植物组织培养第十二章(3)几种水果的组织培养课件

1、植物组织培养第十二章(3)几种水果的组织培养课件植物组织培养第十二章(3)几种水果的组织培养课件本章内容提要：一、草莓微茎尖培养二、葡萄的组织培养三、无花果的组织培养陈传红 制作本章内容提要：陈传红 制作本章目的和要求：（1）掌握草莓微茎尖培养的大致过程， 了解鉴定草莓无毒病苗的方法；（2）掌握葡萄的组织培养过程。（3）掌握无花果的组织培养陈传红 制作本章目的和要求：陈传红 制作第一节 草莓的组织培养陈传红 制作第一节 草莓的组织培养陈传红 制作陈传红 制作陈传红 制作一、形态特性和生物学特性 草莓为重要的浆果植物，栽培分布很广，其总产量在浆果类中仅次于葡萄，居世界第二位。草莓果实柔软多汁，含

2、丰富的糖、酸、矿物质，维生素等。草莓可鲜食，也可加工成果酱，果酒等。其颜色鲜艳，是良好的配餐食品。陈传红 制作一、形态特性和生物学特性 陈传红 制作1. 形态特性草莓属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，须根系，在土壤中分布较浅。草莓的茎呈短缩状，分地上和地下部分，地上短缩茎节间极短，节密集，其上密集轮生叶片，叶腋部位着生腋芽。匍匐茎是草莓的特殊地上茎，是其营养繁殖器官，茎细，节间长，一般座果后期发生。陈传红 制作1. 形态特性陈传红 制作2. 生物学特性 草莓根系在土壤温度达到2时开始活动，在10时开始形成新根，根系生长的最适温度为1520，秋季温度降低到78时生长减弱。 春季气温达

3、5时植株开始萌芽，茎叶开始生长。草莓的根系分布较浅，加上植株矮小，叶片较大，因此蒸发量大。 在整个生长季节，叶片几乎都在不断地进行老叶死亡、新叶发生的过程，叶片更新频繁。陈传红 制作2. 生物学特性陈传红 制作二、草莓脱毒苗的培养1.热处理脱毒将草莓植株在4041温度下处理46周，然后取微茎尖培养。2.微茎尖脱毒初代培养 ：外植体消毒：匍匐茎上的顶芽，用自来水流水冲洗24h，剥去外层叶片，在无菌条件下，用0.5%次氯酸钠溶液表面消毒5min，并不停地搅动。于超静工作台上剥取茎尖并接种。陈传红 制作二、草莓脱毒苗的培养陈传红 制作培养基：MS + BA 0.25 + NAA 0.25 或 MS

4、+ BA 0.5 + NAA 0.2中。培养条件：2225，光照1618h，3000lx。经23个月的培养，可生长分化出芽丛。注意！在低温和短日照下，茎尖有可能进入休眠，所以较高的温度和充足的光照时间必须保证。(2) 继代培养 培养基：MS + BA 0.5 + NAA 0.01 可将芽丛小块分成单株，再转入前述的分化培养基中，又会重复上述过程，达到扩大繁殖的目的。陈传红 制作培养基：MS + BA 0.25 + NAA 0.25 或 (3) 生根培养 生根培养基：1/2MS+IBA0.1。(4)驯化、移栽： 用镊子把草莓苗从试管瓶中取出，洗掉根系附带琼脂培养基。事先备好88cm或66cm的塑

5、料营养钵，内装等量的腐殖土和河砂。 栽前压实，浇透水，用竹签在钵中央打一小孔，将试管苗插入其中，压实苗基部周围基质，栽后轻浇薄水，以利幼苗基部和基质密合。 要“深栽浅埋”，即根要深栽、根茎略高于地面。陈传红 制作(3) 生根培养 陈传红 制作3花药培养脱毒花药培养操作简单，因经愈伤组织途径，再分化得到的即为无病毒苗，所以可免去病毒鉴定工作。（1）取材与外植体消毒 预处理：单核期的花蕾，置于洁净培养皿中，内放一层滤纸，滴蒸馏水数滴保湿，放入34冰箱中低温保存34d。 外植体消毒：经预处理的花蕾先在70%酒精中浸泡半分钟，取出放入新配制的饱和漂白粉上清液中消毒10min，用无菌水冲洗3次。 在超净

6、工作台上剥取花药，立即接种。陈传红 制作3花药培养脱毒（1）取材与外植体消毒陈传红 制作培养基: MS + 2,4D 0.4 + IAA 2.0。培养条件：2426,光照10h/d，1500lx, 20d后可产生乳白色的愈伤组织。（2） 植株分化 将诱导出的花药愈伤组织转移到1/2MS基本培养基，添加GA0.5，BA0.5和三十烷醇4。 愈伤组织经培养后很快转绿，以后微带淡紫红色，15d后在表面分化出半球形小突起，转为绿色。 20d后分化出幼叶、幼茎，并有不少突起物，以后陆续分化出新梢。陈传红 制作培养基: MS + 2,4D 0.4 + IAA 2.0。四、草莓无病毒苗的鉴定 草莓花药培养得

7、到的为无病毒苗，而用生长点培养得到的植株，则必须经过病毒鉴定，确定其不带病毒，才可以大量繁殖，用于生产。 1、草莓病毒的种类 草莓病毒主要有四种：斑驳病毒，皱叶病毒，脉结病毒和轻型黄边病毒。2、草莓病毒的鉴定方法 因草莓的病毒通过汁液接种不感染，所以通常采用小叶嫁接法来进行鉴定。陈传红 制作四、草莓无病毒苗的鉴定1、草莓病毒的种类2、草莓病毒的鉴定方从被鉴定株采集新叶，除去两边的小叶，中央的小叶带11.5cm的叶柄，把它削成楔形作接穗。指示植物则除去中间的小叶，在叶柄的中央用刀切入11.5cm，再插入接穗，用线把接合部位包扎好。为了防止干燥，在接合部位涂上少量的凡士林。在2周内，可罩上塑料袋，

8、置于半见光的场所。约经2周时间，撤去塑料袋。若带有病毒，嫁接后12个月，在新展开的叶、匍匐茎或老叶上会出现病症。步骤：陈传红 制作从被鉴定株采集新叶，除去两边的小叶，中央的小叶带11.5c指示植物待鉴定植物陈传红 制作指示植物待鉴定植物陈传红 制作嫁接后的植物指示植物接穗陈传红 制作嫁接后的植物指示植物接穗陈传红 制作五、草莓无病毒苗的繁殖和利用1. 防止蚜虫的危害 无病毒苗的繁殖重要的是要防止无病毒苗再度污染。 草莓病毒主要是蚜虫传播的，故要搞好防蚜虫工作。 草莓病毒通过蚜虫吸吮汁液而得到传播，短时间即可完成。 防治时可使用马拉松乳剂，氧化乐果乳剂等接触杀虫剂，防治期56月，910月，特别是

9、910月一次，可防止蚜虫的越冬。陈传红 制作五、草莓无病毒苗的繁殖和利用陈传红 制作2繁殖程序及措施 繁殖程序可分五步： 脱病毒鉴定生产出无毒苗、原种种苗培养、原种种苗繁殖、良种种苗繁殖、生产用苗繁殖和栽培苗繁殖。 前四步在隔离室中进行，后一步在露地进行。 为提高无病毒母株的繁殖株数可采用赤霉素处理和摘蕾的方法，在5月上旬和6月上旬分两次进行。 摘蕾可减轻母株的营养负担，促进匍匐茎的大量发生，田间地每一株可繁殖150200株。陈传红 制作2繁殖程序及措施陈传红 制作第二节 葡萄的组织培养陈传红 制作第二节 葡萄的组织培养陈传红 制作组培苗陈传红 制作组培苗陈传红 制作一、形态特征和生物学特性果

10、品中，葡萄产量及栽培面积在全世界一直居于首位。其果实除作为鲜果食用外，主要用于酿酒，还可制成葡萄汁、葡萄干和罐头等加工品。形态特性：葡萄属落叶木质藤本植物，葡萄原产于温带地区。生物学习性：深根性作物，根系垂直分布、发达，根系抗寒力很弱，大部分欧洲种葡萄的根系在57时即受冻，某些美洲种能忍受 1112左右的低温。陈传红 制作一、形态特征和生物学特性陈传红 制作二、葡萄的组织培养1.选材、外植体消毒及接种 葡萄新梢顶端取12的茎尖，除去幼叶后在5%次氯酸钠溶液中浸泡23min，消毒灭菌，以后用无菌水冲洗3次，再在0.1%升汞溶液中浸泡约2min，再用无菌水冲洗4次。在无菌条件下分离出约2长的茎尖，

11、接种到培养基上。2.培养基：MS BA 12 NAA 0.01 LH 100 蔗糖2% 琼脂0.6%。 陈传红 制作二、葡萄的组织培养2.培养基：MS BA 12 N3.茎尖的分化 葡萄12茎尖接种后成活率较高，接种成活的茎尖1个月左右开始分化幼叶和侧芽，2个月左右，由于侧芽的不断增生，形成芽丛。由于不同品种对BA和NAA的反应不同，故生长有明显区别，如：巨峰、大粒白香蕉、赤霞珠等品种，由于顶端优势强，侧芽生长势弱，故增殖率低，但成苗率高；白羽、贵人香等大多数品种侧芽分生能力强，可在幼茎上多次分枝，故成苗率低。陈传红 制作3.茎尖的分化 陈传红 制作4.茎尖苗的生长 在茎尖分化培养中产生的成苗

12、率低和成苗困难，密集生长的芽丛，可将分化培养基中的BA浓度减低至0.5， 同时添加GA30.2，则经1个月的培养，就可长成23高的幼茎。 此外黑暗处理对幼茎的伸成，提高成苗率，也有明显的效果。陈传红 制作4.茎尖苗的生长 陈传红 制作5、生根与移栽 切取23cm的茎尖苗，接种到MS + IAA 0.4 + NAA 0.05 培养基中，进行生根培养 12周后幼苗开始生根，1个月形成完整的根系，同时具备56片新叶。 移栽时洗去根上的培养基，栽到蛭石基质内，使根系具有良好的通气条件，盖上塑料薄膜，经710d锻炼适应后可去掉，移栽成活率在90%左右。陈传红 制作5、生根与移栽 陈传红 制作提高葡萄试管

13、苗移栽成活率要注意： 1、幼苗生长要健壮； 2、要保持空气湿度； 3、根际通气良好； 4、要尽量减少杂菌污染； 5、浇灌的溶液浓度不能过高。陈传红 制作提高葡萄试管苗移栽成活率要注意：陈传红 制作第三节 无花果的组织培养陈传红 制作第三节 无花果的组织培养陈传红 制作新疆无花果陈传红 制作新疆无花果陈传红 制作无花果树陈传红 制作无花果树陈传红 制作一 、特性和生物学习性1、形态特征：无花果为桑科、无花果属的落小乔木，是一种亚热带果树。花单性，隐于囊状总花花托内，果实由总花托和其他花器官组成，呈扁圆状或卵形，成熟后顶端开裂，肉质柔软，味甜。具有观赏和药用兼备的价值。2、生物学特性：用无性繁殖法

14、繁殖的无花果，通常于栽植后23年开始结果。67年进入盛果期。以后树冠不断扩大，产量逐渐增长，经济年限可延续4070年。生长势很强。幼树的新梢或徒长枝年生长量可达到2m以上。无花果不耐寒，冬季温度达-12时新梢顶端就开始受冻死亡。无花果能耐较高的温度而不致受害 陈传红 制作一 、特性和生物学习性2、生物学特性：用无性繁殖法繁殖的无花二无花果的茎段培养 外植体消毒：将采来的健壮的嫩茎削去大叶片，留下带腋芽的茎段，切成34cm长的小段，用流水冲洗3h ,以清除表面污染物，然后放入75%酒精中，再用0.1%氯化汞消毒710分钟，最后用无菌水冲洗45次，在无菌条件下将茎段横切成长约1 cm接种。 培养基：MS+BA0.51.0长芽中。 培养：8天后外植体接触培养基的一端切口周围长出嫩绿色、质地紧密的愈伤组织，同时腋芽展开，愈伤组织和腋芽的诱导率均为100%。 陈传红 制作二无花果的茎段培养陈传红 制作丛生芽增殖培养基：MS + BA 12 + NAA 0.10.2。腋芽萌生成绿色簇生状，每个腋芽上可生出1528个芽丛，逐渐长成苗