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文档简介
1、移植配型及法医物证学的分子生物学检验第一节:移植配型的分子生物学检验器官移植是指用自体或异体的正常器官、组织或细胞,置换病变的或功能缺损的器官、组织或细胞,以维持和重建机体的生理功能。目前影响器官移植成功率的主要因素是机体的免疫排斥反应,配型良好的受者具有较高的长期生存率,因此是移植配型是移植前非常重要的准备工作移植配型移植配型就是指在移植之前对供受者抗原的相容性进行检测,又称组织配型,通过移植配型选择移植物,尽量减少供受者的组织相容性抗原差异,提高移植成功率。ABO血型抗原人类白细胞抗原HLA一、HLA免疫学及分子生物学基础白细胞膜上的抗原:红细胞血型抗原白细胞本身特有的抗原与其他组织共有的
2、,也是最强的同种抗原,即人类白细胞抗原(human leucocyte antigen, HLA)同种异体移植时,供受者HLA不相容,会产生免疫排斥反应,其相容性是影响移植后长期生存率的重要因素之一HLA抗原HLA抗原受控于MHC的基因组,人类HLA抗原位于人第6号染色体短臂上,由一个DRA和多个DRB基因编码HLA-抗原的特异性取决于重链,由HLA-A、B、C位点编码,其轻链是2微球蛋白,15号染色体。目前300种以上HLA- 抗原受控于HLA-D区,由A、B基因分别编码重链和轻链, 抗原多态性取决于轻链。目前350种以上HLA-2A、2B和2D抗原由于与造血干细胞移植和器官移植的效果相关,
3、称为“移植抗原”二、HLA分型技术发展HLA分型的发展阶段:血清学分型,以补体依赖细胞毒性试验为基础,交叉反应、HLA-C,与DNA序列不一致细胞学分型,受限多,如淋巴细胞的纯度、实验繁琐DNA分型三、分子生物学在HLA分型中的应用RFLP与PCR-RFLP分型技术:HLA-DR、HLA-DQ、HLA-B44和HLA-C亚型PCR-SSCP技术:HLA-A、HLA-DRB1、HLA-DQB1测序技术PCR-SSO技术PCR-SSP技术基因芯片技术 FACS技术氨基酸残基配型标准分型技术合理选择HLA基因分型技术HLA配型在器官移植中具有重要临床意义,是影响移植物存活的主要因素之一,肾、心、肺,
4、尤其是骨髓移植骨髓移植中,由于其中含有大量的免疫细胞,如果供受不符,所发生的移植物搞宿主反应不易被免疫抑制剂控制,要求高根据需要选择不同的分型技术第二节:法医物证学的分子生物学检验法医学是运用免疫学、生物学、生物化学以及分子生物学的理论和方法,通达人类遗传标记的检验与分析,对生物学检测的种类、种属及个体来源进行鉴定个体识别亲子鉴定性别鉴定种族和种属认定一、个体识别和亲子鉴定的概念个体识别就是对两分份物证材料进行同一性认定,又称同一认定,属于法医物证学。有体态、性别、年龄面貌等,但某些遗传标志是最有效的方法 亲子鉴定是通过对人类遗传标记的检测,根据遗传规律分析,对有争议的父母与子女血缘关系的鉴定。二、遗传学及分子生物学基础双等位基因遗传标记DNA的长度多态性和序列多态性HLA分型技术,RFLP也称为指纹技术VN
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