2013-12-28环境雌激素类似物危害生殖细胞健康

1、环境雌激素类似物危害生殖细胞健康2013/12/28生殖与发育研究中心1环境污染，使你无处可逃童年记忆中，清澈的河水还在吗2环境中存在的雌激素类似物双酚类（BPs）和烷基酚类，联苯酚A，双酚A，七-辛基酚，壬基酚酞酸酯类（PAEs ），如邻苯二甲酸酯，DEP，DMP，DOP多氯联苯类（PCBs），如聚乙烯，PCB聚氯联苯，多氯联苯二恶英类，如TCDD，这是已知最毒的Dioxin衍生物农用化学品类，如DDT，狄氏剂，艾氏剂等金属化合类:目前以三丁基锡研究较多其它环境激素类，如氟利昂，化妆品中苯酮，防酸剂BHA粮食中的玉米赤霉烯酮等3双烯酚A (BPA) ，是聚碳酸酯塑料的组成成分，光照、加热、接

2、触酸性或碱性物质或放置时间过长，BPA都会从塑料制品中释放到周围环境中，被人体吸收。 双酚A（BPA）和塑料制品4增塑剂，又称塑化剂，工业上被广泛使用的高分子材料助剂，在塑料加工中添加这种物质，可以使其柔韧性增强，容易加工，可合法用于工业用途。非食用却易滥用的食品添加剂。塑化剂（DEHP）和塑料制品5BPA和DEHP影响生殖健康的研究 影响原始生殖细胞发育 影响原始卵泡库的形成 影响卵母细胞发育与成熟 影响精子发生及精液品质 影响后代的生长发育不孕不育出生缺陷6模式动物 小鼠借助模式生物研究科学问题7BA 3dAgaroseCystPrimordialPrimarySecondaryOvary

3、卵巢卵泡体外发育模型8ControlBPA10 M100 MDEHP10 M100 MMVHPIMergeBPA和DEHP使卵泡体外形成延缓9BPADEHP*NestPercentages of oocytes (100%)BPA和DEHP使卵泡体外形成延缓10BPADEHP*Number of apoptotic oocytes/SectionHoechstTUNELBPADEHPBPADEHPRelative mRNA expressionControlBPA10 M100 MDEHP10 M100 MAB*BPA和DEHP使生殖细胞凋亡增加11BPADEHPBPADEHPBPADEHPB

4、PADEHPRelative mRNA level*Lhx8Relative mRNA levelBPA和DEHP影响卵泡形成基因表达12Lhx8BPA100 M DEHP100 MNegativeControlDEHP10 MBPA10 MNoboxControlNegativeBPA100 M BPA10 MDEHP100 MDEHP10 M BPA DEHP 10 M 100 M 10 M 100 MLhx8NoboxMvhControl41 KDa58 KDa76 KDa*BPADEHPBPADEHPRelative protein expression*Lhx8NoboxABBPA和

5、DEHP影响卵泡形成基因表达13BPA和DEHP影响Lhx8基因的甲基化14ControlBPA 10 MBPA 100 MDEHP 10 MDEHP 100 MBPA和DEHP暴露后的卵巢发育困难15Sasaki H, et al. Nature reviews. Genetics, 2008, 9(2):129-140.母体接触BPA对生殖细胞的危害160 dpp21 dpp0 dpp21 dpp0.5 dpc Maternal BPA or DEHP exposure12.5 dpc 19.5 dpcPregnancyAge of suckingF0F1F2MeiosisFollicul

6、ogenesisFolliculogenesis 实验设计17BPA影响印迹基因甲基化修饰18BPA影响印迹基因甲基化修饰19BPA影响印迹基因甲基化修饰20BPA影响生殖细胞相关基因表达21BPA影响生殖细胞相关基因表达22BPA使卵母细胞减数分裂进程延缓23BPA使Cyst解聚和卵泡形成延缓24BPA使Cyst解聚和卵泡形成延缓2515 d21 dControl 20 g/Kg 40 g/Kg BPA使卵泡募集加快导致卵巢早衰26BPA使卵泡募集加快导致卵巢早衰27BPA导致卵母细胞成熟异常28BPA使卵子印迹基因甲基化延缓29BPA使甲基化转移酶表达降低30BPA促进雌激素受体ERa表达

7、升高31体外实验：BPA影响印迹基因甲基化32BPA导致雄性小鼠精子发生异常33BPA导致睾丸发育与精液品质下降34BPA导致生精细胞减数分裂异常35BPA促进睾丸中ERa表达升高36BPA导致雄性小鼠后代生长发育异常370 dpp21 dpp0 dpp21 dpp0.5 dpc Maternal BPA or DEHP exposure12.5 dpc 19.5 dpcPregnancyAge of suckingF0F1F2MeiosisFolliculogenesisFolliculogenesis 实验设计38DEHP影响生殖细胞相关基因表达39DEHP影响生殖细胞减数分裂进程40DE

8、HP通过母体影响后代卵巢早衰41DEHP造成第二代卵巢早衰42APeg3H19Igf2rControlDEHPPercentages of methylation (%)BPeg3H19Igf2r*DEHP影响印迹基因的甲基化43AControlDEHPPercentages of methylation (%)BPeg3H19Igf2rPeg3H19Igf2r*DEHP影响印迹基因的甲基化44Igf2rPeg3AControlDEHPPercentages of methylation (%)BPeg3Igf2r*DEHP影响后代的印迹基因甲基化45Igf2rPeg3AControlDEHP

9、Percentages of methylation (%)BPeg3Igf2r*DEHP影响后代的印迹基因甲基化46新生鼠接触DEHP导致卵巢早衰47DEHP使卵子印迹基因甲基化延缓48DEHP导致卵母细胞成熟异常49新生鼠接触DEHP造成后代卵巢早衰50DEHP影响精子发育质量51DEHP影响精子发育中的减数分裂52DEHP影响精子发育中的减数分裂53DEHP影响精子发育中的基因表达54BPA/DEHP严重影响生殖细胞健康？卵泡库过快耗竭卵子发育异常睾丸发育异常精液品质下降出生后代质量下降FDA标准50 ug/Kg/day实验剂量：20 ug/Kg/day40 ug/Kg/day面对环境恶

10、化，我们55Diethylhexyl phthalate exposure impairs follicular development and affect oocyte maturation in the mouse. Environmental and Molecular Mutagenesis, 2013 Jun;54(5):354-61Di-(2-ethylhexyl) Phthalate and Bisphenol A Exposure Impairs Mouse Primordial Follicle Assembly in Vitro. Environmental and Mo

11、lecular Mutagenesis, 2013 Exposure to Diethylhexyl phthalate (DEHP) results in a heritable effect of folliculogenesis in mouse. Environmental and Molecular Mutagenesis, 2013 Bisphenol A exposure modifies methylation of imprinted genes in mouse oocytes via the estrogen receptor signaling pathway. His

12、tochemistry and Cell Biology, 2012 Feb;137(2):249-59 Exposure to bisphenol A results in a decline in mouse spermatogenesis. Reproduction, Fertility and Development, 2013 Jul;25(6):847-59 Fetal exposure to bisphenol A affects the primordial follicle formation by inhibiting the meiotic progression of

13、oocytes. Molecular Biology Reports, 2012 May;39(5):5651-7 Bisphenol A exposure modifies DNA methylation of imprint genes in mouse fetal germ cells. Molecular Biology Reports, 2012 Sep;39(9):8621-8 Effects of diethylhexyl phthalate (DEHP) given neonatally on spermatogenesis of mice. Molecular Biology Reports, 2013 Nov;40(11):6509-17Exposure to Diethylhexyl phthalate (DEHP) results in a h