疣清颗粒质量标准研究

1、疣清颗粒质量标准研究【摘要】目的建立疣清颗粒质量控制方法。方法采用薄层色谱法对制剂中香附、白芍进展定性鉴别；对组方中有效成分黄芪甲苷用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(rp-hpl-elsd)进展定量分析。结果薄层色谱中斑点明晰,易于识别；rp-hpl-elsd法精细度、重现性良好,黄芪甲苷在1.0325.16g范围内具有较好的线性关系,平均加样回收率为99.0516%,rsd1.05%。结论在本研究根底上制定的质量标准可以控制本品的内在质量,方法是可行的。【关键词】疣清颗粒；黄芪甲苷；反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法；薄层色谱法abstrat：bjetivetestablishthequ

2、alityntrlethdfryuqinggranules.ethdsqualitatindisriinatinfrhizayperiandraidixpaeniaeinthisfrulaasidentifiedbytl.quantitiveanalysisfastragalsideahihistheeffetiveeleentfthefrulaasadptedbyrp-hpl-elsd.resultthespeksintlerelearandeasytdisriinate.thepreisinandreprduibilityftherp-hpl-elsdethderefine.in1.032

3、5.16g,thententfastragalsideahadgdlinearrelatinship.theaveragereveryratefsapleas99.0516%,andrsd1.05%.nlusinthequalitystandardestablishednthisstudyanntrlthequalityftheprduts,theethdisviable.keyrd：yuqinggranules；astragalsidea；rp-hpl-elsd；tl疣清颗粒由黄芪、白芍、香附、薏苡仁等药物组成,具有清热解毒、托毒排脓、敛疮生肌成效,主要用于治疗锋利湿疣等皮肤玻本试验采用薄层

4、色谱法对方中黄芪、香附、白芍进展薄层鉴别。黄芪是方中主药,因此,选定黄芪甲苷为该制剂的含量测定工程,采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测法(rp-hpl-elsd)进展检测,以制定该制剂的质量控制标准。1仪器、试剂与药品日本岛津h-2000高效液相色谱仪(日本岛津公司)；kq-500e型医用超声清洗器(昆山超声仪器)；td5a低速台式离心机(长沙湘仪离心机)；ay220电子天平(岛津)；lihrpher18(5,4.6id15)色谱柱(淮阴汉邦科技；硅胶g(青岛海洋化工厂)。黄芪甲苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号为110781-202211)。黄芪、白芍、薏苡仁、香附等药材购自辽宁省

5、药材公司,经鉴定,符合2022年版?中华人民共和国药典?(一部)有关标准。疣清颗粒样品自制,批号为060611,060613,060615。甲醇为色谱纯,其余所用试剂均为分析纯。2方法与结果2.1薄层色谱鉴别2.1.1白芍1取本品3g,加乙醇10l,超声处理10in,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇1l使溶解,作为供试品溶液。另取白芍对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。再取除白芍外的其它处方量药材,按制备工艺制成缺白芍的阴性样品,取适量阴性样品同法制成缺白芍的阴性对照溶液。照薄层色谱法2022年版?中华人民共和国药典?(一部)附录b试验,分别汲取上述3种溶液10l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以

6、二氯甲烷-甲醇-丙酮(842)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色明晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显一样颜色的斑点。阴性对照无干扰。2.1.2香附2取本品4.6g,加温水(50)30l,超声处理10in,水溶液用乙醚提取2次,每次30l,合并乙醚液,挥去乙醚,残渣加醋酸乙酯1l使溶解,作为供试品溶液。另取香附对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。另按处方及工艺分别制备不含香附的阴性样品,同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法2022年版?中华人民共和国药典?(一部)附录b试验,汲取上述溶液各5l,分别点于同一硅胶g薄层板上,以二氯甲烷-甲苯(32)

7、为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2,4-二硝基苯肼乙醇试液,放置1h,斑点渐变为橙红色,而阴性对照液在相应位置上无此斑点。2.2黄芪甲苷的含量测定2.2.1色谱条件3色谱柱为lihrspher18(5,4.6id15,淮阴汉邦科技)；流动相：甲醇-水(8020)；流速：1l/in；柱温：25。elsd检测温度：92；气体流量2.24l/in。2.2.2对照品溶液的制备和线性关系的考察精细称取黄芪甲苷对照品5.16g置于10l容量瓶中并定容至刻度,得到浓度为0.516g/l的对照品溶液。分别取对照品溶液,用甲醇稀释成0.1032、0.2064、0.3096、0.4128、0.516g/l黄芪甲苷

8、溶液,按上述色谱条件测定。以黄芪甲苷的进样量常用对数为纵坐标,黄芪甲苷的峰面积常用对数为横坐标,回归得标准曲线：lga0.779133lg7.380524,r0.999973。结果说明,黄芪甲苷的进样量在1.0325.16g范围内,与其峰面积有良好的线性关系。2.2.3供试品溶液的制备与测定取疣清颗粒2.5g,混匀,精细称定,置于锥形瓶中,加水50l,浸泡30in,超声波处理30in,放冷,用水饱和正丁醇萃取3次(40、40、30l),分取正丁醇层置于上述分液漏斗中,参加40%氨试液洗涤2次,每次40l,弃去氨试液,分取正丁醇提取液,水浴蒸干,残渣加蒸馏水35l溶解,放冷,通过d101大孔树脂

9、柱(内径1.5,长12),以水50l洗脱,弃去水液,再用40%乙醇30l洗脱,弃去40%乙醇洗脱液,继续用70%乙醇50l洗脱,搜集洗脱液,蒸干,用甲醇转移并定容至5l容量瓶中。从该溶液中取一局部用0.45微孔过滤器过滤后即得疣清颗粒供试品溶液。取上述供试品溶液10l注入液相色谱仪,测定峰面积。2.2.4精细度考察按选定的黄芪甲苷hpl测定条件,精细汲取同一对照品溶液,进样10l,重复进样6次,测定黄芪甲苷峰面积,结果rsd1.19%(n6)。2.2.5重复性试验准确称取疣清颗粒2.5g,共6份,按上述供试品溶液的制备方法制备,各进样10l,每份样品进2针,测定黄芪甲苷峰面积,rsd0.92%

10、(n6)。2.2.6稳定性考察将同一样品溶液,在0、2、8、12、16、20h分别进样10l,记录峰面积,结果说明,峰面积的rsd0.71%(n6)。说明供试品溶液在20h内是稳定的。2.2.7加样回收率试验取已测知含量的样品适量,共6份,分别参加等同于样品中黄芪甲苷含量80%、100%、120%的黄芪甲苷对照品,按“2.2.3项下同法测定,用外标两点法计算含量。结果见表1。表1黄芪甲苷加样回收率测定结果略2.2.8含量测定取疣清颗粒3批样品(自制,批号为060611、060613、060615),按供试品溶液制备方法制备样品液,按上述色谱条件进展测定,进样10l,每份重复进样2次,测定疣清颗粒中黄芪甲苷含量。结果见表2。表2疣清颗粒样品含量测定结果(略)3讨论疣清颗粒中白芍、香附薄层鉴别与阴性对照品相比无干扰,且重现性较好。香附薄层色谱鉴别参照有关文献报道,喷以2,4-二硝基苯肼乙醇试液,放置片刻后斑点显现不明显,根据试验结果,需放置1h后斑点渐显,且在较长时间内斑点明显,不褪色。黄芪甲苷含量测定方法已报道有比色法、薄层扫描法、hpl法等,其中hpl法大多用紫外检测器于203n处检测。在预试验中,曾使用紫外检测器检测,结果干扰较大,基线漂移严重,测定结果不稳定,而改用rp-hpl-elsd进展检测,空白无干