夹心法双对数向平滑曲线的转换(精)

1、夹心法双对数向平滑曲线的转换前面提到回归拟合要求指标人2必须大于0.9。这是一个最基本的要求，人2越接近于1,表示浓度与吸光值的线性关系越好，标本检测结果的相关性越好。我们的出厂指标要求在0.99以上。最基本的拟合方式是双对数拟合方式与logit拟合方式。这都是直线拟合的。但有时侯推荐的拟合方式并不是最适用的。本节讲的是利用曲线回归方式来改善检测结果。夹心法实验一般采用log-log双对数直线模型。如下面AFP例子所示。回归商£1合模型直线回7扌n除本嵐国|0.005豳据列迫0（据列回归冲以合回退出旦234567a91011IZ13141516IT1819X紳度/剤量）|t血应值）1

2、02040001603200 1260 2060 3590,6301.0541.879清除囚I标准品SoSiS2S3S4S5S6浓度ng/ml010204080160320吸光值0.0050.1260.2060.3590.6881.0541.879按照第一种模型-双对数直线模型进行计算。ELISA Calc回归/按會计算畏序-v 0, 1点击“回归/拟合”回归对$合篠型（MI直线回归直娥回a方程：厂a + b*xa=-i.Tieizb=0.79613r ?=Q. 99805 n 厶、"L _La 1I .r. > .-ri-i w亠亠亠亠亠_丄八 r 人、7/查看方程参数，点击

3、 回归方程。r''2=0.99805，拟合效果非常好。ELI5A Calc回归/按舍计笫程序-* （L 1区poor圖ffi®F芒叩，T二J为名f值名1 ffi曲钱（E冋吒订程1由Vi+算X1 *xi+®Y 1复制©1,? llf'l 1退出（Q帮勖HLXT-反应值T-平均值CVC%）Y-计算值Y-残差1.0000-0.9172-0.9220-0. 00481. 3010-0.Gsee-0.66230.01451.6021-0.4510-0.44270.00331.S031-CL 1656-0.2030-0. 03742.20410.020

4、80. 03660.01592 50510.27280.27630.0035和E C.00197但由于实验室条件差异，有些实验室会出现吸光值偏高。标准品吸光值如下表:标准品SoSiS2S3S4S5S6浓度ng/ml010204080160320吸光值0.0100.1960.3680.6151.0281.8542.379如果仍按照上面的双对数直线方程进行拟合，会出现下面的曲线:观察曲线，S5, S6处有点平，似乎略呈 S形。检查方程参数，人2 = 0.98921。如果标本 吸光值为0.6，计算浓度为 40.99ng/ml。标本吸光值为1.8时，计算浓度为180.6ng/ml。我们可以采用曲线拟合

5、方式来改善结果。首先选用logistic曲线1。这时左侧“ X数据列”及“ 丫数据列”处要改作不转换。如 果查看回归方程参数，可以发现人2 = 0.99883。这一曲线相关性非常好，标本吸光值为0.6 时，计算浓度41.5ng/ml，标本吸光值为1.8时，计算浓度为154.7ng/ml。我们可以看到，高 吸光值的标本浓度变化较大，而低吸光值区的标本浓度变化较小。这是因为我们上面的畸点S5，S6属于高浓度区。ELISA Calc回归/扱會计算程序-p 0. 1回归卅以合檯型也1|1_091或iu曲线担mlr使用Lcgi或ic的一韻来弍应F含有當数匪P煮障£近®丽冇 蜜据列|T

6、T t：4 _2 名pH名fTS躅据列回归方程（B数据输A(R)I llllll -IIII复制ISi('i退出Q同样也可以采用logistic曲线2 （四参数）来进行拟合。效果差不多。 略差一些。=0.99715。ELISA Calc回归/須合计算程序-v 0, 1回归內QI Log毗融拟合2四参数二J礙据列1 n-'/A3 11 坯旦3名pi '名压慟据列但用logistic曲线拟合3 （五参数）时，计算出错，未能形成曲线。ELISA Calc回归/按會计算程瘁-p 0, 1回归对Q合檯型（Ml LogiEtiufc线拟合3 五参數严1浸据列0归方程旧A! . 数据输入E)复制©*' ilHl追出也帮助HL3 1!，.!. 111111111111111 _ ± J-4H1riHH:4441ri44*1111111111111111111-*-*T*1ri44R