慢性前脑缺血致痴呆大鼠脑血流量及行为学对比研究

1、慢性前脑缺血致痴呆大鼠脑血流量及行为学比照研究【摘要】目的研究脑血流量在慢性前脑缺血致血管性痴呆()发病机制中的作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎方法制备慢性前脑缺血动物模型；应用激光多普勒血流仪检测各组大鼠术后不同时间点术后24h、1、0.5、1、2、3、4个月额叶、顶叶、海马及皮质下区部分脑血流量rBF；利用rris水迷宫方法检测各组大鼠记忆功能。结果大鼠双侧颈总动脉永久结扎后额叶、顶叶、海马及皮质下区的rBF明显下降，以术后24小时最明显，至4个月时仍明显低于正常，呈慢性持续性下降的趋势；各实验组大鼠从术后1个月开场即出现明显的记忆功能障碍,至4个月时记忆功能障碍持续存在。结论双侧颈总动

2、脉永久结扎可导致大鼠出现慢性持续性脑血流量下降；慢性持续性脑血流量下降可导致大鼠出现持续性认知功能障碍。【关键词】慢性缺血；血管性痴呆；RRIS水迷宫；脑血流【Abstrat】bjetiveTstudytherleferebralbldfl(rBF)nthepathgenesisfhrnifrebrainisheiainduingvasulardeentia(VD).ethdshrnifrebrainisheiadelasadebyperanentlusinfbilateralartidarteries.Thegnitivefuntinftheratsereestiatedbyrrisater

3、azetestandrBFinprefrntalrtex,parietalrtex,hippapusandsubrtexasassessedbylaserdpplerfletrynanydifferenttiepintafterperatin(24h,7,14d,1,2,3,4n).ResultsrBFinprefrntalrtex,parietalrtex,hippapusandsubrtexbviuslydereased,espeiallyn24hpstperatin,andaslerthanthatfnralgrupn4npstperatinbviusly.rBFshedatendeny

4、tdeline.Thegnitivefuntinsfratserebviuslyreduedafter1nfthehrnierebralhypperfusinandlasteduntil4n.nlusinsTheredutinfrBFightbeinduedbyperanentlusinfbilateralartidarteries,hihanresultinpersistentipairentfthegnitinfuntin.【Keyrds】hrniisheia；Vasulardeentia(VD)；rrisateraze；erebralbldfl近来发现：慢性脑灌注缺乏尤其是皮质下白质区脑

5、血流量慢性持续性下降可能是导致血管性痴呆VD的主要原因之一，故慢性缺血在VD发病机制中所起的作用开场引起人们关注。本实验采用双侧颈总动脉永久结扎方法制备慢性前脑缺血动物模型，应用激光多普勒血流仪检测了各组大鼠术后不同时间点额叶、顶叶、海马及皮质下区部分脑血流量rBF，并利用rris水迷宫方法评价各组大鼠的记忆功能。对慢性脑缺血致VD大鼠在BF及行为学方面进展了系统的研究，以期说明BF在慢性脑缺血致VD发病机制中的作用，为临床上防治VD提供理论根据。1材料与方法1.1动物模型制备选用长春高新医学动物实验研究中心提供的安康雄性istar大鼠150只，鼠龄35个月，体重300350g。随机分为对照组

6、和实验组，实验组又分为手术后24h组，1组、0.5、1、2、3及4个月组。采用双侧颈总动脉永久结扎方法制备慢性前脑缺血动物模型，详细方法如下：大鼠术前12h禁食，4h禁水。用1%戊巴比妥钠(10g/kg)腹腔注射麻醉,保证手术期间有自主呼吸。仰卧固定，颈部去毛、强力碘消毒后沿颈正中切开,别离双侧颈总动脉,并套以“0号线。分别结扎双侧颈总动脉的远近端，并从中间剪断，以确保阻断动脉血流。术中大鼠肛温保持在36.537.5，手术后动物送至有通风和空调设备的动物房饲养。对照组假手术组除不结扎不剪断双侧颈总动脉外，其余过程与实验组一样。1.2行为学检测各组选择10只大鼠采用rris水迷宫法进展大鼠记忆功

7、能的测定。rris水迷宫(rrisateraze，)由中国医学科学院消费，为一不锈钢的圆形水池，直径130，高50。池壁标明4个入水点，由此将水池等分为4个象限，任选其中1个象限，正中放置1个直径11、高29的平台。实验室温度保持在2425，rris水迷宫中参加奶粉1kg，用热水冲开，再用水加至高过平安平台1，水温控制在(261)。奶水中不能明显见到平安平台。水池四周存在丰富的空间参考线索(门、窗、灯、实验者等)，且保持不变以供大鼠定位平台。迷宫上方安有摄像机，并和录像机以及显示器连接，自动录入大鼠游泳轨迹进展分析。测试程序为定位航行试验(plaenavigatin)：历时4d，每天上、下午各

8、2次，将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中，记录其在3in内寻找到并爬上平台的时间即逃避埋伏期(esapelateny)。假如大鼠在3in未找到平台，那么由实验者用手牵引其至平台上，让大鼠停留10s，再放回笼中，埋伏期记为最高分180s。以后，分别在术后1、2、3、4月重新进展水迷宫实验，大鼠每次在3in内寻找到并爬上平台的时间为大鼠的记忆成绩，每日2次，连续4d，计算平均成绩。1.4统计学分析本实验各组资料结果均以xs表示，实验组和对照组间比拟采用t检验，实验组组间两两比拟采用单因素方差分析进展统计学处理。转贴于论文联盟.ll.2结果2.1大鼠双侧颈总动脉永久结扎后不同时期记忆才能测定双侧

9、颈总动脉完全阻断后首先出现短暂惊厥，体温降低，呼吸减慢，翻正反射消失；术后早期观察动物运动减少，后肢呈“八字，走路共济失调，或爬行和转圈；术后7d实验组已根本恢复，无明显的运动障碍。rris水迷宫结果可以看出，经过训练已经学会游迷宫的各组大鼠，双侧颈总动脉永久结扎1个月时，记忆功能即出现下降，游泳时间开场延长，直至4个月时记忆功能障碍持续存在。经统计学比拟14个月各实验组与对照组间差异非常显著(P0.01)；而缺血1月组、2月组、3月组和4月组之间比拟差异无显著性(P0.05)。见表1。表1双侧颈总动脉永久结扎后不同时间点大鼠水迷宫成绩与对照组比拟：1P0.012.2大鼠双侧颈总动脉永久结扎后

10、不同时期BF的变化大鼠双侧颈总动脉永久结扎后24h，额叶皮质、顶叶、海马及皮质下区的BF骤降，分别减少到正常的20.91%、52.76%、71.80%、67.86%；至半个月时有所恢复，分别到达对照组的32.19%、89.64%、89.89%、94.25%；之后各脑区BF再度下降，至4个月时仍明显低于对照组。见表2。表2大鼠双侧颈总动脉永久结扎后不同时期额叶顶叶、海马及皮质下区BF测定结果与对照组比拟：1P0.053讨论目前VD的病因尚不非常清楚，既往认为大多数VD是由于多发性脑梗死所致。最近临床研究发现13：VD病人存在以额叶为中心的诸多脑区弥漫性BF下降，也有报道VD的痴呆程度与额叶皮质B

11、F、脑氧代谢率下降呈正相关，甚至于有人对65岁以上老人前瞻性研究发现：在VD病人出现痴呆病症前2年即有BF的下降，而AD病人是在痴呆病症出现后才开场出现BF下降。故BF慢性持续性下降在VD发病机制中所起的作用开场引起人们关注。最新研究提示：脑血管储藏功能的下降导致全脑代谢储藏的消耗是VD发生的可能机制4。同时临床研究发现：许多Binsanger病的患者，并无明显的梗死灶，却出现认知功能障碍，推测可能与皮质下白质区由终末动脉供血，在脑灌注缺乏时最早受累，出现白质区供血缺乏。为证实这些推测，本研究采用双侧颈总动脉永久结扎方法制备慢性前脑缺血模型，并利用激光多普勒血流仪动态观察了不同时间点模型大鼠额

12、叶、顶叶、海马及皮质下区BF的变化情况。结果显示：结扎双侧颈总动脉后24h，实验大鼠额叶、顶叶、海马及皮质下区的BF骤降，分别减少到正常的20.91%、52.76%、71.80%、67.86%，至4个月时仍明显低于对照组。说明模型大鼠皮质及皮质下区BF呈慢性持续性稳定下降，与临床上VD病人的慢性持续BF下降根本相似，能较好地反映VD病人慢性持续的脑灌注缺乏的特点。同时本研究应用rris水迷宫检测模型大鼠记忆功能，发现实验大鼠从术后1个月起即出现记忆障碍，逃避埋伏期为77.67s，明显超过对照组(19.35s)，至2个月、3个月和4个月时大鼠的迷宫成绩分别为45.96、71.41和46.58s，与对照组相比均有显著差异。通过以上比照研究认为：皮质及皮质下区慢性脑灌注缺乏是导致实验大鼠进展性认知功能障碍的主要原因。有人对结扎双侧颈总动脉不同年龄大鼠的行为学研究发现，青年大鼠慢性脑缺血1个月时记忆