感冒止咳胶囊的质量标准研究

1、感冒止咳胶囊的质量标准研究【摘要】目的建立感冒止咳胶囊的质量标准。方法采用HPL法对感冒止咳胶囊中的黄芩苷进展含量测定，流动相为甲醇-0.4%磷酸55：45，检测波长277n。采用薄层色谱法对制剂中主要药味黄芩、金银花、葛根、青蒿、柴胡等进展定性鉴别。结果黄芩苷的线性范围为0.0492.040gr=0.99995，n=5，平均回收率为98.10%，相对标准偏向为1.83%。薄层图谱斑点明晰，可鉴别出黄芩、金银花、葛根、青蒿对应的斑点，阴性对照无干扰。结论可用于感冒止咳胶囊的质量控制。【关键词】感冒止咳胶囊；黄芩苷；高效液相色谱；薄层色谱法；质量标准Abstrat：bjetiveTestabli

2、shthequalityntrlstandardfGanaZhikeapsules.ethdsThententfbaialinintheapsulesasdeterinedbyHPLiththebilephasensistingfethanl0.4%phsphriaid(55:45)andUVdetetinavelengthat277n.Thin-layerhratgraphy(TL)aseplyedthekthesubsistentRadixSutellarlae,FlsLnieraeJapniae,RadixPuerariaeLbatae,HerbaArteisiaeAnnuae,Radi

3、xBupleuri.ResultsBaialinshedagdlinearityintherange0.0492.040gr=0.99995，n=5，theaveragereveryas98.10%andRSDas1.83%.TheTLulddetettherrespndinghratgraphisptsfRadixSutellarlae,FlsLnieraeJapniae,RadixPuerariaeLbatae,HerbaArteisiaeAnnuaeithuttheinterferenefnegativentrlgrup.nlusinTheethdanbeusedfrthequality

4、ntrlfGanaZhikeapsules.Keyrds：GanaZhikeapsules;Baialin;HPL;TL;Qualitystandard感冒止咳胶囊是由感冒止咳冲剂改剂型而得，原方收载于?卫生部药品标准中药成方制剂?第2册，由黄芩、柴胡、金银花等中药组成，具有清热解表、止咳化痰的成效。用于感冒发热，头痛鼻塞，伤风咳嗽，咽喉肿痛，四肢怠倦，流行性感冒。黄芩为方中主药，其所含黄芩苷为主要有效成分之一，也是其指标性成分，本文为建立感冒止咳胶囊的质量标准，采用HPL法测定方中黄芩的黄芩苷含量，同时对主要药味黄芩、金银花、葛根、青蒿进展薄层鉴别。1仪器与试药DINEXP680高效液相色谱

5、仪；岛津L-10AT高效液相色谱仪；梅特勒-托利多电子天平AE100精细为0.0001g；梅特勒-托利多电子天平3精度为0.001g，PERKINELERLabda12型紫外扫描仪，数显恒温水浴锅国华电器；甲醇、磷酸为色谱纯，水为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。黄芩苷对照品批号110715-200212、绿原酸对照品批号110753-200212、葛根素对照品批号110752-200209、青蒿对照药材批号121016-202203均购于中国药品生物制品检定所。感冒止咳胶囊市场购得，批号20220601，20220602，20220603，阴性样品实验室自制。2方法与结果2.1薄层定性鉴别2.

6、1.1黄芩、金银花的薄层定性鉴别1取样品2粒，加50%甲醇10l，超声处理20in，滤过，滤液作为供试品溶液。另取绿原酸、黄芩苷对照品，分别加50%甲醇制成每毫升各含0.2g的溶液，作为对照品溶液。按样品制备方法制得缺黄芩、金银花阴性对照溶液。照薄层色谱法2实验，汲取上述3种溶液各10l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水7:4:3的上层溶液为展开剂，预饱和30in后，展开，取出，晾干，置紫外光灯365n下检视。供试品色谱中，在与黄芩苷、绿原酸对照品色谱相应的位置上，显一样颜色的荧光斑点。2.1.2葛根的薄层定性鉴别1样品6粒，加醋酸乙酯25l超声30i

7、n，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇0.5l使溶解，作为供试品溶液。另取葛根素对照品，加甲醇制成每毫升含0.4g的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法2实验，汲取上述两种溶液各5l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水7:2.5:0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365n下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显一样颜色的荧光斑点。2.1.3青蒿的薄层定性鉴别取样品2粒，加水20l超声使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，20l/次，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2l使溶解，作为供试品溶液。另取青蒿对照药材1g，加水15l，加热回

8、流1h，滤过，滤液用醋酸乙酯10l提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2l使溶解，作为对照药材溶液。照薄层色谱法2实验，汲取上述2种溶液各10l，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯17:3为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365n下检视。供试品色谱中，在与青蒿对照药材色谱相应的位置上，显一样颜色的荧光斑点。2.2含量测定2.2.1色谱条件色谱柱为AgilentKrasil18，流动相：甲醇-0.4%磷酸5545，检测波长：277n，流速：1.000l/in，柱温25，进样量10l，理论板数按黄芩苷计应不低于2500。2.2.2样品溶液的制备取样品适量，

9、研细，取粉末约0.5g，精细称定，置100l锥形瓶中，精细参加70%乙醇50l，称定重量，超声处理30in，放冷，称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，过滤，精细量取续滤液1l置10l量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，即得。2.2.3检测波长的选定精细称取黄芩苷对照品，加甲醇溶解制成每毫升含黄芩苷对照品25g的溶液，于200400n范围内进展紫外扫描，可以看到黄芩苷在277n处有最大吸收峰，应选择277n为检测波长。转贴于论文联盟.ll.2.2.4耐用性实验考察2.2.4.1液相色谱法流动相组成比例：根据2022年版?中国药典?中黄芩项下黄芩苷的含量测定条件以及预实验的结果，分别进展了甲

10、醇-0.4%磷酸5545、甲醇-0.4%磷酸5050、甲醇-0.4%磷酸6040组成比例的研究，对同一批批号：20220603样品进展了含量测定研究，结果说明当组成为甲醇-0.4%磷酸5545时，保存时间适当，峰形以及峰别离度较好。流动相的pH值：取同一批样品溶液批号：20220603，分别采用了0.1%磷酸、0.4%磷酸、0.5%磷酸作为流动相，进展了含量测定，结果说明流动相的pH值对峰形和峰别离度的影响很大，但是甲醇-0.4%磷酸5545系统与甲醇-0.5%磷酸5545系统根本上没有差异。考虑到色谱柱的对酸、碱的耐受性以及使用寿命，选择酸的浓度为0.4%磷酸，即流动相为甲醇-0.4%磷酸5

11、545。检测波长：取同一批样品溶液批号：20220603，经选用272，277，282n作为检测波长，对样品溶液进样测定分析，黄芩苷的平均含量为11.66g/粒，RSD为0.92%。柱温：取同一批样品溶液批号：20220603，经选用20，25，30作为柱温，对样品溶液进样测定分析，黄芩苷的平均含量为11.62g/粒，RSD为0.62%。变动色谱柱：取同一批样品溶液批号20220603，经选用汉邦Krasil18、汉邦Lihrspher18、AgilentKrasil18不同色谱柱，进展含量测定，黄芩苷的平均含量为11.56g/粒，RSD为0.65%。稳定性实验：取同一批样品溶液批号20220

12、601，分别于0，2，4，8，12，24h进样10l测定，黄芩苷的平均峰面积为657425，RSD为1.42%。结果说明样品溶液在24h内稳定。2.2.4.2样品溶液制备方法的考察取同一批样品批号20220603，分别采用回流提取3h与超声提取30in，测定黄芩苷的含量分别为，11.60g/粒。2.2.5线性关系考察精细称取黄芩苷对照品，分别制成0.0049，0.02450，0.0510，0.1020，0.2040g/l的溶液，各精细汲取10l注入高效液相色谱仪，测定峰面积，以对照品进样量g，X为横坐标、峰面积Y为纵坐标，绘制标准曲线，结果说明黄芩苷进样量在0.0492.040g的范围内，峰面

13、积与进样量呈良好的线性关系，回归方程为：y=51.188x0.5467，r=0.99995n=5。2.2.6准确度实验采用加样回收法，取含量的同批批号20220602样品约0.5g，研细，精细称定6份，每份各精细参加黄芩苷对照品约10g，按样品溶液的制备方法进展操作，测定。黄芩苷的平均回收率为98.10%，相对标准偏向为1.83%。结果见表1。表1黄芩苷含量测定准确度测定结果略2.2.7精细度实验重复性：取同一批样品批号20220603约0.5g，研细，精细称定6份，按样品溶液的制备方法进展操作，测定。结果说明黄芩苷的平均含量为11.65g/粒，RSD为1.03%。中间精细度：取同一批样品溶液

14、批号20220603，分别采用DINEXP680高效液相色谱仪和岛津L-10AT高效液相色谱仪测定，黄芩苷含量为11.62g/粒和11.57g/粒。重现性：取3批样品溶液批号20220601，20220602，20220603，分别在两个不同单位用HPL法测定，3批样品黄芩苷含量平均值+偏向为10.620.11，11.240.12，11.540.21g/粒，结果说明，重现性良好。2.2.8专属性实验按处方比例制备不含黄芩药材的感冒止咳胶囊样品，按样品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别精细汲取黄芩苷对照品溶液、样品溶液、阴性对照溶液各10l，注入高效液相色谱仪，结果说明，阴性对照无干扰。见图1。2.2.9范围考察考察本品含量测定方法的范围的低限为限度的-50%供试品溶液的制备的取样量为0.25g，高限为限度的+50%供试品溶液的制备的取样量为0.75g。在范围的高、低限，对同一批号的样品批号：20220603分别考察了精细度和准确度，结果说明：低限为-50%，高限为+50%时，本品含量测定方法精细度和准确度较好，精细度RSD值从低限到高限分别为0.81%，1.03%，0.93%，准确度RSD值从低限到高限分别为2.84%，2.94%。2.2.10样品的含量测定按照上述方法测定3批样品中黄芩苷的含量。结果见表2。表2含量测定结果