喘息灵胶囊Ⅰ（含马兜铃）和喘息灵胶囊Ⅱ（不含马兜铃）平喘作用的比较

1、喘息灵胶囊i （含马兜铃）和喘息灵胶囊ii （不含马兜铃）平喘作用的比较:邓元荣，谢振家，刘诗洪，邱腾颖【摘要】 目的比较喘息灵胶囊i （原方，含马兜铃）和ii （新 方，不含马兜铃）的平喘作用。方法用豚鼠喷雾致喘法和豚鼠离体 气管螺条法比较喘息灵胶囊二个样品的平喘作用，用量反应六点法 计算 其效价比。结果喘息灵胶囊二个样品3个剂量均能明显延长 哮喘潜伏期并对离体气管平滑肌具有松弛作用；豚鼠喷雾致喘法的 效价比i : 11=1 : 0.97 （95%可信限为0.47-1.47）,豚鼠离体气 管螺条法的效价比i : 11=1 ： 0.98 （95%可信限为0.761.20）。 结论 喘息灵胶囊i

2、 （原方）和ii （新方）均有明显的平喘作用， 二个样品的效价相当。【关键词】 喘息灵胶囊i、ii;马兜铃；平喘作用；喷雾致喘 法；离体气管螺条法abstract:objective chuanxiling capsules i debilis sieb. et zuccto pare the anti(original prescription,)and chuanxilingasthmatic effects of containing aristolochia capsules ii (modifiedprescription, not containing aristolochia d

3、ebilis sieb. et zucc) methods the antitussive effects of chuanxiling capules i and ii ethod of spray induced asthma on the guinea pigs and the method of in vitro trachea on the guinea pigs, and calculate the potency ratios ethod of dosage reaction. results all the three doses of the tples can prolon

4、g the animal' s cough latent period and relieve the in vitro trachea smooth muscle. the potency ratio under the method of spray induced asthma is i ： 11 = 1 ： 0.97 (95% confidence interval is 0.471.47). and the ratio under the method of in vitro trachea is i ： ii = 1 ： 0.98 (95% confidence inter

5、val is 0.76 1.20). conclusion both chuanxiling capsules i and ii have the obvious anti asthma effect and their potency ratios are almost the samekey a effect ； method of spray induced asthma ； in vitro trachea喘息灵胶囊是由中药（含马兜铃等）和化学药组成的中西夯复 方制剂，经国家批准1,临床用于治疗哮喘，以缓解气喘、咳 嗽、咳痰等症状，疗效确切。近年来，由于有关马兜铃引起慢性肾 损害的报道

6、及许多国家对马兜铃的禁用2,故拟将喘息灵胶囊中 的马兜铃去除，观测其对平喘、止咳和祛痰的影响。本研究通过豚 鼠喷雾致喘法实验和豚鼠离体气管螺条法实验观察喘息灵胶囊i（原方，含马兜铃）和胶囊ii （新方，去马兜铃）的平喘作用，并 比较两药在平喘作用上的差异。1实验材料1.1动物 豚鼠100只,体质量300400 g,雌雄各半，清洁级， 由上海申旺实验动物养殖场提供，许可证号：scxk （7）2002-0012, 合格证号:n0007262；实验动物室，福建卫生职业技术学院屏障系 统动物实验室（syxk（闽）20060004）。1.2试剂与仪器喘息灵胶囊i （原方），规格:0.29 g/粒（含马兜

7、 铃30 mg）,批号:050101。喘息灵胶囊ii （新方），规格:0.26 0粒（去马 兜铃），批号:050109o试验中两药等效剂量比为1 ：0.9,均为中试产 品，由厦门建发制药有限公司提供。磷酸组胺，5妙瓶，上海国药集 团化学试剂有限公司提供，批号:f20041224o氨茶碱，上海一平制药 有限公司提供，批号：20040529c氯乙酰胆碱,5 g/片，上海国药集团 化学试剂有限公司提供，批号:lot.no.6240-bd生物信号采集分析系 统，成都仪器厂生产。1.3统计学处理用spss 13.0进行统计分析，用单因素方差分析和生物六点法 方差分析，p<0.05为差异有显

8、著性。2方法与结果2豚鼠喷雾致喘法3筛选豚鼠：取健康豚鼠，用多功能 雾化器将0.1%磷酸组胺和1.0%氯乙酰胆碱等容积混合液以2 ml/min流速向密封玻璃容器（容积4 000 ml）开始喷雾，到玻璃容 器内全部充满白色雾为准，将豚鼠放入其中接受喷雾15 s,喷雾终 止，立即取出豚鼠，记录自喷雾起出现哮喘的潜伏期。哮喘分级： i.呼吸加速;ii呼吸困难;iii.抽搐;iv.翻倒。以iv翻倒为标准，潜伏 期以120 s为限，超过者认为不敏感，弃除（注：动物一出现抽搐， 即拉开箱门取出动物，以免动物因窒息而死亡）。次日实验取合格豚鼠82只，体质量300400 g,雌雄各半，随 机分为8组：阴性对照

9、组12只，其余各组10只。各给药组按剂量 灌胃给药，灌胃容积均为15 ml/100 g bg kg-lo末次给药前各组 动物禁食给水12 h。末次给药后1 h,让豚鼠接受喷雾刺激，方法同 前筛选实验，记录自喷雾起岀现哮喘的潜伏期。哮喘以iv翻倒为标 准。每组动物均按以上方法同样操作，每组试验结束后，必须更换 溶液，以免影响因浓度而产生误差。结果见表13。从表1可见，喘息灵胶囊i和ii的3个剂量对0.1%磷酸组胺和 1.0%氯乙酰胆碱致豚鼠气管痉挛所引起的哮喘有明显延长哮喘发生 潜伏期作用，与生理盐水组比较差异有显著性（p<0.01）,说明具 有平喘作用。表1喘息灵胶囊i和ii对豚

10、鼠喷雾致喘法的影响（略）tab.l the parison of the effects of chuanxiling capsules i and ii on the guinea pigs ethod of spray induced asthma与生理盐水组比较：*p<ool表2喘息灵胶囊i和ii对豚鼠喷雾致喘法六点法方差分析 （略）tab.2 the variance analysis of six point method applied on chuanxiling capsules i and ii on the guinea pigs ethod of spray

11、 induced asthma表3喘息灵胶囊i和ii对豚鼠喷雾致喘法效价比较（略）tab.3 the potency ratios of chuanxiling capsules i and ii on the guinea pigs ethod of spray induced asthma从表2可见，喘息灵胶囊i和ii二个药物间的变异无显著性 （p>0.05）,说明两药作用强度差别无显著性；回归间和组间变 异有显著性（p<o.ol）,说明实验剂量比值及实验组安排妥当； 偏离平行、二次曲线及反向二次曲线检验无显著性（p>oo5）, 说明两药的量效曲线

12、无二次曲线关系和反向曲线关系，两线呈直线 平行关系，可以计算效价。综上所述，可见本实验的可靠性检查是 合格可靠的，因此可进行可信限计算。分析结果表3表明，喘息灵胶囊i和ii二个药品，对哮喘潜伏 期延长率作用的效价比i : ii二1 : 0.97 （95%可信限为0.47- 1.47） o2.2离体气管平滑肌螺旋条收缩实验32.2.1药物的配制 实验前24 h取喘息灵i和ii各10.0 g和8.9 g,分别加克氏液（ph-7.1） 100 ml,配成浓度为10%与8.9%溶 液，放入詔°c冰箱内进行浸泡保存备用。次日离心取上清液并在取 得的上清液基础上再用克氏液稀释10倍，即为1.0%

13、与0.89%的受 试药物溶液，测量其ph值分别为6.0和5.9o实验时分别取1.25. 0.625、0.312 ml的受试药物溶液到容量为30 ml麦氏浴槽中，喘息 灵胶囊i给药3剂量组的终浓度为4.167 x 10-4> 2.083 x 10-4.1.042 x 10-4 g/l,喘息灵胶囊ii给药3剂量组的终浓度为2.967x10- 4、1.483xi0-4> 0.742x10-4 g/l。阴性组给予克氏液,阳性组给予 盐酸异丙肾上腺素。2.2.2离体气管平滑肌螺旋条的制备取400500 g豚鼠，击 昏，立即剪开颈部皮肤，分离气管，从屮状软骨下至气管下端分叉 处将整段气管剪下，

14、置含氧的k h （krebs henseleit）液的培养皿中，细心剔除气管周围的结缔组织，将气管剪成螺旋条状，宽 度以23个气管环为宜(一段气管可制成23个螺旋条，采用拉 氏浴槽内用(37±0.5)°ck h液30 ml灌注，通入氧气。开启 rm6240 bd多道生理信号采集分析系统，设置仪器参数，静止丁法选取螺旋条做实验)。定于容量为30 ml麦氏浴槽中,在麦负荷为1 g,灵敏度为1 g,走纸速度为10.0 s/div (0.5 mm/s)。2.2.3实验方法 离体气管平滑肌螺旋条固定于麦氏浴槽中，描 记正常曲线30 min,加入0.1%磷酸组胺0.05 ml (终浓度

15、5.0x10-7 mmol l-1)刺激，使气管平滑肌呈收缩状态，待收缩到平稳时，给 予各受试药品，此时开始记录时间并描记5 min曲线，然后 计算 抑制白分率。各受试药物试验顺序采用拉丁法排序，方法同前。结 果见表4-6 o抑制率二(给药前曲线高度给药后曲线高度)/给药前曲线高 度 x100%表4喘息灵胶囊i和ii对离体气管平滑肌螺旋条收缩抑制的影 响(略)tab.4 the inhibitory effects of chuanxiling capsules i and ii on contracting of in vitro trachea smooth muscle与克氏液组比较：*

16、p<0.01从表4可见，喘息灵胶囊i和ii的3个剂量对0.1%磷酸组胺致 豚鼠离体气管平滑肌螺旋条收缩有明显抑制作用，与克氏液组比较 差异有显著性(p<0.01),说明具有解除气管平滑肌痉挛作用。从表5可见，喘息灵胶囊i和ii二个药品间的变异无显著意义 (p>0.05),说明两药作用强度差别无显著性；回归和组间变异 有显著意义(p<0.01),说明实验剂量比值及实验组安排妥当； 偏离平行、二次曲线及反向二次曲线检验无显著意义 (p>0.05),说明两药的量效曲线无二次曲线关系和反向曲线关 系，两线呈直线平行关系，可以计算效价

17、。综上所述，可见本实验 的可靠性检查是合格可靠的，因此可进行可信限计算。分析结果表6表明，喘息灵胶囊i和ii对豚鼠离体气管平滑肌 螺旋条收缩抑制作用的效价比，i ： ii = 1 : 0.98 (95%可信限为 0.76-1.20) o表5喘息灵胶囊i和ii对离体气管平滑肌螺旋条收缩抑制六点 法方羌分析(略)tab.5 the variance analysis of six point method applied onchuanxiling capsules i and ii on in vitro trachea smooth muscle表6喘息灵胶囊i和ii对离体气管平滑肌螺旋条收缩抑制的效 价结果（略）tab.6 the potency result of the inhibitory effects of chuanxiling capsules i and ii on contracting of in vitro trachea smooth muscle2.3最大耐受量（mtd）和最大给药量测定4取昆明小鼠 60只，雌雄各半，随机分为3组，阴性对照组、喘息灵