pbmc和非贴壁细胞的rnascope荧光分析样本准备与预处理第一部分_第1页
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文档简介

1、 本技术说明为使用 RNAscope 检测试剂盒检测外周血单核细胞（PBMC） 试 本技术说明为使用 RNAscope 检测试剂盒检测外周血单核细胞（PBMC） 试Aldrich）、SuperFrost plus 载玻片（Fisher） 和PBMC固定液（10%NBF）nical-user-安全说明书（SDS），第 PBMC收8.上下10 次重悬细胞团，将细胞悬液转移试剂准个新的 15 mL1.3mLHistopaque1077（或其Ficoll 溶液15mL离心管中，溶液温度升至室温（8:）15mL2.通过将50CellPrep 细液（储备在 20冷冻保存）1PBSPBS5ml50mL10.

2、室温250RCF 分钟（制动）11. 在不碰到细胞团的前提下吸出上清液，留下尽PBMC纯5mL液15mL心管中室温下用水平转子（头端摇动式）800RCF心 分钟（使用最小的加制动）4.用移液器或吸取装50mL5.1mLPBMC6.室温250RCF 分钟（制动）离心 分钟收集细胞3.800RCF 分钟室温下空气干燥载玻片 分钟50%室温孵育 分钟去掉50%离心 分钟收集细胞3.800RCF 分钟室温下空气干燥载玻片 分钟50%室温孵育 分钟去掉50%70%室温孵育 分钟去掉70%100%室温孵育 分钟100%醇，用新100%醇代替，室温孵育 分钟。3.40mL1PBS悬细胞，然后在室温下以RCF

3、离心4. 在不碰到细胞团的前提下吸去上清，留下尽可能注：载玻片可以于 20 ) 100%至 个月1.5mLPBMC定液重悬细胞，轻轻地上下吹10 次完全吹散细胞团2.37水浴锅中孵育 小时第 部分：84YIUVK HybEZ杂交炉40C1.250RCF 分钟2. 吸去上清液，不要搅动细胞团10mLPBMC洗涤液重悬细胞，250RCF离 10mLPBMC保存液（70%EtOH）重悬细胞上下吹吸 10 次完全吹散细胞团100%37干燥 分钟Immedge2-4 次。让疏水圈完全干透 1 分钟5.室温下孵育 分钟4)可保存 天1.用PBMC液调整1106/mL Hettich 细胞甩片机。如果使用其

4、他细胞离心系HybEZ加 2-4 滴蛋白酶 III。使用足够的溶液重要提示 RNAscope 320293）RNAscope nical-2（细manualsHybEZ杂交炉40C下孵育 分钟HybEZ加 2-4 滴蛋白酶 III。使用足够的溶液重要提示 RNAscope 320293）RNAscope nical-2（细manualsHybEZ杂交炉40C下孵育 分钟：白酶 III（每次一片）。不得使样本变干。1PBS1PBS1PBS，室温分钟84YIUVK 技术开启揭示 RNASCOPE 2.5ASSAY- 用户手册， 了解限制使用证或免责信息。Advanced Diagnostics,Inc保留在任何时候改变其产品和服务的权利来配合技术发展。本手册可变更，恕不另行通知。虽然这本手册已经做好

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