乙肝病毒核心抗体体外诊断试剂盒说明书-罗氏(共5页)

1、11899066001V17Anti-HBc乙肝病毒核心抗体PAGE 2 2008-06 V5 中文 Elecsys 和cobas e分析仪11820559 122 100 人份试剂盒适用(shyng)于以下分析仪Elecsys 2010MODULARANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途：用免疫学方法(fngf)定性测定人血清或血浆中的针对(zhndu)乙肝核心抗原(HBcAg)IgG和IgM抗体。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys和cobas e免疫测定分析仪。临床应用: 乙肝病毒(HBV)由外壳HBsAg和内核HBcAg组成。后者含

2、有183-185个氨基酸。HBV感染期间，一般会产生抗HBcAg抗体，并可持续存在。在HBV感染发病HBsAg出现后即可从血清中检测到HBcAg抗体。在HBV感染康复者和HBsAg携带者中，抗HBcAg可持续存在，因此，抗HBcAg 是提示过去或现在感染HBV的指标。偶尔，也有抗HBcAg阴性的HBV感染者（多见于免疫抑制病人）。由于抗HBcAg可长时间存在，因此，在特殊人群中开展抗HBcAg筛选试验对预防乙型肝炎的传播有重要参考价值。抗HBc试验与其它乙型肝炎试验一同检测有助于乙型肝炎的诊断和监测。在其它乙型肝炎标志（HBsAg阴性者）缺乏的情况下，抗HBc可能是提示现存HBV感染的唯一指标

3、。原理：采用竞争法原理，整个过程27分钟完成。 第1步：40l标本用还原试剂预处理。 第2步：加入HBc抗原液，标本中的抗- HBc与HBc抗原结合形成复合物。 第3步：加入生物素化的和钌标记的抗HBc抗体以及链霉亲和素包被的微粒，HBc抗原上仍然游离的位点被占据。形成的免疫复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。 第4步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。Elecsys和cobas e分析仪自动将标本产生的光电信号与从抗HBc定标液得出的Cutoff值相比较。试剂：M：链霉亲和素包被的微粒（

4、透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。R0：DTT（白盖），1瓶，5ml：二硫苏糖醇，浓度110mmol/l；枸橼酸缓冲液50mmol/l。R1：HBcAg（灰盖），1瓶，8ml：HBcAg（E.coli，rDNA）浓度高于25ng/ml，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。R2：生物素化的抗HBcAg抗体;Ru(bpy)32+标记的抗HBcAg抗体（黑盖），1瓶，8ml：生物素化的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于800ng/ml；Ru(bpy)32+标记的抗HBcAg单克隆抗体浓度高于130ng/ml；磷

5、酸缓冲液0.1mol/l，pH7.4，含防腐剂。Cal 1 阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶 人血清, 含防腐剂Cal 2 阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶，抗HBc（人）浓度高于8PEIU/ml, 人血清, 抗HCV和抗HIV1+2无反应性。含防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据单。所有人来源材料必须(bx)视为有潜在感染性的物质。来源于人血液的所有产品(chnpn)由捐赠者血液单独特殊制备而成，并经检测HBSAg、HCV抗体(kngt)、HIV抗体，均为阴性

6、。所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法令98/79/EC附件II列表A。但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在感染的危险，故该产品仍需视作病人标本一样仔细处理。接触者必须遵循健康专业机构相应的法规9.10。若试剂超过保质期，则不能再使用。避免试剂和标本（标本、校准液和质控液）产生泡沫。试剂处理校正液置于与系统相容的瓶內即可立即使用.Elecsys2010/cobas e 411分析仪：在2025C定标过程中定标液应放在分析仪上。使用后，应尽快关闭瓶盖，并将其储存在28C。因为可能会发生蒸发，每瓶定标液定标次数不宜超过5次。MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601

7、分析仪：除非定标需要全部量，否则将即用型定标液装入空的有盖小瓶，并将提供的标签贴在分装的其余小瓶上，储存在28C。每瓶分装定标液只可用一次。正确操作的有关信息请参见各试剂条形码。储存和稳定性：存放在2-8 度，请垂直摆放试剂盒，以确保使用前微粒自动混合完全有效。未开封，可稳定至标明的保质期。M，R0、R1 ，R2试剂开封后，2-8 度, 8周；在仪器上(Elecsys 2010和cobas e 411)，8周，在仪器上(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601)，8周。Cal 1，Cal 2开封后， 28 度, 8周；在仪器上(Elecsys 2010和cobas

8、e 411)，5小时，在仪器上(MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601)，只能使用一次。注意：请勿倒置定标液，保证定标液不污染瓶盖。标本采集和准备：只有下列标本可以用来检测血清：使用标准标本管或含分离胶管采集。血浆：肝素钠、EDTA-K3、枸橼酸钠抗凝。标准：合理分配阳性和阴性标本。标本在28度可稳定5天，-20度可稳定3个月。标本可冻融5次。所示标本种类均和商品化标本采集管一起进行测定。不同生产商制造的标本采集管含不同材料可能会影响测定结果。在样品采集管中处理样品过程中，谨遵标本采集管生产商的操作规程。注意：冻融过的标本、有沉淀的标本、反复测定过的标本使用前需离

9、心。加热灭活的标本可使用。请勿使用叠氮化物稳定的标本或对照。确保患者标本、定标液和质控液在测定前置于室温。因为可能会发生蒸发，标本和定标液需在2小时内完成测定。检测步骤：提供的材料： 货号11876325, PreciControl 抗-HBc, 8 x 1.3 mL PreciControl Anti-HBc 1 and 2 货号11732277, 通用稀释液, 2 x 16 mL 或货号03183971, 通用稀释液, 2 x 36 mL sample diluent 货号11776576,定标液Vials, 2 x 56带盖小瓶 常规实验室仪器 Elecsys 2010, MODULAR

10、 ANALYTICS E170 或 cobas e 分析仪Elecsys 2010 and cobas e 411 分析仪配件:系统缓冲液,ProCell,货号11662988, 6 x 380 mL 测量(cling)池清洁液, CleanCell,货号11662970,6 x 380 mL 附加(fji)洗液,Elecsys SysWash,货号11930346, 1 x 500 mL SysClean接合(jih)器,货号11933159, Elecsys 2010 反应杯,货号11706802, 60 x 60 Elecsys 2010 吸头,货号11706799, 30 x 120

11、MODULAR ANALYTICS E170 and cobas e 601 分析仪配件:系统缓冲液, ProCell M，货号04880340, 2 x 2 L 测量池清洁液，CleanCell M,货号04880293, 2 x 2 L PC/CC-杯, 货号0302314112 杯，用于测定前预热 ProCell M和 CleanCell M 探针清洁液，ProbeWash M,货号03005712, 12 x 70 mL，用于更换试剂后的清洁。检测清洁液, PreClean M,货号03004899 , 吸头/反应杯试剂盒 M，货号12102137, 48 盒x 84 反应皿 或 吸头

12、, 废物袋废物袋,货号03023150 SysClean Adapter M，货号03027651, 所有 分析仪配件:系统清洁液, Elecsys SysClean，货号11298500, 5 x 100 mL 检测方法：按仪器操作说明进行操作。检查试剂与消耗品是否充足。使用前需混匀微粒。仪器通过扫描试剂盒条形码自动输入测试所需的特异性参数，不需手工输入。如果特殊情况下仪器无法阅读条形码，可以手工输入15位数字。MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 and cobas e： 将冷藏试剂预温到20 度后放置于仪器的试剂盘上，避免产生泡沫。系统自动控制试剂温度

13、和开/关试剂瓶盖。将抗HBc Cal 1和Cal 2放在分析仪的标本测试区。只在定标时打开瓶盖。条形码自动提供定标所需的数据资料。定标完成后，将Cal 1和Cal 2放回28 度保存或直接弃取。定标：溯源性：该方法已经过Paul-Ehrlich研究所HBc参考材料82（抗HBc IgG抗体）标准化。定标频率：每批试剂盒必须用新鲜试剂和抗HBc Cal 1,Cal 2定标一次（如试剂盒在分析仪上运作不超过24小时）。另外，以下情况需要再次定标： 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒） 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时； 根据规定进行多次标定。定标范围（电化学发光信号计数）：

14、阴性定标液（Cal 1）： 42，000-250，000 (Elecsys 2010 和cobas e 411 分析仪)100000-650000 (MODULAR ANALYTICS E170 和 cobas e 601 分析仪).阳性定标液（Cal 2）： 100-3000 (Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 和 cobas e 分析仪).质控：Elecsys抗HBc质控品1和2（PreciControl）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外

15、，应采取校正措施。如果需要，重复测定相关标本。注意(zh y)：由于技术原因，同一批号试剂(shj)或对照重新设定靶值需手工输入。因此需在制定(zhdng)靶值时参考包装或PreciControl试剂盒中的表单中的数据。使用新批号的试剂或对照批时，分析仪会使用对照批条形码中的原有数值。计算：仪器会自动根据Cal 1和Cal 2的测定值计算Cut-off值。每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数（标本信号/ Cutoff）报告。干扰因素：该方法不受黄疸（胆红素428mol/L或25mg/dL）、溶血（血红蛋白 1.0 mmol/L 或1.6g/dl）、脂血（脂质1000mg/d

16、l）和生物素（生物素5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（676U/ml）。19种常用药物经试验对本测定无干扰。接受过小鼠单抗治疗或诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体的干扰。Elecsys 抗HBc测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。稀释：可用Elecsys通用稀释液或HBV阴性的人血清、血浆或胎牛血清稀释标本。参考范围：标本的Cutoff指数1.0判断为抗HBc无反应性。可判定该标本抗HBc阴性，不需进一步的试验。标本的Cutoff指数= 1.0判断为抗HBc有反应性。必须用该试剂重复测定两次：如

17、两次结果均为无反应性，则判定该标本抗HBc阴性；如两次检测中有一次是有反应性，则判定该标本抗HBc重复有反应性。特异性参数：以下所列举为Elecsys分析仪具代表性资料。各实验室所测结果可能有所差异。精密度：利用Elecsys试剂,重复检测人类混合血清和质控液（批内n21，批间n10）,按照修正NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards)公布的实验方法(EP5-A)执行 :每天测试6次,进行10天(n=60),在E170上测试一次运转内的精确度,重复21次,得到下列结果:Elecsys 2010 and cobas e

18、 411分析仪批内精密度批间精密度样品均值COIcSDCOICV%均值COISDCOICV%HSd，阴性1.730.0201.21.780.0241.4HS，弱阳性0.700.0273.90.900.0101.1HSe，阳性0.310.0103.40.010.00011.3PCeA-HBC11.460.0281.91.420.0141.0PC A-HBC20.320.0072.30.300.0041.6c) COI = cutoff 值d) HS = 人血清 e) PC = PreciControlElecsys 2010 and cobas e 411分析仪批内精密度批间精密度样品均值COI

19、cSDCOICV%均值COISDCOICV%HSd，阴性2.260.0331.52.20.1205.5HS，弱阳性0.740.0192.60.730.0598.1HSe，阳性0.0040.000061.70.0040.00011.8PCeA-HBC12.260.0261.22.210.1034.7PC A-HBC20.430.0081.90.490.0336.8分析(fnx)灵敏度（最低检测(jin c)限）： 0.8 PEI U/mL灵敏度是由符合(fh)cut-off 值信号的抗HBc浓度决定的，cut-off 值由标准曲线计算的。标准曲线由不含HBV 的人血清稀释的抗HBc 参考物所得的

20、一系列稀释液而获得。稀释液经过Paul-Ehrlich-Institute 标准(subtype ad, 1987) 和世界卫生组织80/549 (subtype ad, 1985) 认证。分析特异性：所使用的单株抗体对HBc具高度特异性,未测到针对HAV, HCV, CMV, EBV, HSV, 弓形虫, 风疹病毒和 E. coli的任何交叉反应。以上各抗原均至少使用6份针对该抗原的抗体阳性或含自身抗体（AMA,ANA,SLE）血清或血浆样品检测。临床灵敏度：样品特点Elecsys 抗-HBc 检测非重复反应性抗-HBc 对照检测方法非重复反应性灵敏度HBsAg 阳性457457100抗HB

21、s 阳性HBsAg 阴性6767100临床特异性：运用健康献血员和住院病人标本检测临床特异性。确定的阳性标本未计入特异性计算中。分组检测数反应性标本数特异性重复反应性标本数特异性确定阳性标本数献血员511111299.610699.791高发区住院患者24595-89-87参考文献：1. Sllberg M, et al. Characterisation of a Linear BindingAntibody to Hepatitis B Core Antigen. J Med Virol2. Hoofnagle JH. Type B Hepatitis: Virology, SerologyCourse. Seminars in Liver Disease: I 1981;1:7-3. Kumar S, Pound DC. Serologic diagnosis of viral Postgraduate Medicine 1992;92(4):55-65.4. Decker RH. Section 9, Viral Hepatit