病毒与亚病毒经典实用

1、病毒与亚病毒第四章第四章 病毒与亚病毒病毒与亚病毒 病毒与亚病毒非细胞生物分成病毒和亚病毒非细胞生物分成病毒和亚病毒 病毒与亚病毒第一节第一节 病毒的形态、结构与功能病毒的形态、结构与功能一、一、 病毒的一般特性病毒的一般特性病毒（病毒（virusvirus）是一类比细菌更小，能通）是一类比细菌更小，能通过细菌过滤器，仅含一种类型核酸（或过细菌过滤器，仅含一种类型核酸（或dnadna或或rnarna），只能在活细胞内生长繁殖的），只能在活细胞内生长繁殖的非细胞形态的微生物。非细胞形态的微生物。病毒与亚病毒病毒的基本特点病毒的基本特点个体极小，能通过滤菌器，形态多样，有球状、杆状、复合型。个体极

2、小，能通过滤菌器，形态多样，有球状、杆状、复合型。无细胞结构，主要由蛋白质、核酸构成，一个病毒体内仅含一种无细胞结构，主要由蛋白质、核酸构成，一个病毒体内仅含一种核酸，核酸以单链或双链形式存在。核酸，核酸以单链或双链形式存在。生活方式为专性活细胞内寄生，病毒酶系不全，离开活体后无生生活方式为专性活细胞内寄生，病毒酶系不全，离开活体后无生命特征。命特征。病毒以复制的方式增殖病毒以复制的方式增殖,包括核酸复制、核酸蛋白质装配。包括核酸复制、核酸蛋白质装配。对抗生素不敏感，对干扰素敏感。对抗生素不敏感，对干扰素敏感。病毒与亚病毒二、病毒的形态构造及化学组成二、病毒的形态构造及化学组成1 1、形态、形

3、态病毒粒子：成熟的、完整的、具有感染性的病毒颗粒。病毒粒子：成熟的、完整的、具有感染性的病毒颗粒。病毒与亚病毒衣衣 壳壳核核 酸酸包膜包膜刺刺 突突核衣壳2 2、病毒的基本结构：、病毒的基本结构：病毒与亚病毒病毒与亚病毒3病病毒毒的的对对称称 三类典型形态的病毒：三类典型形态的病毒：廿面体对称廿面体对称的结构的结构( (球状球状) ) 螺旋对称螺旋对称的结构的结构( (杆状杆状) ) 复合对称复合对称的结构的结构( (蝌蚪状蝌蚪状) )大肠杆菌的大肠杆菌的t t偶数噬菌体是由偶数噬菌体是由椭圆形的二十面体头部和螺旋椭圆形的二十面体头部和螺旋对称的尾部组合而成，是病毒对称的尾部组合而成，是病毒中

4、复合对称的代表。中复合对称的代表。病毒与亚病毒螺旋对称的病毒粒子螺旋对称的病毒粒子tobacco mosaic virus病毒与亚病毒二十面体对称病毒粒子二十面体对称病毒粒子病毒与亚病毒病毒与亚病毒复合对称的病毒粒子复合对称的病毒粒子t4 bacteriophage病毒与亚病毒三、三、噬菌体噬菌体病毒种类很多，根据病毒寄生的对象来分，有植病毒种类很多，根据病毒寄生的对象来分，有植物病毒、动物病毒和微生物病毒。物病毒、动物病毒和微生物病毒。噬菌体：噬菌体：是病毒中的一种，一般把侵染细菌、放是病毒中的一种，一般把侵染细菌、放线菌的病毒叫噬菌体。（把侵染真菌的病毒叫噬线菌的病毒叫噬菌体。（把侵染真菌

5、的病毒叫噬真菌体）真菌体）据据bradley(1967)归纳，噬菌体共有六类形态。归纳，噬菌体共有六类形态。病毒与亚病毒1、组成：、组成：主要由蛋白质和核酸组成。主要由蛋白质和核酸组成。2、基本形态：、基本形态：蝌蚪形、微球形和纤丝形。蝌蚪形、微球形和纤丝形。（一）噬菌体的形态结构与组成（一）噬菌体的形态结构与组成病毒与亚病毒以以大肠杆菌大肠杆菌t4噬菌体噬菌体为例为例头部：头部：廿面体对称结构，由蛋白廿面体对称结构，由蛋白质衣壳构成，内含一条质衣壳构成，内含一条dnadna。颈部：颈部：薄盘状，附颈须。薄盘状，附颈须。尾鞘：尾鞘：长长95nm, 95nm, 衣壳粒螺旋对称；衣壳粒螺旋对称；可

6、伸缩。可伸缩。 尾髓尾髓: :中空，中空，dnadna可由此进入细胞。可由此进入细胞。基板基板: : 六角形盘状物，其上有刺六角形盘状物，其上有刺突、尾丝。突、尾丝。刺突刺突: : 有吸附功能。有吸附功能。尾丝尾丝: : 有识别吸附功能。有识别吸附功能。大肠杆菌大肠杆菌t4t4噬菌体构造噬菌体构造蝌蚪形噬菌体的构造蝌蚪形噬菌体的构造病毒与亚病毒（二）、噬菌体（二）、噬菌体(phage)的繁殖的繁殖 感染细胞后感染细胞后, ,能在寄主细胞内增殖，产生大量子代能在寄主细胞内增殖，产生大量子代噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体。噬菌体并引起细菌裂解的噬菌体。烈性噬菌体（烈性噬菌体（virulent pha

7、gevirulent phage） 噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（插入）到宿主噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（插入）到宿主的核的核dna上，并且可以随宿主上，并且可以随宿主dna的复制而进行同步的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。温和噬菌体（温和噬菌体（temperate phragetemperate phrage）病毒与亚病毒1. 烈性噬菌体烈性噬菌体的繁殖的繁殖病毒与亚病毒fig. 2: penetration fig. 1: adsorption 病毒与亚病毒fig. 4: late replication

8、fig. 3: early replication 病毒与亚病毒fig. 6: release fig. 5: maturation 病毒与亚病毒animation of the lytic life cycle of a bacteriophageanimation of the lytic life cycle of a bacteriophage病毒与亚病毒病毒与亚病毒phage t4 infecting its host e. coli cell 病毒与亚病毒噬菌斑与噬菌体效价病毒与亚病毒噬菌斑噬菌斑 将少量噬菌体与大量敏感菌将少量噬菌体与大量敏感菌混合培养在营养琼脂中，在平板混合培养

9、在营养琼脂中，在平板表面布满宿主细胞的菌苔上表面布满宿主细胞的菌苔上,可可以用肉眼看到一个个透明的不长以用肉眼看到一个个透明的不长菌的小圆斑，称为噬菌斑。菌的小圆斑，称为噬菌斑。(每每个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子个噬菌斑一般由一个噬菌体粒子形成的。形成的。)噬菌体效价的测定噬菌体效价的测定 n效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子数，也即噬菌斑形成单位（数，也即噬菌斑形成单位（pfu）数或感染中心数。）数或感染中心数。效价效价病毒与亚病毒单层平板法单层平板法双层平板法双层平板法电镜计数电镜计数病毒与亚病毒噬菌体一步生长曲线噬菌体一步生长曲线

10、 none-step growth curveone-step growth curve 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，观察一群噬菌体感定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线，观察一群噬菌体感染一群细胞所发生的变化。染一群细胞所发生的变化。 n测定一步生长曲线的步骤测定一步生长曲线的步骤用噬菌体的稀悬液去感染高浓度的宿主细胞，以保证每个细胞至用噬菌体的稀悬液去感染高浓度的宿主细胞，以保证每个细胞至 多不超过一个噬菌体吸附。多不超过一个噬菌体吸附。混合液中加入定量的噬菌体的抗血清，中和尚未吸附的噬菌体。混合液中加入定量的噬菌体的抗血清，中和尚未吸附的噬菌体。用培养液稀释混合液，中止抗血清的

11、作用，适温培养。用培养液稀释混合液，中止抗血清的作用，适温培养。间断样进行效价测定，得一曲线。间断样进行效价测定，得一曲线。 病毒与亚病毒一一步步生生长长曲曲线线病毒与亚病毒 2 2、温和噬菌体与溶源性细菌、温和噬菌体与溶源性细菌温和噬菌体：温和噬菌体：噬菌体感染细胞后，将其核噬菌体感染细胞后，将其核酸整合（附着）到宿主的核酸整合（附着）到宿主的核dnadna上，并且可上，并且可以随宿主以随宿主dnadna的复制而进行同步复制，在一的复制而进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。般情况下，不引起寄主细胞裂解的噬菌体。原噬菌体（或前噬菌体）：原噬菌体（或前噬菌体）： 即整合在宿主

12、即整合在宿主核核dnadna上的噬菌体的核酸。上的噬菌体的核酸。 溶原性细菌：溶原性细菌：指在核染色体上整合有原噬指在核染色体上整合有原噬菌体的细菌。可进行正常生长繁殖菌体的细菌。可进行正常生长繁殖, ,而不被而不被裂解。裂解。 病毒与亚病毒温和噬菌体的繁殖温和噬菌体的繁殖病毒与亚病毒病毒与亚病毒检验溶源菌的方法检验溶源菌的方法 病毒与亚病毒病毒与亚病毒四、植物病毒四、植物病毒病毒与亚病毒病毒引起的植物病害特征n1、因叶绿体被破坏或不能合成叶绿素，而使叶片发生花叶、黄化或红化症状。n2、植株发生矮化、丛植或畸形。n3、形成枯斑或坏死。病毒与亚病毒tulip mania 郁金香狂潮郁金香狂潮 n

13、tulip mania or tulipomania was a period in the dutch golden age during which contract prices for bulbs of the recently introduced tulip reached extraordinarily high levels and then suddenly collapsed. at the peak of tulip mania in february 1637, tulip contracts sold for more than 10 times the annual

14、 income of a skilled craftsman. it is generally considered the first recorded speculative bubble (or economic bubble). the term tulip mania is now often used metaphorically to refer to any large economic bubble (when asset prices deviate from intrinsic values). 病毒与亚病毒na tulip, known as the viceroy,

15、displayed in a 1637 dutch catalog. its bulb cost between 3000 and 4200 florins depending on size. a skilled craftsman at the time earned about 300 florins a year 病毒与亚病毒nanonymous 17th-century watercolor of the semper augustus, famous for being the most expensive tulip sold during tulip mania. 病毒与亚病毒

16、五、人类和脊椎动物病毒五、人类和脊椎动物病毒狂犬病病毒狂犬病病毒病毒与亚病毒the influenza virus病毒与亚病毒n甲型流感病毒（influenza a virus），又称a型流感病毒 n乙型流感病毒（influenza b virus），又称b型流感病毒 n丙型流感病毒（influenza c virus），又称c型流感病毒病毒与亚病毒甲型流感病毒抗原变异情况 亚型名称抗原结构流行年代代表病毒株原甲型（a0）h0n119301946a/pr/8/34（hon1）亚甲型（a1）h1n119461957a/fm/1/4/（h1n1）亚洲甲型（a2）h2n219571968a/sing

17、apore/1/57（h2n2）香港亚型（a3）h3n219681977a/hongkong/1/68（h3n2）新a1与a3交替型h3n2 h1n11977至今a/ussr/90/77（h1n1） a/beijing/32/92(h3n2)病毒与亚病毒n流感病毒根据血凝素ha和神经氨酸酶na的抗原性分为不同的亚型 病毒与亚病毒病毒与亚病毒乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒病毒与亚病毒显微镜下的天显微镜下的天花病毒图像花病毒图像 sars病毒图像病毒图像 病毒与亚病毒艾滋病病毒模式图艾滋病病毒模式图 病毒与亚病毒病毒与亚病毒昆虫病毒n昆虫病毒大体经历了3个主要阶段:n证明病毒是许多昆虫疾病的致病因子；n

18、认识昆虫病毒的性质；n研究病毒与宿主之间的相互关系。病毒与亚病毒n核型多角体病毒(npv)，如家蚕npv，棉铃虫npv,松毛虫npv，春尺蠖npv,舞毒蛾npv,斜纹夜蛾npv，粘虫npv 病毒与亚病毒n质型多角体质型多角体病毒，简称cpv。我国对昆虫质型多角体病毒的研究是从家蚕病害的研究开始的，现已在30多种昆虫中发现了质型多角体病毒。病毒与亚病毒n颗粒体病毒(gv)，如黄地老虎gv，菜粉蝶gv,茶小卷叶蛾gv等 病毒与亚病毒第二节第二节 亚病毒亚病毒 凡在核酸和蛋白质两种成分中，只含其中之一的凡在核酸和蛋白质两种成分中，只含其中之一的分子病原体。分子病原体。类病毒拟病毒朊病毒病毒与亚病毒一

19、、类病毒 viroidnelectron microscopic picture of potato spindle tuber viroid (pstvd) nthey solely consist of a small, single-stranded, circular rna, which is not encapsidated in a protein coat. npotato spindle tuber viroid gets its name because of the oblong tubers produced from infected plants.病毒与亚病毒sym

20、ptoms of viroid diseases na: 番茄矮化病, b:鳄梨日斑病 , c:菊矮化病 , d:菊花褪绿斑驳 n这些裸露的rna 分子可以导致许多谷物，水果，观赏植物，严重的病变，例如：马铃薯，番茄，黄瓜，菊花，鳄梨，椰子等 病毒与亚病毒二、拟病毒 virusoid病毒与亚病毒三朊病毒疯牛病朊病毒疯牛病朊病毒病毒与亚病毒第三节第三节 病毒与实践病毒与实践n一、噬菌体与发酵工业一、噬菌体与发酵工业n二、昆虫病毒用于生物防治二、昆虫病毒用于生物防治n三、病毒在基因工程中的应用三、病毒在基因工程中的应用病毒与亚病毒一、噬菌体与发酵工业一、噬菌体与发酵工业n发酵周期明显延长发酵周期明

21、显延长n碳源消耗缓慢发酵液碳源消耗缓慢发酵液清淡清淡n发酵产物形成缓慢或发酵产物形成缓慢或根本不形成根本不形成n噬菌体检测会发现大噬菌体检测会发现大量噬菌斑量噬菌斑n电镜可看到噬菌体电镜可看到噬菌体n后果：后果：减产减产 倒罐倒罐 病毒与亚病毒补救方法：尽快提取产品 加药抑制 及时更换菌种 发酵生产时预防措施n决不使用可疑菌种n严格环境卫生n活菌液严禁排放n通气加料严控n轮换使用生产菌株；n设备灭菌n使用抗噬菌体菌株病毒与亚病毒噬菌体的应用n1. 用于鉴定细菌的分型；n2. 分子生物学领域的重要实验工具和最理想的材料；n3. 用于预防和治疗传染性疾病；n4. 用于筛选抗癌物质和检测致癌 物质；

22、n5. 测定辐射剂量；病毒与亚病毒三、病毒在基因工程中的应用三、病毒在基因工程中的应用n噬菌体作为原核生物基因工程的载体噬菌体作为原核生物基因工程的载体n植物植物dna病毒作为植物基因工程的载体病毒作为植物基因工程的载体n动物动物dna病毒作为动物基因工程的载体病毒作为动物基因工程的载体n昆虫昆虫dna病毒作为真核生物基因工程的载体病毒作为真核生物基因工程的载体病毒与亚病毒三、病毒在基因工程中的应用三、病毒在基因工程中的应用n噬菌体可作为原核生物基因工程的优良载体，将外源目的基因导入到合适的受体细胞，从而获得具有新性状的 “工程菌”ne.coli的噬菌体包括：必需基因参与生命活动；非必需基因不影响生命活动，可被外源dna代替n载有外源遗传因子的重组噬菌体可整合在宿主核基因组上，两者以