杂环类药物含量测定

1、情境一：杂环类药物的分析任务四：杂环类药物含量测定知识点：杂环类药物的分析课程：工业分析一、杂环类药物含量测定及方法一、非水溶液滴定法(一) 基本原理因此，要根据不同情况采用相应测定条件因此，要根据不同情况采用相应测定条件。一、杂环类药物含量测定及方法(二) 一般方法供试品+冰醋酸10ml30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正一、杂环类药物含量测定及方法(三) 问题讨论1.适用范围 主要用于Kb10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱 的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法， 可使pKb为813的弱碱性药物采用本法滴定

2、。 一般来说： Kb为10-810-10时，宜选冰醋酸作为溶剂； 药物的Kb为10-1010-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液； Kb10-12时，应用醋酐作为溶剂。 另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增 大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。 一、杂环类药物含量测定及方法2.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排序递减： 高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸 消除HX干扰的方法：加Hg(Ac)2 量不足终点不明显，结果偏低。 2BHX + Hg(Ac)2 2BHAc + HgX2 过量(13倍)不影响测定结果一、杂环类药物含量测定及方法3.滴定剂的稳定性 非水溶液

3、滴定法所用的溶剂为醋酸，具有挥发性，膨胀系数较大，温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。若滴定样品与标定HClO4溶液时的温度不一致，温差未超过10时，应将高氯酸滴定液的浓度用下列公式加以校正。4.终点指示方法 常用电位法和指示剂法。Ch.P收载的本类药物大多采用结晶紫指示剂指示终点，少数采用电位法指示终点。一、杂环类药物含量测定及方法(四) 应用实例 1.游离弱碱性药物测定 异烟肼、尼可刹米、地西泮及氯氮卓等。基于这些药物分子结构中氮原子的弱碱性，可用非水溶液滴定法直接测定其含量。由于这些药物的碱性强弱不同，测定时所采用溶剂、指示剂及其指示终点的方法也不尽相同。 药物名称 取样量(g) 溶 剂

4、指示剂 终点颜色 尼可刹米 0.15 冰醋酸10ml 结晶紫 蓝绿色 地西泮 0.2 冰醋酸、酸酐10ml 结晶紫 绿色 氯氮卓 0.3 冰醋酸10ml 结晶紫 蓝色一、杂环类药物含量测定及方法 2.氢卤酸盐类药物测定 当这些药物溶于冰醋酸时，由于氢卤酸在冰醋酸中酸性较强，对测定有干扰，必须先加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难以电离的卤化汞，而氢卤酸盐药物，则转变成可测定的醋酸盐。然后再用高氯酸滴定液滴定，并可获得满意的结果。应用示例如下： 药物名称 取样量(g) 溶 剂 加入醋酸汞试液(ml) 指示剂 终点颜色 盐酸氯丙嗪 0.2 醋酐10ml 5 橙黄 玫瑰红色 盐酸异丙嗪 0.3 冰

5、醋酸10ml 4 结晶紫 蓝色 盐酸氟奋乃静 0.3 冰醋酸20ml 5 结晶紫 蓝绿色 盐酸环丙沙星 0.2 冰醋酸25ml 5 橙黄 粉红色 氢溴酸东莨菪碱 0.3 冰醋酸20ml 5 结晶紫 纯蓝色 盐酸硫利达嗪 0.3 丙酮100ml 5 电位滴定法 一、杂环类药物含量测定及方法3.硫酸盐类药物测定 硫酸是二元酸，在水溶液中能完成二级解离，生成SO42-，但在非水介质中，只显示一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。一、杂环类药物含量测定及方法（1）硫酸阿托品测定：阿托品为碱性较强的 一元碱药物，因而硫酸

6、阿托品的化学结构式可以 简写为(BH+)2SO42 -，用高氯酸直接滴定时的反 应式为：(BH+)2SO42- + HClO4 (BH+)ClO4- + (BH+)HSO4- 可根据1mol的硫酸阿托品消耗1mol高氯酸的关系计算其含量。一、杂环类药物含量测定及方法（2）硫酸奎宁测定：奎宁为二元碱，其中喹核碱的碱性较强， 可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能与硫酸成盐，而 保持游离状态。当用高氯酸直接滴定硫酸奎宁时，1mol的硫酸 奎宁消耗3mol的高氯酸。其反应式如下： (C20H24N2 H+)2SO4 + 3HClO4 (C20H24N2 2H+)2ClO4- + (C20H24N2

7、 2H+)HSO4-ClO4- Ch.P和USP(24)都采用此法测定硫酸奎宁和硫酸奎尼丁的含量。一、杂环类药物含量测定及方法(3) 硫酸奎宁片的测定： 硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。此时1摩尔的硫酸奎宁可消耗4摩尔的高氯酸，因此片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。 一、杂环类药物含量测定及方法4.硝酸盐的测定 硝酸在冰醋酸介质中酸性不强，滴定反应可以进行完全。但是硝酸具有氧化性可以破坏指示剂使其变色，使指示剂无法指示终点。因此采用非水溶液滴定法测定硝酸盐时，一般不用指示剂法而用电位法指示终点。5.磷酸盐与有机酸盐 磷酸与有机酸在冰醋酸介质中酸性极

8、弱，不影响滴定反应的定量完成，可以按常规方法直接滴定。一、杂环类药物含量测定及方法二、铈量法（一）硝苯地平的测定 基本原理 硝苯地平的测定原理，可用下列反应式表示： 终点时:微过量的Ce4+将指示剂中的Fe2+氧化成Fe3+， 使橙红色配合物离子呈淡蓝色或无色，以指示终点的到达。+ 2Ce(SO4)2OCH3CH3H3COCO2CH3NO2NHNNO2CO2CH3H3COCH3CH3O+ 6HClO4+ 2Ce(ClO4)3 + 4H2SO4一、杂环类药物含量测定及方法（二）吩噻嗪类药物的测定自身指示终点或电位法、永停法指示终点一、杂环类药物含量测定及方法三、比色法(一）酸性染料比色法 1.基

9、本原理 一、杂环类药物含量测定及方法2. 影响因素 (1) 水相最佳pH值的选择：本法中水相的pH应使有机碱性药物均成阳离子(BH+)，而酸性染料应电离足够的阴离子(In -),阴阳离子才能定量生成离子对，并完全溶于有机溶剂中，而过量的染料完全保留在水相中，才能保证定量的测定。 (2) 酸性染料及其浓度：常用酸性染料有溴麝香草酚蓝、甲基橙、溴甲酚绿等。酸性染料浓度，对测定影响不大，有足够量即可。 一、杂环类药物含量测定及方法(3) 有机溶剂的选择 有机碱药物应对离子对提取率高，不与 水混溶，或能与离子对形成氢键的有机溶剂。常用的有机溶 剂有氯仿、二氯甲烷、二氯乙烯、苯、甲苯、四氯化碳等。(4)

10、水分的影响：严防水分混入有机溶剂中，水相中过量有色 酸性染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影 响比色测定。一般加入脱水剂，或滤纸过滤的方法，除去混 入的水分。 一、杂环类药物含量测定及方法3. 应用示例 Ch.P中硫酸阿托品片、氢溴酸东莨菪碱片和氢溴酸山莨菪碱片等，采用本法测定含量测定。一、杂环类药物含量测定及方法（二）钯离子比色法max500nm吩噻嗪类药物 + Pd2+pH20.1红色络合物在max处测定A，以对照法定量优点： 钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定。 一、杂环类药物含量测定及方法四、紫外分光光度法（一）直接分光光度法供试品不需提取分离，溶于适当

11、的溶剂中即可进行含量测定。 1.奥沙西泮原料的测定 在229nm，采用标准对照法测定。 2.盐酸异丙嗪片的测定 在249nm，采用E1cm1%910测定。 3.盐酸异丙嗪注射液的测定 测定波长的选择：注射液处方加VC作抗氧剂，可还原异丙嗪红 色氧化产物，从而防止异丙嗪氧化变色。VC在盐酸异丙嗪最大 吸收波长249nm处有吸收，干扰注测定。因此选用299nm波长测 定盐酸异丙嗪注射液的含量时，维生素C在此波长处则不产生干 扰,但E1cm1% 108 。一、杂环类药物含量测定及方法(二)萃取后分光光度法一、杂环类药物含量测定及方法（三）萃取-双波长分光光度法 本法是USP（24）收载的方法，用于盐

12、酸氯丙嗪注射液的含量测定，主要用来校正样品中氧化物对测定的干扰。测定原理 利用氯丙嗪的最max为254nm，其氧化物在此波长也有吸收，同时在277nm氧化物也有吸收，且其A254=A277.而氯丙嗪在此波长无吸收。因此，可由两波长处测得A计算氯丙嗪含量。一、杂环类药物含量测定及方法abbaaababababaCAAAlCAAAAAAAAA )()()(212121221121一、杂环类药物含量测定及方法（四）二阶导数分光光度法 盐酸氯丙嗪注射液 抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不干扰盐酸氯丙嗪的测定。因此盐酸氯丙嗪可从其二阶导数光谱量取峰266nm谷254nm距离，标准曲

13、线法定量 其测定方法如下： 一、杂环类药物含量测定及方法1.光谱绘制 测绘条件： 波长范围为200nm320nm；狭缝为12nm；纸速为120mm/min。2.线性关系 精取盐酸氯丙嗪对照液(50g/ml)制得标准系列，以 HCI(0.1mol/L)为空白，按光谱绘制项下分别测定。用尺量取不 同浓度系列溶液光谱266nm-谷254nm距离（DL），并以峰谷距离为纵 坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。3.供试品测定 精密量取盐酸氯丙嗪注射液2.0ml，按光谱绘制项 下的方法，测得二阶导数光谱，量取光谱峰-谷(266nm254nm) 距离，从标准曲线上求出浓度，计算百分含量。一、杂环类药物含量测定

14、及方法五、气相色谱法（一）硫酸阿托品片的含量测定 USP(24)采用的方法。以后马托品作为内标, 采用标准对照法。 测定方法 (1)内标溶液的制备： (2)供试品溶液与对照品溶液的制备： (3)色谱系统：色谱柱为1.8m2mm的玻璃柱；担体为与碳酸 钠混合于900熔融后，经酸和碱处理的硅烷化藻土；固定 相为3%的OV-17（即50%甲基，50%苯基的聚硅氧烷）；载气 为氮气，流速为25ml/min；检测器为氢火焰离子化检测器。一、杂环类药物含量测定及方法 (4)系统适用性试验：取对照品溶液1l，进样6次，所得的对 照品和内标峰面积之比的RSD不大于2.0%；对照品峰和内标峰的 分辨率Rs4.0

15、；T2.0。 (5)测定方法：取供试液和对照液各进样1l，记录各峰面积， 用下式计算所取片粉中硫酸阿托品(C17H23NO3)2H2SO4H2O的 重量: (C17H23NO3)2H2SO4H2O的重 (mg)=(694.85/676.83)(W/10)(Ru/Rs)一、杂环类药物含量测定及方法六、高效液相色谱法(一) 反相高效液相色谱法 1.地西泮注射液的反相HPLC法 地西泮注射液曾用萃取后分光光 度法测定含量，因萃取不完全，及有关物质和分解产物等对测 定有干扰，故中国药典自1995版改用HPLC法。此法操作简便， 可消除干扰。注射液中地西泮的平均回收率为99.4%，相对标 准偏差为0.8

16、%。(1)色谱条件与系统适用性试验：ODSC18；流动相为甲醇-水(70:30) ；检测波长为254nm 。n1500，R1.5。 (2)内标溶液的制备：取萘50mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解 并稀释至刻度，摇匀，即得。一、杂环类药物含量测定及方法 (3)测定方法：取地西泮对照品约25mg，精密称定，置25ml量 瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取该溶液与 内标溶液各5ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。 吸取5l10l进样，记录色谱图；另取本品适量(约相当 于地西泮5mg），同法测定，按内标法以峰面积计算，即得。一、杂环类药物含量测定及方法2.高效液相色谱法测定硫酸阿托品片的含量 色谱条件:色谱柱为SpherisorbC18 5m 流动相为0.025mol/L 磷酸(三乙胺调pH为3.0)-乙腈(80:20)；柱温为30；检测波 长为215nm；n=5880。 线性关系：精取硫酸阿托品适量，用流动相制备成22.4、44.8、 67.2、89.6、112g/ml溶液，进样3次，每次20l，所得峰 面积与浓度绘制标准曲线，呈良好的线性关系，其相关系数 r=0.9995，其线性范围为22.4g/ml112g/ml。 回收率试验： 样品测定： 一、杂环类药物含量测定及方法3.高效液相色谱法测定血浆中地西泮浓度 本法以艾