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文档简介
1、蓝色海洋书的海洋产单核细胞李斯特菌与红斑丹毒丝菌 一、产单核细胞李斯特菌 产单核细胞李斯特菌(listeria. monocytogenes)属于李斯特菌属。本菌属还包括伊氏李斯特菌(l.ivanovii)、格氏李斯特菌(l.grayi)、威氏李斯特菌(l.wel shimeri)等菌种,引起人和动物疾病的主要是产单核细胞李斯特菌。(一)生物学特性1形态结构 革兰阳性短小杆菌,大小为(0.40.5) um×(1.02.0) um,直或微弯,常呈v形成双罗列,偶可见呈双球状。有鞭毛,在25运动活泼,35时动力缓慢,不产生芽胞,普通不形成荚膜,在含血清的蛋白胨水中能形成黏多糖荚膜。幼龄培
2、养物为革兰阳性,陈旧培养物可转为革兰阴性,呈两极着色,易误认为是双球菌。2培养特性本菌为兼性厌氧菌,养分要求不高,在一般培养基上生长良好,在含有血液、血清、腹腔积液等培养基上生长更好。在血琼脂平板上于35培养1824 h,可形成较小、圆形、光洁的灰白色菌落,有狭窄溶血环,往往需要把菌落刮去才可见菌落下面的溶血环。在肉汤培养基中匀称混浊生长,表面有菌膜形成。接种于半固体培养基内,置室温孵育可浮现倒伞形生长。在445均能生长,最适生长温度为3037。因为其在4能生长故可举行冷增菌。3生化反应分解、麦芽糖、鼠李糖、,产酸不产气,、甲基红和vp实验阳性,触酶阳性,不分解、木糖、蔗糖,、脲酶、硝酸盐还原
3、阴性。4抗原成分按照菌体及鞭毛抗原的不同,将其分为4个血清型和多个亚型。型主要感染啮齿类动物,4型主要感染反刍类动物。各型对人类均可致病,以1a,2b和4b亚型最为多见,4b亚型毒力最强。本菌与葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌及大肠埃希菌等有共同抗原。5反抗力在土壤、粪便、青储饲料和干草中能长久存活。本菌耐盐(于200 g/l nacl溶液中长久存活)、耐碱(于25 g/l naoh溶液中20 min才干杀灭),对酸、对热较为敏感,6070加热520 min可死亡。对常用消毒剂敏感,25 g/l苯酚,70的5 min即可杀灭本菌。(二)临床意义产单核细胞李斯特菌广泛分布于水、土壤,也可存在于人和动
4、物粪便中。常陪同eb病毒引起传染性单核细胞增多症,也可引起脑膜炎、败血症及流产。易感者为新生儿、孕妇及免疫功能低下者,且感染后死亡率较高。也可因污染奶制品等引起食物中毒。健康带菌者是本病的主要传染源,传扬途径主要为粪-口传扬,也可通过胎盘和产道感染新生儿;与病畜接触可致眼和皮肤的局部感染。产单核细胞李斯特菌的致病物质主要为李斯特溶素和菌体表面成分。本菌为胞内寄生菌,主要依赖细胞免疫将其清除。产单核细胞李斯特菌尚能引起鱼类、鸟类和哺乳动物疾病,引起牛、绵羊的脑膜炎、家畜流产等。(三)微生物学检查1标本采集按照感染部位的不同可采集不同标本,如血液、脑脊液、呕吐物、粪便、分泌物、新生儿脐带残端、羊水
5、等。2挺直显微镜检查取标本涂片、挺直显微镜检查,可见本菌为革兰阳性短小杆菌,常呈v字形罗列,偶可见双球状。无芽胞,无荚膜。3分别培养取血液或脑脊液离心沉淀物接种于2支心脑浸液培养基,一支置10co2环境35培养,24 h,48 h各转种血琼脂平板或萘啶酸挑选性琼脂平板一次;另一支置4培养,每24 h做一次平板分别,延续4次,以后每周分别一次,起码4周,用冷增菌法可提高阳性率。分泌物、组织悬液、粪便等可挺直划线分别,也可置4培养增菌后再分别,培养后观看菌落特征。4鉴定本菌特征:革兰阳性短杆菌,菌落较小,有狭窄的溶血环;25有动力,35无动力或动力缓慢。触酶阳性,camp实验阳性,分解葡萄糖、水杨
6、苷、七叶苷,硝酸盐还原阴性。李斯特菌属常见菌种的主要特征见表22-2,须要时作血清学鉴定与分型。表22-2李斯特菌属常见菌种的主要特征注;v表示1189菌株阳性,na表示无资料。产单核细胞李斯特菌可能因培养条件不同而呈链状,35培养时动力阴性,camp实验阳性,常误判为无乳链球菌,可用触酶实验举行鉴别:链球菌触酶实验阴性,产单核细胞李斯特菌为阳性。本菌具有耐盐、耐碱、耐胆汁的特点,易被误判为粪肠球菌,亦可用触酶实验加以鉴别。幼龄培养物呈革兰阳性,培养48 h后多转为革兰阴性,因此,当碰到25培养有动力的杆菌而不符合革兰阴性杆菌时,应考虑到产单核细胞李斯特菌。产单核细胞李斯特菌与红斑丹毒丝菌、棒
7、状杆菌鉴别见表22-3。表22-3产单核细胞李斯特菌与红斑丹毒丝、棒状杆菌的鉴别注:v表示1189菌株阳性。二、红斑丹毒丝菌红斑丹毒丝菌(e.rhusiopathiae)属于丹毒丝菌属(erysipelothrix),是丹毒丝菌属中的代表菌种。(一)生物学特性为革兰阳性菌,与放线菌的形态相像,易被脱色呈阴性。光洁型菌落涂片镜下可见菌体呈杆状、球杆状或瘦长、直或弯曲,单个存在或形成链状,杆状菌体大小为(0.20.4)um×(1.02.0)um;粗糙型菌落涂片可呈长链丝状或分枝状,与放线菌相像。无芽胞、无鞭毛、无荚膜。兼性厌氧,初次分别在5co2环境、在含有葡萄糖或血清的培养基中生长旺盛
8、。在血琼脂平板上35培养2448 h后可形成两种菌落。光洁(s)型菌落:菌落细小、圆形、光洁、透亮、凸起、边缘整齐,质软,易混悬于液体中,毒力较强。粗糙(r)型菌落:菌落较大,表面呈颗粒状、扁平、不透亮、边缘不整齐,呈溶血或不溶血。在亚碲酸钾血琼脂平板上,形成黑色菌落。在半固体琼脂表面下数毫米处发育最佳,常呈带状。在葡萄糖肉汤中轻微混浊生长,底层有少量沉淀。能分解葡萄糖、乳糖、阿拉伯糖,不分解和蔗糖,精氨酸双水解酶实验阳性,明胶、胆汁七叶苷、脲酶、触酶、硝酸盐还原实验均为阴性。在三糖铁(tsi)培养基中可产生h2s是该菌的特点。本菌对湿热及常用消毒剂敏感。但对苯酚的反抗力较强,在5 g/l的中
9、可以存活90多天,故可利用此法处理污染的标本,提高分别率。另外,红斑丹毒丝菌对盐、腐败、干燥和日光有一定的耐受性,与该菌的传扬有关。(二)临床意义红斑丹毒丝菌广泛存在于自然界,是人畜共患病的病原菌之一。红斑丹毒丝菌引起的红斑丹毒丝菌病是一种急性传染病,主要发生在家畜、家禽和鱼类,人类主要因接触带菌动物(经破损皮肤)而感染。感染后局部可浮现皮肤红肿、痛苦或有痒感,继而可进展成淋巴管炎,称为类丹毒。也可引起急性败血症或心内膜炎。本菌若污染奶及奶制品也可引起食物中毒。红斑丹毒丝菌可产生透亮质酸酶而使血管通透性增高,神经氨酸酶可促使dic形成,导致微循环障碍,发生酸中毒、出血和休克。(三)微生物学检查
10、1标本采集疑似败血症或心内膜炎患者可采集血液,其他患者可采集皮肤病灶局部的脓液或渗出液。受损部位的组织是检测类丹毒的最佳标本。2挺直显微镜检查镜检可见革兰阳性瘦长杆菌,有分枝及断裂,形态似放线菌。该菌易被脱色而呈革兰阴性杆菌,其间夹杂革兰阳性颗粒。3分别培养局部感染标本可挺直接种于血琼脂平板或将标本接种于含1葡萄糖的养分肉汤中,置于5co2环境,35增菌培养,然后用含5兔血的心浸液琼脂平板或血琼脂平板举行分别培养。血液标本需先增菌再以血琼脂平板举行分别培养。4鉴定红斑丹毒丝菌的主要特征:革兰阳性瘦长杆菌,在血琼脂平板上形成细小、光洁型菌落或较大粗颗粒型菌落,无动力,触酶、氧化酶阴性,能分解葡萄糖和阿拉伯糖,胆汁七叶苷,vp,吲哚阴性,在tsi中可产h2s。与产单核细胞李斯特菌鉴别的主要依据:红斑丹毒丝菌分解阿
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