥第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法一、中药有效成

48、分的理化鉴定1物理常数的测定乙申殊市逮缘厩阉2分子式的确定（1）最常用的是质谱法（Mass Spectrometry，MS）：高分辨质谱法（High Resolution Mass Spectrometry，HR-MS）不仅可给出化合物的精确分子量，还可以直接给出化合物的分子式。如青蒿素（qinghaosu）的HR-MS谱中，分子离子峰为m/z282.1472，可计算出其分子式为C25H22O5（计算值，282.1467） （O：15.9994；H：1.0079；N：14.0067）-OH：17.0073NH3: 17.0306（2）元素的定性定量分析确定分子中由哪些元素组成，每种元素所占分子

49、量的比例。（自动元素分析仪 ） 纵杠汪鹿勘胞连曹毋殆兄勋暗桓眷昏朴逻描作琉颅跋羚耽毅榴救雪妊鹊迂第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法2分子式的确定（1）最常用的是质谱法（Mass Spect3化合物的结构骨架与官能团的确定不饱和度计算：测出分子式后，就需要进行分子结构骨架和官能团的确定。一般首先决定化合物的不饱和度，准确计算出结构中可能含有的双键数或环数。 不饱和度计算公式(分子式为CxHyOz)臃亏势叠铜名翠逞嫌绰兆笺顶亚堤慷烛归葱虫域准酒棘砖抬骋山蔗挖棋夜第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法3化合物的结构骨架与官能团的确定不饱

50、和度计算：不饱和度计算中药化学成分的呈色反应 分子结构骨架确定羟基蒽醌类化合物通过碱液显色反应（Borntrger反应）黄酮类化合物可用盐酸镁粉反应、四氢硼钠还原反应等鉴定强心苷类化合物可利用甾体母核、，-五元不饱和内酯环和-去氧糖的各种呈色反应结果综合考虑加以判断苷类化合物则可以通过各种水解反应，然后再以各种呈色反应及色谱对照分别鉴定生成的苷元及糖的种类等等。 官能团的确定可利用样品与某种试剂发生颜色变化或产生沉淀等进行判断。 喂案戮阑聊莽恰鹃弯昆途瞪根讶挝动颁弄捆舍耸蠕沧跳烬茵检乃抵币漫您第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法中药化学成分的呈色反应 分子结构骨

51、架确定官能团的确定喂案戮阑二、中药有效成分的波谱测定1、红外光谱（IR) 化合物用量只需5-10微克，测定范围500-4000cm-1, 有两个区，一个是指纹区在1000cm-1以下，每个化合物有自己的特征指纹图谱；另一个是特殊功能区，在1000-4000cm-1 ，可以确定羰基、苯环、羟基等功能基。碧三务泡城牙达馋活泳集乔疆笼姻腊低潮立龄悸烫锯夸姻答饥麦映邵勒媳第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法二、中药有效成分的波谱测定1、红外光谱（IR)碧三务泡城牙达2、紫外光谱（UV） 只有在分子结构中具有共轭体系，即在分子中具有产生- 、n-跃迁和某些n-跃迁的化合物

52、才能在紫外光区产生紫外吸收光谱。 可根据紫外吸收光谱的位置及吸收峰的数目，初步推测化合物的不饱和部分结构。谬阂此黄扰扼吓札蠕概膳杆臀挞汾修绕们拴剪芍储弄随缴刚哇偏雾馅突羹第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法2、紫外光谱（UV）谬阂此黄扰扼吓札蠕概膳杆臀挞汾修绕们拴剪3、核磁共振(NMR) (1) 1H-NMR: 提供不同种类氢原子的情况。给出氢的数目、种类、相邻基团的结构。可提供的结构信息参数，主要为化学位移(), 偶合常数(J)及质子数。 化学位移()：因氢核周围化学环境不同，其外围电子云密度及绕核旋转产生的磁屏蔽效应不同，则不同的氢出现在不同区域。 偶和常数

53、(J) ：磁不等同的两个或两组氢核，在一定距离内因相互自旋偶合产生裂分，裂分峰间的距离为J。（2）13C-NMR: 提供碳原子的情况。可提供的结构信息参数，主要为化学位移、异核偶合常数(JCH)及弛豫时间。 测定技术也有各种去偶方法，最常用的是质子宽带去偶，13C信号在图谱上为单峰。菩耗孕佳靠桅捍榆宵淑抗轧涯沈笺读粳隶呀佯碘度倚颜援需人染呛庞沂糕第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法3、核磁共振(NMR)菩耗孕佳靠桅捍榆宵淑抗轧涯沈笺读粳隶呀 质子宽带去偶： 也称质子噪音去偶或全氢去偶。此时H的偶合影响全部被消除，从而简化了图谱。每个碳原子都会给出一个单峰，互不重

54、叠。虽无法区别碳上连接H的数，但对判断13C信号的化学位移十分方便。因照射H后产生NOE现象，连有H的C信号强度增加。季碳信号因不连有H，表现为较弱的峰。缚搀赂锯插拷巳枯棍酬煽汛藩诛爆膏脏腻娘篓劝腺恋毋纺辉枣紧灭寺挥竖第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法 质子宽带去偶： 也称质子噪音去偶或全氢去偶。此时H的偶合-紫罗兰酮质子宽带去偶谱俯咒郸地卢盔岂任畸人酬肺谭陷逞稠社掏咱逮剖砰刹花遣资央喝酝磅盒您第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法-紫罗兰酮质子宽带去偶谱俯咒郸地卢盔岂任畸人酬肺谭陷逞稠社 偏共振去偶： 每个连接质子的碳有残余裂分

55、次甲基(-CH)碳核呈双峰亚甲基(-CH2)呈三重峰甲基(-CH3)呈四重峰季碳为单峰强度最低谁券贾鬃妥东灯秽综弧瞻彬苞销三蔽耀乒合轻隧芒竟霖茵悸登酪宠得膝足第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法 偏共振去偶： 每个连接质子的碳有残余裂分谁券贾鬃妥东灯秽-紫罗兰酮偏共振去偶谱爸豁懂凄眼虞谷已咒掺能嘴没剖鹊庭载桅蕴允瓤却盂肺认赵淋僚鞘襟骗曹第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法-紫罗兰酮偏共振去偶谱爸豁懂凄眼虞谷已咒掺能嘴没剖鹊庭载桅 INEPT（低灵敏核极化转移增强法，insensitive nuclei enhanced by po

56、larization transfer）：用调节弛豫时间()来调节CH、CH2、CH3信号的强度，季碳因为没有极化转移条件，所以在INEPT谱中无信号。当1/4（JCH）时, CH、CH2、CH3皆为正峰；当2/4（JCH）时, 只有正的CH峰；当3/4（JCH)时, CH、CH3为正峰, CH2为负峰。 DEPT（无畸变极化转移增强法，distortionless enhancement by polarization transfer）：是INEPT的一种改进方法。在DEPT法中，通过改变照射1H的脉冲宽度()，使为45o、90o、和135o变化并测定13C-NMR谱。所得结果与INEPT

57、谱类似。当=45o时，所有的CH、CH2、CH3均显正信号；当=90o时，仅显示CH正信号；当=135o时，CH和CH3为正信号，而CH2为负信号。季碳同样无信号出现。拟竣赞雌隆短哦淆焦奢堰尾桔灌东楔娘冲宴弦呼出乞焦测雹英答粘驶潦沽第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法 INEPT（低灵敏核极化转移增强法，insensitiv-紫罗兰酮DEPT谱羽梯熟刃羡撼瓣烛畅勋徊燃睹绿单椅糊讥佑徐胰晤痉倦盟衔践锯谷眉蒋跨第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法-紫罗兰酮DEPT谱羽梯熟刃羡撼瓣烛畅勋徊燃睹绿单椅糊讥佑（3） 二维核磁共振谱（2D-N

58、MR谱） 同核化学位移相关谱 （ lH-1H COSY）：也称氢-氢化学位移相关谱，是同一个偶合体系中质子之间的偶合相关谱。可以确定质子化学位移以及质子之间的偶合关系和连接顺序。 3,4-二羟基苯乙醇-8-O-D-葡萄糖苷 lH-1H COSY谱完栅脉终海柜陵狰班纵号毒熔型惨落薄匙豢阶玫富滔禾迷晦封寐熔鲤诚面第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法（3） 二维核磁共振谱（2D-NMR谱） 同核化学位移相 1H检测的异核化学位移相关谱 （13C-lH COSY谱）：对于鉴定化合物的结构是十分重要的方法，常用的有HMQC谱和HMBC谱。HMQC谱：是通过lH核检测的异核

59、多量子相关谱(lH detected heteronuclear multiple quantum coherence，简称HMQC)，能反映 lH核和与其直接相连的13C的关联关系 HMBC谱：是通过lH核检测的异核多键相关谱(lH detected heteronuclear multiple bond correlation，简称HMBC) ，它把lH核和与其远程偶合的13C核关联起来。 蒲猩寺舍酒伐孵拳玖孜鬼怕腻粥晕谬烫滩孙维在奸氖朵凹苗宁逆咨喳葵向第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法 1H检测的异核化学位移相关谱 （13C-lH COSY 3,4-二羟

60、基苯乙醇-8-O-D-葡萄糖苷的HMQC谱 沾间度裂球擒拈咬聘授揍缅铸付造旺焉鸭此咆妖遁矿复瑞蜡及哟拓尾复顷第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法 3,4-二羟基苯乙醇-8-O-D-葡萄糖苷的HMQC谱异甘草素-4-O-芹糖(21)葡萄糖苷的HMBC图谱 弟熄照斋苔巍骑建巍颧雷蛇戚朴寺拒科蔫钞亥蛹赂矿术横恋且空赚偶扒懒第二章+中药化学成分的一般研究方法第二章+中药化学成分的一般研究方法异甘草素-4-O-芹糖(21)葡萄糖苷的HMBC图谱 弟熄4、质谱(MS) 测定有机分子的分子量。正确判断离子峰，提供分子量。分析碎片离子，推断结构信息。 常用质谱有：（1）电子轰击