长叶胡颓子对大鼠实验性结肠炎作用的研究

1、长叶胡颓子对大鼠实验性结肠炎作用的研究【关键词】长叶胡颓子；,抗氧作用；,结肠炎摘要：目的研究长叶胡颓子果实提取物对大鼠结肠炎损伤的保护作用。方法建立大鼠结肠炎模型，灌肠用药2周后，评价大鼠结肠黏膜损伤指数DI，检测结肠髓过氧化物酶P、超氧化物歧化酶SD、谷胱甘肽过氧化物酶GSHPX活性及丙二醛DA的含量。结果长叶胡颓子果实提取物300，500，1000g/kg灌胃用药均能不同程度降低模型大鼠结肠损伤指数和P活性、减少DA含量，进步SD，GSHPX活性，且与用药剂量呈一定量效关系。结论长叶胡颓子通过抗脂质过氧化，对大鼠结肠炎结肠损伤进展修复，减轻结肠损伤，抑制结肠炎大鼠炎症反响。关键词：长叶胡

2、颓子；抗氧作用；结肠炎StudyntheEffetsfElaeagnusbkiiDielsntheExperientallnitisinRatsAbstrat:bjetiveTstudytheprteteffetfElaeagnusbkiDielsaterextratnlnitisinrats.ethdsRatlnitisdelasestablished.ElaeagnusbkiDielsasusedbylysterneaday.Afterteeks,thelnussdaageindexDIasevaluated.TheativityfP,GSHPX,SDandthelevelsfDAinth

3、elnereeasured.ResultsElaeagnusbkiiDielsaterextrat(300,500,1000g/kg)dereasedtheativityfDI,PandthelevelsfDA,inreasedtheativityfSD,GSHPXindelrats.nlusinTreatentithElaeagnusbkiiDielsanalleviatethelninjuryinlnitisrats,byeliinatingxygenfreeradialandrepairingund.Keyrds:ElaeagnusbkiiDiels;Antixidatin;lnitis

4、胡颓子属在全球约有80余种1，长叶胡颓子ElaeagnusbkiiDiels是其中一种，属珍贵的药食两用植物，根、叶、果皆可入药2。长叶胡颓子可健胃，治疗肠胃虚弱，消化不良等病症，其果实味酸、涩，含鞣质3，有涩肠止泻作用4，民间惯用。为讨论长叶胡颓子对炎症性肠炎是否有抗损伤保护作用，笔者通过建立大鼠肠炎模型，采用长叶胡颓子果实提取物灌胃给药，进展了相关实验研究。现将研究结果报道如下。1材料与方法1.1材料1.1.1长叶胡颓子果实水提取物野生长叶胡颓子果实于2022-04采自湖北恩施自治州巴东野三关。长叶胡颓子果实水提取物：以下简称提取物生药含量1g/l，挑选上好果实水煎煮3次，过滤后浓缩成1g

5、/l的浓度即得。1.1.2试剂和仪器2，4，6-三硝基苯磺酸TNBS为美国Siga公司产品，柳氮磺吡啶SASP原药由上海三维制药提供国药准字H31020450，P、SD、DA、GSHPX试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。AEPRSET09D0501全自动生化分析仪美国，TL16G型高速冷冻离心机上海实验仪器厂消费。1.1.3动物安康istar大鼠，雌雄兼用，体重250270g，由湖北省动物实验中心提供。1.2方法1.2.1动物模型的建立及处理参考文献5：大鼠禁食24h后饮水照常，将溶于体积分数为50%乙醇的TNBS按100g/kg的体重、体积0.25l/只，用导管直径4经肛门插入结肠内约8灌

6、肠1次，建立大鼠结肠炎模型。实验设正常组、模型组、阳性药物对照组灌服SASP200gkg-1、胡颓子给药组灌服胡颓子提取液300，500，1000gkg-1，从制备模型7d后开场灌胃给药，1次/d，共14d。正常组与模型组均给予等量生理盐水灌胃。1.2.2指标检测及方法实验完成后处死动物，参考文献6方法及标准评价DI，评分标准为：0=无损伤；1=轻度充血、水肿，外表光滑，无腐败或溃疡；2=充血水肿，黏膜粗糙呈颗粒状，有腐败或肠粘连；3=高度充血水肿，黏膜外表有坏死及溃疡形成，溃疡最大纵径1，肠壁增厚或外表有坏死及炎症；4=在3分根底上溃疡最大纵径1，或全肠壁坏死。结肠标本常规石蜡包埋、切片，H

7、E染色，光镜观察。另取新颖结肠组织，用预冷的生理盐水冲洗除去血液，滤纸吸干称重，加9倍生理盐水，在低温冰水中用玻璃研磨器研磨制成10%的组织匀浆，高速离心取上清液低温3保存待测。P，SD，GSHPX检测操作按试剂盒说明书进展。1.2.3数据分析实验数据采用SPSS10.0软件进展t检验统计处理。2结果2.1结肠标本病理组织学观察模型组大鼠结肠黏膜充血水肿，大量炎性细胞浸润，肠壁增厚，黏膜外表有明显坏死及溃疡形成，腺体中杯状细胞减少。而不同剂量的长叶胡颓子用药组以上病理组织表现明显缓解。2.2对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反响的影响DI，P活性分别是反映结肠损伤与炎症程度的主要指标，两者在模型组大鼠

8、升高，而长叶胡颓子300，500，1000gkg-1与SASP200gkg-1灌胃用药均不同程度降低了DI及P活性P0.05，P0.01，且长叶胡颓子用药呈现一定量效关系。结果见表1。2.3对结肠炎大鼠氧自由基的影响与模型组比拟，长叶胡颓子提取物300，500，1000gkg-1与SASP200gkg-1灌胃用药均降低结肠组织中DA含量，升高SD，GSHPX活性，且长叶胡颓子中、大剂量作用显著P0.01。结果见表2。表1长叶胡颓子对结肠炎大鼠结肠损伤及炎症反响的影响(略)与对照组比拟，a：P0.01；与模型组比拟，b：P0.01；：P0.05，n=10表2长叶胡颓子对结肠炎大鼠氧自由基的影响(

9、略)与对照组比拟，a：P0.01；与模型组比拟，b：P0.01；：P0.05，n=103讨论TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎的主要机理为乙醇破坏结肠粘膜屏障，TNBS渗入结肠与大分子物质结合，形成全抗原引起肠壁一系列免疫应答与炎症反响，其发病机理及病理表现与人类炎症肠炎非常相似。免疫异常、氧自由基作用在炎症性肠病的发病机理中占有重要地位。SD能有效地去除氧自由基从而抑制结肠组织中的脂质氧化反响，并能保护细胞。目前许多实验通过检测SD活性及DA浓度的变化来反响其脂过氧化反响。本实验采用TNBS与乙醇诱发大鼠结肠炎模型后，发现大鼠结肠组织中SD活性显著降低，DA浓度明显升高，证明了氧自由基在炎病症性肠

10、病的发病机理中起重要作用。在本研究中通过病理组织学观察到，长叶胡颓子组病理组织损伤程度明显缓解，且呈一定剂量效应，显示采用长叶胡颓子提取物灌胃用药可明显减轻模型组大鼠结肠损伤，缓解炎症反响，表现出抗炎、抗损伤的保护作用；实验中，长叶胡颓子提取物灌胃用药能降低结肠炎模型组大鼠代谢产生的脂质过氧化物DA含量，升高重要抗氧化酶SD，GSHPX活性，表现出抗氧化特性，从而抑制结肠组织中的脂质过氧化反响，保护细胞膜，缓解氧自由基的损伤致炎作用。以上结果说明，长叶胡颓子果实提取物对大鼠结肠炎损伤具有保护作用。参考文献：1林来官.福建植物志,4卷.福州:福建科学技术出版社,1989:45.2胡丰林.中国胡颓子属植物利用价值的初步分析J.生物学杂志,1996,(4):30.3张贵君.现代中药材商品通鉴.北京:中国中医药出版社，2001：1611.4黄泰康，丁志遵，赵守训，等.现代本草纲目.北京:中国医药科技出版社，2001：1843.5梅俏,于皆平,许建明,等.褪黑素对结肠炎大鼠免疫功