白血病细胞的免疫表达ppt课件

1、白血病细胞的免疫表达白血病细胞的免疫表达史蔚史蔚0303级交大教改班级交大教改班50318190045031819004研讨方法研讨方法n流式细胞术流式细胞术n电镜电镜n荧光显微镜荧光显微镜n免疫组织化学免疫组织化学流式细胞术流式细胞术(FCM)n流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素流式细胞术白血病免疫分型是利用荧光素标志的单克隆抗体标志的单克隆抗体McAb作分子探针，作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。病细胞所属细胞系列及其分化程度。n白血病

2、构成的分化阻断学说白血病构成的分化阻断学说 B细胞分化各时期的细胞膜表现型细胞分化各时期的细胞膜表现型流式细胞仪免疫分型实验流式细胞仪免疫分型实验1. 样本采集、运输、保管和操作样本采集、运输、保管和操作2. 样本制备样本制备 单细胞悬液的制备单细胞悬液的制备 分别靶细胞群体分别靶细胞群体 估细胞悬液估细胞悬液 细胞染色细胞染色3. 抗体组合确实定抗体组合确实定4.样本获取样本获取5.数据分析数据分析6.数据解释数据解释电镜电镜(EM)n电镜不仅可以根据细胞超微构造发育情况电镜不仅可以根据细胞超微构造发育情况提示幼稚细胞来源和功能形状进展诊断，提示幼稚细胞来源和功能形状进展诊断，也经常经过对红

3、系各阶段细胞构造分析判也经常经过对红系各阶段细胞构造分析判别红系病态造血的缘由。别红系病态造血的缘由。 急性未分化或微分化型髓系白血病急性未分化或微分化型髓系白血病(MO)nA、幼稚细胞外形圆形或卵圆形，直径10um，核质比例高，核卵圆形，异染色质较多，核仁明显，细胞器少，8000； B、核膜MPO反响阳性，8000 急性巨核细胞白血病急性巨核细胞白血病(AMKL)nA、小巨核细胞核不规那么，有深切迹，异染色质较多，胞浆中可见sER构成管道网状系统，颗粒少见，6000；B、核膜和内质网PPO阳性反响，无阳性颗粒，6000。 免疫组化免疫组化(IHC)n免疫组织化学免疫组织化学(IHC)以其方法

4、简单、特异性以其方法简单、特异性强、设备要求低、形状学与免疫学结合等强、设备要求低、形状学与免疫学结合等优势，得到各级医院尤其是基层医院的广优势，得到各级医院尤其是基层医院的广泛认可，成为其它方法不可完全取代的、泛认可，成为其它方法不可完全取代的、血液系统肿瘤病理诊断、鉴别诊断与分型血液系统肿瘤病理诊断、鉴别诊断与分型的常规检测手段。的常规检测手段。白血病细胞的免疫表达白血病细胞的免疫表达n急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)n急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)n急性髓系白血病 (AML)n慢性淋巴细胞白血病CLLn慢性髓细胞性白血病CML 急性急性T淋巴细胞白血病淋巴细胞白血病(T-ALL)n

5、CD7、 CD5、CD2为全T细胞抗原，根本表达于T细胞分化的各阶段 n常以CD45Ro和CD3作为检测T细胞来源肿瘤较好的抗体组合 nCD4、CD8nTCR 、TCR基因重排nT淋巴细胞来源的肿瘤浸润性较强，预后较差，并需求多种治疗 急性急性B淋巴细胞白血病淋巴细胞白血病(B-ALL)nCD10(CALLA)区别ALL和AMLn与T细胞分化一样，在淋巴干细胞阶段，只表达TDT，CD34等非系抗原；到B系祖细胞，出现CD19、CD79a及胞浆CD10表达；随着B 细胞分化发育到逐渐成熟，TDT消逝，相继出现CD10、CD22、CD45RA、CD20表达，同时出现膜免疫球蛋白；淋巴细胞发育到终末

6、浆细胞，除表达浆细胞标志抗体外，还表达胞浆免疫球蛋白。CD19、CD45RA、CD79a。 急性非淋巴细胞白血病急性非淋巴细胞白血病(AML)根据FAB分型：MO：有低的SSC和FSC。在CD45SSC图上出如今淋巴细胞位置上，至少表达一个特异性标志如CD13或CD116，但MPO比CD13与CD33更灵敏。普通淋系标志阴性，但也可表达CD7或CD4。普通HLADR、CD34阳性，有些研讨阐明CD7与CD34共表达在AML且预后差。M1：流式上M1与M0类似不易区分，M1普通CD13、CD33、HLADR，但CD34表达少于M0，能够表达部分CD15。M2： M0与M1的主要区别是成熟度添加，

7、blasts减少，CD15较M1较显著，CD34弱于M1，CD13有时表达强于CD33，多数病例HLADR -。CD45SSC图显示从髓系blast区至成熟骨髓细胞区的延续细胞带，CD45SSC图有助于确定blasts比例。nM3、高颗粒性，具较高的SSC，但CD45较成熟C少，多数情况HLADR-或表达减少，CD34少于M2、普通CD13弱，可有CD2表达。nM4 与M5：两型表型类似，但M4较M5表达更多的CD34，较之M0、M1，M4与M5有更大的FSS和SSC，CD45SSC图上，成熟C出如今单核区，重要的表型为CD13、CD33、HLADR、CD14和CD15，CD33可表达强于CD

8、13，CD33、CD13、CD34 很能够为M5，但只出如今少数病人中，部分M5可见CD56。nM6： M6较少见且特征不明显，普通HLADR，CD34、CD13、CD33阳性，CD45SSC图显示主要为红系成份。nM7： 巨核细胞白血病，在AML中少于1。普通CD61Gpa和/或CD41Gpb-a阳性，而留意由于血小板粘附在blasts上呵斥的假阳性，可以用流式双色分析在EDTA存在下，测Gpb/a与CD34以减少激活血小板的粘附。慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病CLLnB系抗原为CD19、CD20、CD43、CD79a与CD5共表达nCD23、CD13、CD15表达 慢性髓细胞性白血病慢性髓细胞性白血病CMLn由于慢性期显著的细胞分化，在CD45SSC图上除了髓系细胞占主导外，只显示一个正常骨髓像，CML可确诊，CML起病与开展相对缓慢，