几种常用地染色方法

1、WORD格式几种常用的染色方法1美蓝染色法在已枯燥、固定好的抹片上，滴加适量的美蓝染色液，经12min，水洗，沥去多余的水分，吸干或烘干，镜检。2革兰氏染色法（ 1在已枯燥、固定好的抹片上，滴加草酸铵结晶紫染色液，经 12min，水洗。（ 2加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用1 3min，水洗。（ 3加 95酒精于抹片上脱色，约 30s-1min ，水洗。（ 4加碱性复红液或沙黄或稀释石炭酸复红液复染10-30s ，水洗。（ 5吸干或烘干，镜检。革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。3抗酸性染色法（ 1在已枯燥、固定好的抹片上，滴加较多量的石炭酸复红染色液，在玻片下以酒精灯火焰缓缓加热，至发

2、生蒸汽即止，维持微微发生蒸汽，经 3 5min，水洗。（ 2用 3盐酸酒精脱色，直至标本无色脱出为止，充分水洗。（ 3用美蓝染色液复染约 1min，水洗。（ 4吸干或烘干，镜检。抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌呈蓝色。以下方法也可：即在枯燥、固定好的抹片上，滴加石炭酸复红染色 1min，水洗，用 1美蓝染色液复染约 20s，水洗。对光观察，标本务必全呈蓝色，在火焰上烘干、镜检。抗酸性细菌呈红色，非抗酸性细菌和背景呈蓝色。4瑞氏染色法专业资料整理WORD格式 1抹片自然枯燥后，滴加瑞氏染色液于其上，为了防止很快变干，染色液可专业资料整理WORD格式稍多加些，或看情况补充滴加， 经 1 3min，加

3、约与染液等量的中性蒸馏水或 PBS 液，轻轻晃动玻片，使与染液混匀，约 3min 左右，直接用水冲洗不可先将染液倾去，吸干或烘干、镜检。细菌染成蓝色，组织、细胞等物呈其它颜色。（ 2另一方法 抹片自然枯燥后， 按涂抹点大小， 盖上一块略大的清洁滤纸片，在其上轻轻滴加染色液，至略浸过滤纸，并看情况进展补滴，维持不使变干；染色 3-5min ，直接用水冲洗，吸干或烘干、镜检。此法使染色液经滤纸过滤，可大大防止沉渣粘附于抹片上影响镜检观察。5姬姆萨染色法 1于 5ml 新煮过的中性蒸馏水中滴加510 滴姬姆萨氏染色液原液，即稀释成为常用的姬姆萨氏染色液。（ 2抹片经甲醇固定枯燥后，在其上滴加足量的染

4、色液或将抹片浸入盛有染色液的染色缸中，染色 30min，或者染色数小时至 24h，取出水洗，吸干或烘干、镜检。细菌呈蓝青色，组织、细胞等呈其它颜色。视野常呈淡红色。6克利特氏荚膜染色法 1染色液配制美蓝溶液美蓝 1g， 95酒精 10ml，蒸馏水 100ml。将美蓝溶于酒精内，再加蒸馏水混合。碱性复红溶液碱性复红 0.03g ，95酒精 1ml，蒸馏水 99ml。将碱性复红溶于酒精内，再加蒸馏水混合。 2染色法涂片经火焰固定后，滴加美蓝溶液，将玻片至火焰上面加热至发生蒸汽为止。水洗，以碱性复红溶液复染15 30s。水洗后、吸干、镜检。染色后，菌体呈蓝色，荚膜呈红色。专业资料整理WORD格式7.

5、 结晶紫福尔马林荚膜染色法专业资料整理WORD格式1染色配制结晶紫福尔马林染色液结晶紫 10g，福尔马林溶液 100ml。混合使其完全溶解，隔夜过滤。碱性复红溶液见前：克利特氏荚膜染色法 2染色法涂片用结晶紫福尔马林染色液染色0.5 1min。水洗后，以碱性复红染色液复染1530s。水洗、吸干、镜检。染色后，菌体呈深蓝色，荚膜呈淡红色。8. 番红染色液荚膜染色法1染液配制番红或沙黄0.7g，95酒精20ml，蒸馏水15ml。将番红溶解于酒精内，再加蒸馏水混合而成。 2染色法涂片滴加番红染色液，将玻片置火焰上加热至发生蒸气约5min。水洗、吸干、镜检。染色后，菌体呈暗红色，荚膜呈淡黄色。9. 赫

6、斯氏荚膜染色法（ 1染色液配制专业资料整理WORD格式龙胆紫酒精溶液龙胆紫酒精饱和液5ml，蒸馏水95ml。专业资料整理WORD格式硫酸铜水溶液硫酸铜20g，蒸馏水100ml。专业资料整理WORD格式2染色法专业资料整理WORD格式涂片加热固定， 将龙胆紫酒精溶液滴加于玻片。 将玻片置火焰上微加热至见蒸气并保持蒸气约 20min。专业资料整理WORD格式用硫酸铜液代替水冲洗染液，用吸水纸吸干、镜检。染色后，菌体呈深紫色，荚膜呈浅蓝色。10 安沙尼氏荚膜染色法（ 1染色液配制 1结晶紫水溶液。 20硫酸铜水溶液。（ 2染色法将涂片在空气中自然枯燥。以 1结晶紫水溶液染色 2min不必加热 ，再以

7、 20硫酸铜代水冲洗染液。吸干、镜检。染色后，菌体呈紫色，荚膜呈淡紫色。11 苗列尔氏芽孢染色法（ 1染色液配制媒染液5 铬酸液铬酸5ml，加蒸馏水 95ml染色液石炭酸复红液脱色液2 硫酸液纯硫酸2ml，加蒸馏水 98ml复染液碱性美蓝 2染色法涂片，枯燥，火焰固定，用媒染液染色 10min，充分水洗，用炭酸酸复红液加温染色最好在标本上覆盖一X滤纸 2min，水洗，用脱色剂脱色 10s，水洗，用美蓝液复染 1min，水洗，枯燥、镜检。结果：芽孢呈红色，菌体呈蓝色。专业资料整理WORD格式12孔雀绿沙黄芽孢染色法专业资料整理WORD格式（ 1染色液 5 孔雀绿液， 0.5 沙黄液。（ 2染色法

8、涂片火焰固定，加 5孔雀绿液微微加温染色 30s 1min，至发生蒸气为止，待冷后水洗，再加沙黄液复染 30s，水洗，枯燥后镜检。结果：芽孢呈绿色，菌体其它局部呈淡红色。13李富逊氏鞭毛染色法（ 1染色液配制 5 钾明矾水溶液 10ml，20鞣酸水溶液 10ml，1碱性复红酒杯精溶液 10ml。专业资料整理WORD格式将上述三种溶液按次混合配成，如发生沉淀，用其上清液，本染液保存染液可用以下染液：美蓝0.1g ，硼砂 0.5g1 周，复专业资料整理WORD格式，蒸馏水100ml。专业资料整理WORD格式 2染色法专业资料整理WORD格式所用的载玻片必须十分清洁无油脂、无划痕。可将玻片先浸于重铬

9、酸钾清洁液数天，用镊子取出后以清水冲洗干净冲洗时切勿用手捏玻片，然后斜插于木架上，置 37 度温箱中任其枯燥后备用。菌液最好用 10 16h 的幼年肉汤培养物。假设取自琼脂培养基上的菌落，那么用接种环挑取少许，置蒸馏水中制成轻度混浊的细菌悬液，切忌用接种环多作搅动，以免损伤鞭毛。挑取肉汤培养物或细菌悬液一环，轻置于玻片一滴，玻片作倾斜放置，使菌液沿玻片面顺向下流，自成一薄菌膜，置37 度恒温箱内枯燥。将上述染液滴加于涂片上，染 1015min，染色时间的长短随室温的上下而不同，如在冬季，可置于 37 度温箱内染色。轻轻地水洗12min。在室温或 37 度温箱内任其枯燥后作镜检，细菌菌体及鞭毛呈

10、红色。如需复染色，那么用上述美蓝硼砂复染液在水洗后， 染色 10min，用水冲洗，枯燥后作镜检。菌体呈蓝色，鞭毛呈红色。专业资料整理WORD格式良好的鞭毛染色涂片， 应在显微镜的视野中见到大局部细菌菌体均附有鞭毛。14 过碘酸锡夫氏真菌染色法 1染色液配制甲液： 1过碘酸液乙液：碱性复红0.1g ， 95乙醇 5ml，蒸馏水 95ml丙液：亚硫酸氢锌1g，酒石酸 0.5g，蒸馏水 100ml丁液： 1.22 饱和苦味酸液2染色法将标本在甲液中染 10min，水洗后再用乙液染 23min，置丙液中染 30 40min，至玻片呈淡红色为适宜，水洗 1min，再置于丁液中染 3min。充分水洗至无黄色液体为止。脱水、透明，树胶封固后镜检。结果：真菌组织染色鲜红色。15 中国蓝真菌染色法 1染色液纯石炭酸 20ml，乳酸 20ml，甘油 40ml，蒸馏水 20ml。将上述成分混合，加温溶解后参加中国蓝0.05g ，混合振荡即成。 2染色法先将染色液加在载玻片上，将培养物被检样放在玻片上的染色液中，涂匀后覆盖盖玻片，微加温后镜检。16黑色素螺旋体染色法 1染色液配制黑色素 5g，蒸馏水 50ml。混合加热使其溶解， 在溶液中加1福尔马林作防腐剂，临用前过滤。 2