《微生物的实验室培养》教案分析

1、微生物的实验室培养教案分析微生物的实验室培养教案分析培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。培养基按照物理性质可分为液体培养基 半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化

2、学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。培养基的化学成分包括 水 、 无机盐 、 碳源 、 氮源 （生长因子）等。碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能

3、作为碳源。氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件无菌技术获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：对实验操作的空间、操作者的.衣着和手，进行清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。为避免周围环境中微生物的污

4、染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：接种环、接种针、试管口等使用灼

5、烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱 ；培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯 。倒平板操作的讨论1.培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？提示：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止培养基表面的水分过度地挥发，又可以

6、防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。（2）平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。（3）稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养

7、。分为系列稀释操作和涂布平板操作两步。（4）用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。（5）平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。在火焰旁冷却接种环，并打开棉塞。将试管口通过火焰。将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。将试管通过火焰，并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一

8、区相连。将平板倒置放入培养箱中培养。平板划线操作的讨论1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？答：以免接种环温度太高，杀死菌种。3.在作第二次

9、以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。（6）涂布平板操作的步骤：将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。取少量菌液，滴加到培养基表面。将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布平板操作的讨论涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？提示：应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合

10、适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；等等。菌种的保存（1）对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。临时保藏方法将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4的冰箱中保藏。以后每36个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。（2）对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3L的甘油瓶中，装入1L甘油后灭菌。将1L培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20的冷冻箱中保存。疑难解答（1）生物的营养营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。营养物质是指维持机体

11、生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。人及动物的营养物质：水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类。植物的营养物质：矿质元素、水、二氧化碳等三类。微生物的营养物质：水、无机盐、碳源、氮源及特殊营养物质五类。（2）确定培养基制作是否合格的方法将未接种的培养基在恒温箱中保温12天，无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。第1篇：发育生物学实验教案发育生物学实验教案实验一模式生物蛙、海胆胚胎发育各阶段切片观察一、实验目的了解模式生物发育过程中的形态变化。二、实验原理在多种动物中，胚胎发育经历受精、桑椹胚、囊胚、原肠时期、神经时期，不同时期具有不同的特点，在发育中其形态和构造经历明

12、显的阶段性变化。三、试剂与材料 1.实验试剂香柏油、显微镜 2.实验材料模式生物切片、装片（蛙、海胆）四、实验步骤观察模式生物发育各时期的胚胎形状变化。五、实验作业记录形态学变化。实验二模式生物鲫鱼、鸡胚胎发育各阶段切片观察一、实验目的了解模式生物发育过程中的形态变化。二、实验原理在多种动物中，胚胎发育经历受精、桑椹胚、囊胚、原肠时期、神经时期，不同时期具有不同的特点，在发育中其形态和构造经历明显的阶段性变化。三、试剂与材料 1.实验试剂香柏油、显微镜 2.实验材料模式生物切片、装片（鲫鱼、鸡）四、实验步骤观察模式生物发育各时期的胚胎形状变化。五、实验作业记录形态学变化。实验三两栖类变态过程的

13、观察一、实验目的了解两栖类动物变态过程中的形态变化。二、实验原理在多种动物中，胚胎发育经历一个幼虫期，幼虫具有与成体非常不同的特点，在发育中其形态和构造经历明显的阶段性变化，其中有一些器官退化消失，有些得到改造，有些新生出来，从而结束幼虫期，建成成体结构，这种现象统称为变态。三、试剂与材料 1.实验试剂何尔夫列他溶液（氧化钠0.35g，氯化钾0.005g，二氯化钙0.01g，碳酸氢钠0.02g，蒸馏水100mL） 2.实验材料蛙的蝌蚪四、实验步骤人工饲养青蛙，观察其变态过程中的形态变化。五、实验作业记录蛙变态过程中的形态学变化。附 蛙的饲养方法卵和蝌蚪的培养最好用洁净的自来水，并加上稀释5-6

14、倍的何尔夫列他液（氧化钠0.35g，氯化钾0.005g，二氯化钙0.01g，碳酸氢钠0.02g，蒸馏水100mL），这样可以增加胚胎和蝌蚪发育所必需的钠、钙、钾离子。培养水要多而清洁，否则会因缺氧而致死。蝌蚪主要吃植物性饲料，如水藻等。煮过的菠菜和莴苣是最适宜的食物，但投喂时不宜煮得太熟，并注意除去纤维。初次投食量要小，以后可不断增加。每天定时定量投喂，不宜过多，以防残渣腐败，造成水体污染。若用缸、盆培养，或水体较小，一般3-5d换一次水较好。当蝌蚪发育成带有短尾的幼体开始用肺呼吸时，若用池塘培养，水中必须放些水草，或小木条，以供其登陆用。若为缸、盆培养，水里可放一些泡沫塑料。成体主要吃昆虫之

15、类的动物性食物，以直翅目、鞘翅目、膜翅目、蜻蜓目为最多，其次为双翅目、脉翅目、半翅目等昆虫。有时也食蛛形动物、蚯蚓，甚至也以谷粒、鱼苗或蝌蚪及小蛙为食。实验四鸟类胚胎发育的观察一、实验目的熟悉鸟类胚胎发育的过程。二、实验原理鸟类胚胎发育是典型的体外发育，利用人工孵化的家禽，可以方便观察其发育过程。 鸡胚胎发育可分为两个阶段：成蛋阶段和成雏阶段。 （1）胚胎在卵形成过程中的发育即母体内的发育，也即是成蛋阶段的发育。这个阶段的发育过程是，受精卵+卵裂+囊胚期+原肠期。当胚胎发育到原肠期时，已分化形成上胚层和下胚层，从外观上看形如一个圆盘状体即为胚盘，当卵排出体外，因温度下降，胚胎生长发育随即停止。

16、 （2）胚胎在孵化过程中的发育卵排出体外后，保存在18以下的环境中，胚胎发育基本处于静止状态。当人孵后，胚胎即开始发育。胚胎在孵化过程中发育的时期称孵化期。鸡的孵化期为21天。种蛋人孵后，胚胎在原肠期形成的同时，上胚层像个碟状圆盘，在其末端，细胞不断地向中线集中，形成一条细胞带，称原条。原条细胞通过原沟的底部逐渐转人上胚层与下胚层之间，并分别向两侧扩展，这些迁移至上下胚层之间的细胞称为中胚层。原条细胞也逐渐转人上胚层与内胚层之间，并分别向前伸展，伸展的结构称为头突，后发育成脊索。脊索是胚胎期的纵轴支持器官，最终为脊柱所代替，随着胚胎的不断发育，由外、中、内三个胚层逐渐形成各种腺体、器官、骨骼、

17、肌肉、皮肤、羽毛和喙，最后形成新的机体雏鸡。三、试剂与材料鸡的种蛋四、实验步骤1.观察比较种蛋（受精）与非种蛋（未受精）内部结构的差异。 2.观看教学片，熟悉鸡的胚胎发育过程。 2.人工孵化种蛋，记录鸡的孵化进程及特征。五、实验作业拍照记录鸡孵化进程中的特征变化。附1.鸡胚发育进程及特征1胚龄：蛋黄表面有一颗颜色稍深，四周稍亮的圆点，俗称“鱼眼珠”或白光珠。 2胚龄：可看到卵黄囊血管区，其形状很象樱桃形，故俗称为为“樱桃珠”。 3胚龄：卵黄囊血管的形状象静止的蚊子，俗称“蚊虫珠”。卵黄颜色稍深的下部似月牙状，俗称“月牙”。4胚龄：蛋转动时，卵黄不易跟随着转动，俗称为“钉壳”。 5胚龄：明显看到

18、黑色的眼点，谷称“起珠”、“单珠”、“起眼”（若为5天整，还可见到些羊水）。6胚龄：胚胎形似“电话筒”，一端是头部，另一端为弯增大的躯干部，俗称“双珠”。可以看到羊毛。7胚龄：白茫茫的羊水增多，胚胎活动尚不强，胚胎在羊水中不易看清，似沉在羊水中，俗称“沉”。正面已布满扩大的卵黄和血管。8胚龄：胚胎较易看到，象在羊水中浮游一样，俗称“浮”。从背面看，卵黄已扩大到背面，蛋转动时二边卵黄不易晃动，俗称为“边口发硬”。 9胚龄：蛋转动时，二边卵黄容易晃动，背面尿囊血管迅速伸展越出卵黄，故俗称为“发边”。 10胚龄：尿囊血管继续伸展，在蛋的小头合拢，整个蛋除气室外都布满了血管，俗称为“合拢”、“长足”。

19、11胚龄：血管开始加粗，血管颜色开始加深，解剖背部出现绒毛，腺胃明显可辨。 12胚龄：血管加粗、颜色逐渐加深。解剖身躯覆盖绒毛。13胚龄：主要观察小头发亮的部分随着胚龄的增长而逐日缩小。头部和身体大部分覆盖绒毛，跖、趾出现角质鳞片原基。14胚龄：小头发亮的部分随着胚龄增长而逐日缩小，蛋内黑影部分随着胚龄增长而加大，胚胎全身覆盖绒毛，头向气室，胚胎开始改变横着的位置，逐渐与蛋长轴平行。15胚龄：蛋内黑影部分增大。解剖观察，翅已完全成形，跖、趾的鳞片开始形成，眼脸闭合。体内外的器官大体上部形成了。16胚龄：黑影继续燕大，解剖冠和肉髯明显，绝大部分蛋自己进入羊膜腔。 17胚龄：以小头对准光源，再看不

20、到发亮的部分，俗称“封门”。躯干增大，脚、翅、颈变大、眼、头日益显小，两腿紧抢头部。喙向气室。18胚龄：气室向一方倾斜，这是胚胎转身的缘故，俗称为“斜口”、“转身”。解剖头弯曲在右翼下，眼开始睁开。19胚龄：喙进气室，开始呼吸，颈、翅突入气室，头埋右翼下，两腿弯曲朝头部，呈抢头姿势，以便于破壳时挣扎。雏胚开始啄壳，可闻雏鸣叫。照蛋时，可见气室有翅膀、喙、颈部的黑影闪动，俗称“闪毛”。20胚龄：起初是胚胎喙部穿破壳膜，伸入气室内，称为“起嘴”；接着开始啄壳，称“见嘌”、“啄壳”。20.5-21胚龄：出壳。 2.鸡的人工孵化鸡属鸟类，鸟类与哺乳动物胚胎发育不同，受精卵（种蛋）排出母体后完全依赖外界

21、环境条件继续发育。第1-4天为内部器官发育阶段；5-14天为外部器官形成阶段；15-19天为胚胎生长阶段；20-21天为出壳阶段。在整个孵化过程中，温度，湿度，通风换气与翻蛋等外界条件将是保证胚胎正常发育，并使孵化获得成功的关键因素。 （1）温度：温度是孵化过程的首要条件，发育中的鸡胚对温度最敏感，只有在适宜的温度下，才能保证鸡胚的正常生长发育和物质代谢。所以正确地掌握孵化温度是提高孵化率的关键。在1-18天中孵化的最适温度是37.5C-38.6C；19-21天则应稍低于此温度是36.1C-37.5C。如果温度过高胚胎发育迅速，孵化期缩短，胚胎死亡增加。温度过低则会延长种蛋的孵化时间，同时胚胎

22、发育迟缓并带来死亡。 （2）湿度：水是温度的良导体，空气中的湿度对鸡胚胎发育有很大作用。一般要求1-18天相对湿度40%-60%；19-21天相对湿度65%-75%。若湿度过高会妨碍蛋内水分蒸发，使胚胎发育所产生的大量代谢水不能及时排出，严重时可导致胚胎畸形。若湿度过低，将加速蛋内水分蒸发，造成失水过多，阻碍代谢废物的排出及所需氧气的摄入。易引起胚胎和壳膜粘连。 （3）通风换气：通风换气的主要目的是帮助胚蛋中的胚胎与外界进行气体交换和热能交换，同时调节机内的温度。胚胎发育过程中需要不断的吸入氧气，排出二氧化碳气和水分。孵化初期，胚胎需要少量氧气可通过酶的作用从蛋黄中获得，而后利用气室的空气，再

23、后则利用尿囊循环与蛋壳上的气孔同外界进行气体交换，19天后胚胎开始用肺呼吸。随着胚龄的增加，胚胎的气体交换量也不断增加。因此除胚胎发育初期外，胚胎的气体交换都是由通风换气解决。通风换气还与温度、湿度有密切的关系。通风良好时，空气能充分流通还能与外界不断的进行热能交换。温度、相对湿度都可保证。 （4）翻蛋：翻蛋的主要作用是改变胚胎方位，促进羊膜运动，防止胚胎、蛋黄、蛋白与蛋壳之间粘连。胚蛋放置位置必须适当，在1-18天进行定时翻蛋，每2小时翻蛋一次，翻蛋角度以90度为宜。种蛋孵化到18天时，将种蛋移到出雏盘上叫落盘。这时胚胎发育完成，在20-21天时开始出壳。出壳时胚胎已经完全长成雏鸡。这时雏鸡

24、的头位于气室中（即鸡蛋的大头部分），健壮的雏鸡先把蛋壳啄开一个小孔，然后慢慢的将小孔向两侧扩大，直至破壳到一半以上时，雏鸡的头便可脱壳而出，而后身体也逐渐自行挣脱出来。1胚龄2胚龄3胚龄4胚龄5胚龄6胚龄7胚龄8胚龄9胚龄10胚龄11胚龄12胚龄13胚龄14胚龄15胚龄16胚龄17胚龄18胚龄19胚龄20胚龄20.5胚龄替补实验实验五精子形态观察及体外获能实验一、实验目的1.熟悉哺乳类精子的形态结构。 2.了解精子体外获能的方法。二、实验原理哺乳动物的精子离开精巢后并没有受精能力，必须要经过成熟和获能才能使卵子受精。精子在附睾中成熟。成熟过程中，在附睾中多种物质的作用下，精子质膜的脂类、糖蛋白

25、、唾液酸、吸收抗原、表面ATP酶等许多成分发生变化，负电荷增加，与凝集素的结合力也发生改变。精子射出后，经阴道和子宫到达输卵管，在壶腹部与卵子结合，完成受精。张明觉、Austin 1951年发现兔子和大白鼠直接排出的精子不能使卵受精，必须在生殖道中停留一段时间后才具备受精能力，这一现象称为精子的获能。后来研究发现，精子在体外也能完成获能，卵泡液、输卵管分泌物、血清、房水等多种液体都可使精子获能，pH、Ca2+浓度等环境条件对获能也有影响。精子在获能过程中发生一系列的形态及生理生化的变化，呼吸明显加强，运动形态和速度也发生很大变化，由直线前进变为曲线运动。体外获能一般分为两步：一是精子的洗涤，经

26、1次或多次离心后除去杂质、死精子、低活力精子、冻精保护液及稀释液等；二是精子的获能处理，主要是使用高离子强度液（His）、钙离子载体、肝素等，以促进钙离子进入精子顶体并刺激精子内部pH升高，从而诱发精子获能。三、试剂与材料 1.实验试剂雄性小鼠四、实验步骤1.断颈处死雄性小鼠。五、实验作业观察比较精子在获能前后运动形态和速度的变化。实验六植物组织培养一、实验目的了解植物细胞全能性。二、实验原理生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成完整个体所必需的全部基因。三、试剂与材料 1.实验试剂MS培养基、无菌水，升汞、酒精、次氯酸 2.实验材料银杏枝叶四、实验步骤（一) 培养基

27、的配制 1.母液配制 母液分大量元素、微量元素、铁盐及有机物质四 类。 2.培养基的配制与分装 3.培养基的灭菌( 二 ) 取材、消毒与接种（1）先将剪下的枝条清洗干净，选择新鲜的花柄、嫩梢和带腋芽的茎段作为外植体，将外植体放在自来水下冲洗12h,以冲洗掉大的土壤颗粒。（2）将清洗干净的外植体移入无菌操作台进行消毒，先用75%酒精表面消毒30S，再用0.1%新洁尔灭处理15min。消毒后用无菌水冲洗45次。（3）将消毒后的外植体放入消毒过的培养皿上，在无菌条件下切成0.40.5 cm长的小段单芽，用无菌滤纸吸干水，立即接种到加有不同激素浓度的MS培养基上，每个培养基接种三个芽，并用封口膜封好。

28、 ( 三 ) 外植体的培养接种后的外植体放入用75%酒精消毒后的干净的光照培养箱中，培养条件为：温度27，光照周期为光照12h/d+黑暗12h/d，培养基的pH值为5.8，进行培养与愈伤组织的诱导。全部接种工作都是在严格无菌条件下进行的 , 所以要特别认真、仔细、以防杂菌污染。( 四 ) 两周后观察愈伤组织的诱导并进行生根生芽诱导五、实验作业1.观察植物组织培养的培养物在培养中的生长情况。2观察植物组织培养的培养物有无污染，分析原因？3.以MS为例，试说明MS培养基中各成分各有何作用。实验七植物生长调节剂对果实发育的影响一、实验目的1.了解2,4-D、萘乙酸对无籽果实形成的诱导作用。 2.了解

29、乙烯对果实的催熟作用。二、实验原理植物生长调节剂2,4-D、萘乙酸（NAA）等，在适当的浓度下能诱导无籽果实形成。适当浓度的乙烯利能促进果实成熟。三、试剂与材料 1.实验试剂20mg/L2,4-D（用少许1 mmol/L NaOH溶解2,4-D，再用蒸馏水定容），500mg/L NAA（用热水或少量95%乙醇溶解NAA，再用蒸馏水定容），40%乙烯利 2.实验材料盆栽番茄、辣椒幼苗，香蕉（或大蕉、柿子、芒果等）四、实验步骤1.无籽果实的诱导形成 （1）2,4-D诱导无籽果实在番茄开花授粉前用2-3滴20mg/L 2,4-D溶液涂在花上，以水处理作对照。果实成熟时，观察果实内籽粒的有无。 （2）

30、NAA诱导无籽果实在辣椒开花初期，用2-3滴500mg/L NAA溶液滴在花朵上（或喷花），以水处理作对照。果实成熟时，检查是否有籽。 2.乙烯利对果实的催熟作用将采收后的香蕉（或大蕉、柿子、芒果等）用500mg/L乙烯利溶液浸泡5s，以蒸馏水浸泡作对照，取出果实分别放在箩筐或纸箱内，室温保存。5-10d之内，观察结果。比较果皮的颜色和果实的成熟度五、注意事项1.用植物生长调节剂处理材料的时期一定要把握好。2.可尝试使用不同的激素浓度，筛选出激素的最适作用浓度。六、实验作业拍照记录实验结果（包括对照）并进行分析。第2篇：1普通生物学实验教案实验一：线粒体和液泡系的超活染色与观察【课前预习】1什

31、么是液泡系？2为什么不能用一种活体染料同时观察多种细胞器？【目的要求】1.观察动植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、发育和分布 2.了解细胞和细胞器的超活染色技术【基本原理】线粒体是细胞内一种重要细胞器，细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B（Janus green B）是线粒体的专一性活细胞染色剂，毒性很小，属于碱性染料，解离后带正电，由电性吸引堆积在线粒体膜上。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，从而使线粒体显色，而在周围的细胞质中染料被还原

32、，成为无色状态。细胞中的线粒体呈蓝绿色的颗粒。中性红对液泡系的染色具有专一性，将活细胞中的液泡系染成红色。【实验用品】1.器材：显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸2.试剂：Ringer 液、1/5000 詹纳斯绿B、1/3000 中性红3.材料：人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞、小麦（或绿豆）幼根根尖【方法步骤】1线粒体的超活染色与观察1）口腔上皮细胞线粒体的超活染色：1/5000 詹纳斯绿B1-2 滴，口腔上皮细胞（牙签刮取），载玻片于37恒温染色10-15min，显微镜下观察。2）洋葱鳞茎内表皮细胞线粒体的超活染色与观察：1/5000 詹纳斯绿B

33、溶液1-2 滴，洋葱鳞茎内表皮，载玻片于37恒温水浴染色10-15min，显微镜下观察。 2小麦（或绿豆）幼根根尖液泡系的中性红染色观察小麦（或绿豆）幼苗根尖（1-2cm）纵切面切片，1/3000 中性红溶液1 滴染色5-10min，载玻片于37恒温水浴，盖上盖玻片压扁根尖，显微镜下观察。 【实验结果】口腔上皮细胞的线粒体分布 洋葱内表皮细胞线粒体分布 植物根尖液泡的中性红染色【实验报告】1绘出人口腔上皮细胞示线粒体的形态与分布并简要分析。 2绘出绿豆幼根根尖组织液泡系的形态与分布并简要分析 。实验二 人类细胞中巴氏小体的观察【课前预习】什么叫巴氏小体? 【目的要求】1了解X染色体失活假设及剂

34、量补偿效应的机制； 2学习人类性染色质的检查方法。【基本原理】巴氏小体(Barr小体)又称X小体：M.l.Barr 等首先发现雌猫的神经细胞间期核中有一个深染的小体，而雄猫没有，故称巴氏小体；由于这个小体与性别及X染色体数目有关，故称X小体（X染色质）。正常女性的两条X染色体在间期一条保持代谢活性，与常染色体一起进行正常活动，另一条DNA复制较晚，呈异固缩状态，没活性，形成X染色质。该失活的染色体在形态学上呈异染色体（即DNA螺旋压的很紧），染色深而致密，呈现三角或椭圆形小体，紧贴核膜内缘，大小约11.5 m，数量为x染色体数减一（特例XXY,XXX核型）。失活的染色体是随机的，失活状态使得雌

35、性个体两个染色质所携带的两份基因的遗传效应与雄性个体一个X染色体所具有的一份基因的遗传效应基本相当，达到一种剂量补偿效应，是维持雌雄两性生物基因表达一致所特有的遗传效应。【实验用品】1材料：口腔粘膜细胞 2器材和仪器：显微镜; 3试剂：固定液（甲醇:冰醋酸3:1）; 改良的苯酚品红（或1%硫堇）染液等。【方法步骤】 1.取材口腔粘膜细胞：受检者清水漱口数次，用洁净牙签从女性口腔两侧刮取粘膜，原位刮23次，第一次舍去，第2，3次分别涂于干净载玻片上，将刮取物在载玻片上涂片，晾干。2.固定将制片置于新配置的甲醇:冰醋酸固定液（3:1）中20min；往载玻片依次滴加95，70，50乙醇及蒸馏水，每次

36、23 min；滴加5mol/l盐酸水解约5s；蒸馏水（缓水流）漂洗23次，每次1015 s。3.染色、制片在染色缸中染色1020min（勿干），细水洗去染液，晾干即可镜检。4.镜检（油镜观察）观察与计数（1）形态（2）计数：选择核较大，核质颗粒少，染色均匀清晰、核膜完整的细胞核进行计数，每份标本至少计数50个细胞中X染色质出现得概率。 临床指标：正常值男性为03%，女性为20%以上。【实验结果】【注意事项】 漱口要干净，在镜检前要洗净载玻片、盖玻片以及显微镜镜头。【实验报告】1绘制巴氏小体的形态。 2统计巴氏小体出现的概率。实验三 减数分裂染色体行为的分析【课前预习】1减数分裂各时期的形态学特

37、点是什么？【目的要求】1 熟悉减数分裂各时期的形态学特点，加深对减数分裂遗传学意义的认识; 2 学习减数分裂制片方法,了解动植物生殖细胞的形成过程。【基本原理】（一）减数分裂是一种特殊的有丝分裂形式,仅发生在有性生殖细胞(如配子:雌配子和雄配子, 卵细胞和精子)形成过程中的某个阶段.（二）减数分裂的特点: 1 连续进行两次核分裂, 染色体只复制一次, 结果形成4个核, 每个核只含有单倍体的染色体, 即染色体数目减半; 2 前期特别长, 而且变化复杂, 包括同源染色体的配对, 交换, 分离等.（三） 减数分裂的过程: 减数分裂I：同源染色体分离前期I: 持续时间较长细线期: 染色体呈细的染色线,

38、其上分布很多染色粒,形似念珠;偶线期: 同源染色体开始配对, 不易与细线期绝对分开粗线期: 同源染色体完成配对,染色体明显缩短变粗,双线期: 配对的同源染色体开始分离,染色体图像呈现纽花状中期I 各个二阶体（四分体）排列在赤道面上后期I 同源染色体分开，移向两极末期I 移动到两极的染色体解旋恢复到染色质状态 减数分裂II：姐妹染色体分离(同有丝分裂) 中间期： 时间短，因物种而异 前期II：时间短，同末期I 中期II：染色体排列在赤道面上后期II：姐妹染色体分离并移向两极末期II：移动到两极的染色体解旋恢复到染色质状态（四）植物花粉减数分裂植物花粉形成过程中，花药中某些细胞分化成小孢子母细胞(

39、2n)，每个小孢子母细胞(2n)减数分裂后，产生4个小孢子（单核花粉，n，单倍体）【实验用品】1材料：蚕豆花蕾(2n=12) 2器材和仪器：显微镜、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、量筒、滴瓶、切片架、切片盒、15cm培养皿、小培养皿、广口瓶、吸水纸。3试剂：甲醇、冰醋酸、95%乙醇、无水乙醇、树胶、改良苯酚品红染色液。【方法步骤】（一）取材固定 取材的时间及材料大小必须十分恰当，才能获得更多的花粉母细胞分裂相，以供观察。蚕豆现蕾后，于上午79时摘取茎顶幼小花序，将周围小叶和苞叶去掉，留长约1mm 左右的花苞，放入内装有卡诺氏固定液的广口瓶中，固定324小时，转入70%酒精中置冰箱内保存。

40、(二) 制片观察。1 剥开已固定好的花蕾取出花药，放于载玻片上；2 在花药上加一滴改良的苯酚品红染色液，染色10min，边染色边用解剖针剥开花药； 3 加上盖玻片，再把片子放在粗滤纸下，用拇指适力压下，使材料分开，并把周围的染色液吸干；4 放在显微镜下油镜观察调节光亮度低倍镜(1010)观察（粗调，细调）高倍镜(4010)观察油镜观察：在高倍镜下找到清晰的图像（确定视野），提升聚光镜，在标本中央滴一滴香柏油，使油镜（10010）镜头浸入到香柏油中，细调至看到清晰图像为止。用后复原：观察完毕，上悬镜筒，先用擦镜纸擦去镜头上的油，然后沾取少量的二甲苯镜头上的残留的油，最后用擦镜纸擦去镜头上的二甲苯

41、，后将镜体复原。【实验结果】1绘制终变期、中期I、中期II、后期I、后期II细胞图像。 【注意事项】1怎样区分各个时期？如中I、中I I，后I I、后I ？【实验报告】1 绘制终变期、中期I、中期II、后期I、后期II细胞图像。 2 减数分裂的细胞与有丝分裂的细胞有何不同？第3篇：实验生物学试题2008实验生物学期中考试试题请从下列试题中选择5道题进行回答。并写上主讲教师的名字。多答无效。1.钟杨从某个新近测序的基因组中发现了一个候选基因，需要进一步预测其功能并鉴定其是否为某个基因家族的成员。试用框图给出相关的生物信息学方法及步骤。2.王纲1.在荧光定量PC实验中，如何才能做到绝对定量？2.对

42、于绝对定量的real timePCR，有必要设内参吗？3.简述几种实验方法来确定一个作为内参的基因不会因为你的实验条件所改变。3.廖侃蛋白质A是细胞内的一个信号分子，可以结合酪氨酸磷酸化蛋白质，它有三个结构域：一个结合酪氨酸磷酸化蛋白质结构域、一个磷酸化位点结构域和一个结合蛋白质B的结构域，并且能独立表达出有功能的结构域。蛋白质A本身可以被受体酪氨酸激酶磷酸化，磷酸化的蛋白质A与蛋白质B的结合能力下降。蛋白质B也能被酪氨酸磷酸化，但其只有在A存在时才磷酸化，而A本身在任何时候都不具有激酶活性。磷酸化位点都为已知。根据以上条件提出蛋白质间相互作用以及被磷酸化调控的模型。模型不得自己增加条件，并且

43、必须符合以上所有条件。根据你的模型设计实验并加以证明。要求：1、不包括蛋白质单分子技术类的方法。2、每一个证明实验必须用两种或两种以上的不同方法加以证明（如分子筛、超离心、SDS电泳为三种不同的测量分子量的方法）。3、模型用示意图表示并附文字说明。4.肖华胜请简述基因芯片的原理及在系统生物学中的应用，并设计一个用基因芯片研究肿瘤分子分型的实验方案。5.罗振革设计实验分析蛋白 A对蛋白B在细胞内定位的影响。6.肖保国简述流式细胞仪和显微镜检查的区别，双染时荧光素选择的原则，细胞表面染色和胞浆染色的不同之处和具体操作时应该注意的事项。7.费检在进行小鼠基因剔除实验中，常用129小鼠的ES细胞和C5

44、7小鼠的囊胚，请说明有什么好处和缺点？生物实验室学生实验规则微生物学实验实验目录高中实验生物实验教学工作总结生物必修一生物对照实验的一般原则教案教学内容：阐述对照实验的五大原则：对照原则、单一变量原则、平行重复原则、科学性原则、平衡与平衡控制原则。阐明自变量、因变量、无关变量等基本概念。结合教材对实验原则进行分析。教学目的：帮助学生理解对照实验的基本原则和基本概念，培养学生的科学思维，使之对生物科学实验的方法、思路有基本认识。教学重点：对照实验的原则。教学难点：对照实验的原则。突破策略：结合生活中的常见场景及科学惯例展开，积极促进学生的主动参与。教学步骤：导入：在报纸上，我们常常可以见到减肥药

45、的广告：一张是减肥前，一张是减肥后，两张照片有明显的身材差异，以吸引读者的注意力。这里两张照片的对比就包含着一个最基本的实验思想：对照原则通过设置一个对照组，来使实验结果更具说服力。如我们所知，这类广告通常有大量虚假信息，其实验并无严格的操控，因而实验结果不够准确。如果是要我们来设计并完成实验，可以从哪些方面入手。(板书)：探究服用某药物是否会减肥。分析：对实验组(服用药物)和对照组(不服用药物)的不同处理是是否服药，这个要严格控制的因素我们称为自变量，也叫实验变量。我们要观察的结果是减肥的效果，是体重的变化。我们将之称为因变量，又叫反应变量。(板书)：自变量：是否服药;因变量：体重变化。延伸：接下来，我们需要找到实验对象。如果有两个肥胖者，那么应对他们做怎样的处理?(学生回答)一个服药，一个不服药。这两名实验对象，应该满足哪些条件?由学生讨论，归纳得出结论：体重、年龄相当，健康状况接近，工作强度相同，饮食习惯相近等。在实验过程中，年龄、体质、工作强度、饮食、生活环境都可能影响到实验结果。但却是自变量以外的因素，我们称之为无关变量。为保证体重变化只能由是否服药这一自变量引起，则实验组与对照组的