遗传分析仪的日常维护

1、遗传分析仪的日常维护肖怀东 Field Application SpecialistTel: 8008208982; 4008208982E-mail: CNAPMsupport提 要遗传分析仪的开关机顺序遗传分析仪日常维护保养及其重要性遗传分析仪常见故障及解决方法电脑与遗传分析仪的开机与关机顺序开机顺序： UPS电脑遗传分析仪（绿灯亮后）Data Collection关机顺序： 先退出应用程序（Data Collection、Genemapper），再关遗传分析仪，最后关掉电脑。 请严格按照此顺序进行开关机！ 好的开头等于成功了一半开机仪器开机成功的标志：绿灯长亮。打开数据收集软件： 31X

2、X： NT系统，有4个运行的窗口；2000或XP，有2个运行的窗口。 3500系列：vista系统，2个运行窗口，Demon-DOS和数据收集窗口。运行过程中，每个窗口都不能关闭。日常维护保养及其重要性耗材使用注意事项甲酰胺：分装（使用量），-20 C保存，以避免反复冻融。胶：4C保存，用之前半小时从冰箱中取出回温；并且不同种类的胶不能混用；建议每周更换一次，并使用Replenish Polymer Wizard。水：请使用电导率为18.2兆欧的水。Buffer：新鲜配制 (3500为预装好的）。毛细管：未使用过的毛细管请置于干燥的地方保存；用过的毛细管两端一定不能离开水。为什么要使用新的甲酰

3、胺？甲酰胺的作用 保持DNA热变性后的单链状态。甲酰胺离子化后的影响 竞争DNA进样过程 长片段的影响较大 建议：甲酰胺使用Hi-Di，且存放不要超过一年。208 S 1180 S 408 S 338 S Data Collection Scan NumberFigure 14.3, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition 2005 Elsevier Academic Press为什么要换分析胶？分析胶的作用 高分子网格结构，具有分子筛效应，能够按 分子量大小分离不同DNA片段。过期后的情况 化学键断裂，分子网格崩解，分子筛效应消

4、失。 建议：胶需要每周更换，使用 Replenish Polymer Wizard。为什么需要更换缓冲液？缓冲液的作用 维持稳定的PH值，保证DNA迁移率的稳定， 保证片段分型的可靠。 建议：需要每次电泳前或每24小时更换。(A) Good resolutionD8S1179D21S11D7S820CSF1POD3S1358TH01D13S317D16S539D2S1338D19S433D18S51TPOXVWAAMELD5S818FGAGS500 LIZ size standard(B) Poor resolutionBad Capillary in 3100 ArrayGood Capil

5、lary in 3100 ArrayIdentifiler dataButler, J.M., Buel, E., Crivellente, F., McCord, B.R. (2004) Forensic DNA typing by capillary electrophoresis: using the ABI Prism 310 and 3100 Genetic Analyzers for STR analysis. Electrophoresis, 25: 1397-1412. 毛细管每天要做的事情运行前检查block有无气泡（注意：下胶块V字型区域）检查DC软件仪表盘各消耗品的指征(

6、3500)检查胶的体积是否满足电泳用量（310，31XX）检查buffer及水的高度，必要时进行更换检查仪器是否漏胶或液体注意机器的环境卫生检查激光风扇出口是否被堵住3500 DC软件仪表盘消耗品读数3100/ 3100-A3130/ 3130XL3500/ 3500XL为什么要清除气泡？气泡会中断电泳通路，阻隔电流。尤其是下胶块内的气泡会产生放电导致下胶块管路烧焦，阀门密封损坏。每周要做的事情 更换新鲜的胶（Replenish Polymer Wizard）。 清洗注射器（310，3100/3100-A）。 更换测序仪 PDP water seal trap中的水。每周要做的事情Changi

7、ng the ABC and CBC（3500）:使缓冲液升至室温。 检查fill line。 确保内壁无溶液。 安装完成后，replenish the dashboard。 Run the Wash Pump and Channels wizard，使用Conditioning reagent （3500）。重新启动电脑和测序仪。检查磁盘空间。为什么要更换泵头密封圈里的水？密封圈的作用 清洗润滑石英活塞 溶解固体结晶 减轻活塞磨损换水注意事项 缓慢注入 拧紧封头每月要做的事情清洗上下胶引导块及管路系统（Water Wash Wizard，310，31XX）。清洗毛细管检测窗口并做 Spati

8、al Calibration。Flush the pump trap(3500)。Empty the water trap waste container (3500)。为什么要清洗灌胶块/泵？长期电泳会产生的副产品 降解胶残余物 样品端进入的荧光物质 样品伴随的杂质影响：会导致毛细管工作状态变差。 建议：对于3500，3500XL，每周清洗胶泵1次；对于310，31XX，每月清洗胶泵次，注射器也要每月清洗1次。每月要做的事情Run a performance check (3500)。对电脑进行碎片整理并备份相关数据。数据库整理： - 3100系列采用cleanupDB.bat； - 313

9、0系列采用 cleanup processed plate 按钮。为什么要清理数据库？数据库工作原理 暂存实时的荧光信号数据 电泳完成后从暂存记录抽提数据生成文件数据库满载后的故障 可以正常电泳 无法暂存荧光数据 不能生成样品文件每半年或一年要做的事情更换毛细管或根据需要更换3100需要每3个月或半年更换大小注射器根据需要（如spatial信号变低等）可联系工程师对机器进行保养电脑的维护和保养每周进行一次重新启动碎片整理不装第三方软件注意防病毒定期备份数据（每周）定期清理硬盘空间（每400次电泳）DELL维修电话：8008580890/80085806143500/3500XL维护日程表通过M

10、aintain Instrument图标查看维护日程Maintenance Calendar任务类型:- Factory (F) + Factory Repeating (FR)，默认设置，不能删除和更改频率，但优先度可以改变； Repeating (R) 用户自定义任务。红色代表高度优先；黄色代表一般。推荐:添加日常维护任务到日程表中；添加耗材更换警示。3500 Series Scheduled Maintenance每天查看维护通知，执行相应的维护任务。完成任务时，点击 代表完成，点击 代表未处理。完成或者未处理的任务均会从维护通知中移除，直到下次维护任务时间才会显现。Maintenanc

11、e Calendar Notification RemindersMaintenance Notifications Log完成和未完成的任务均记录在日志内。日志包含的信息:3130 Wizards3500 Wizards常见故障及解决方法3130正常的开机过程0秒按开关19秒黄灯开始闪37秒机器内哒哒响（EP、15V、24V检测）50秒开始初始化PUMP55秒AutoSampler开始初始化1分15秒AutoSampler回到Buffer位置1分29秒 绿灯亮，启动成功故障1 黄灯常亮不小心改了Computer NameFTP数据服务选项设置错误（正确路径C:Appliedbiosystem

12、sFirmware）数据线未连接、松动、接反防火墙开启网卡设置错误IP:DNS:在计算机处于关闭状态时，开启仪器硬件问题故障1 黄灯常亮如何找回原来的电脑名？E:AppliedBiosystemsGeneMapper里有一个install.log右键点击My Computer，选择Manage - Local Users and Groups察看以下用户名：IUSR_Computer NameIWAM_Computer Name故障2 黄灯闪烁，无法进入绿灯检查Oven门的按钮是否扣紧检查仪器主门是否关紧故障3 主机红灯亮启动时自检失败诊断办法：Start Run Telnet 7001，在黄

13、灯闪烁两下之后，回车截图email给工程师进一步判断Telnet显示高压电源读数异常故障4 DC软件无法运行Computer ManagementChecking for anti-virus software, third-part software.故障5 灰色Start和Spatial按钮故障6 DC软件红灯闪实验过程中发生故障查看Data collection软件中的Event log中的错误信息故障7 漏胶软件提示：Leak detected during capillary filling.任何连接处都有可能漏胶泵的单向阀损坏，胶回流 毛细管损坏，注意观察检测窗有没有胶渗出针阀关闭

14、不严注射器损坏（3100）可能的原因：提示信息Run failed, discharge was detectedAir bubbles may be in channel error message可能原因电泳系统中存在气泡不正确的缓冲液浓度误把水当成缓冲液缓冲液液位过低潮湿、胶垫未擦干下胶块阀门堵塞故障8 放电预防及解决措施4 C保存的胶应在室温下放置30-60分钟，安装时瓶盖稍稍带紧即可保持仪器洁净，使用干布、无尘纸擦拭检查系统是否有泄漏连接管正确连接、各连接处务必拧紧每次更换新毛细管，同时更换密封环、手柄检查下胶块、连接管有无烧过的痕迹定期清洗泵、下胶块故障9 开始采集数据时报错提示信

15、息： FIFO buffer over flow errors（一般发生在3100 DC1.1， NT操作系统）原因Spectral cal log文件夹里面存储的信息太多解决办法删除Spectral cal log文件夹的全部内容进入D:AppliedBio3100Bin，运行cleanupDB.bat快速诊断技巧执行空间校正检查峰数量、形状、高度峰间距13-16 pixels检查Instrument Status窗口各项参数看懂EPT图电泳电流电泳电压激光功率CCD温度炉温激光电流室温电流过高激光功率瞬间下降电流波动案例分享案例1现象:空间校正结果突然变得异常，而一天前还非常好重新灌入新鲜胶,无改善用甲醇冲洗毛细管检测窗,无改善更换新毛细管,无改善灌胶时明显有胶滴出来原因下胶块针阀处有结晶，导致阀门关闭不严解决办法清洗下胶块针阀运行Water Wash Wizard案例2现象:3130，1000点就开始出引物峰，每次水洗完之后跑试验都正常，但是故障在第二天开机后的第一次实验就会重现线索胶在有效期内，且是按要求保存缓冲液基本两天一换每天正常关机后，用水瓶替代胶瓶，胶放回冰箱4 C保存每天开机习惯是，先开31