组织胚胎学实验教学中浦肯野纤维组织切片的制作

1、组织胚胎学实验教学中浦肯野纤维组织切片的制作捷克的科学家 Purkinje 于 1839 年在绵羊心脏心室的心内膜 下发现了灰色、扁平、胶状的纤维网（后称浦肯野纤维）， 1906 年 Tawara 通过研究将这些纤维网称为心脏的传导系统，包括窦 房结、房室结、希氏束、左右束支及其分支组成，担负着心脏起 搏和传导冲动的功能，保证心房心室协同收缩 1-2 。组织胚胎学是农业高等院校水产养殖学、 动物科学、 动物医 学等专业的基础课程， 组织学部分主要研究动物体的组织结构与 功能，胚胎学部分主要研究动物体器官系统的发生与发育规律。 组织胚胎学实验是组织胚胎学的重要组成部分。 它是在理论讲授 的基础上

2、，通过实验观察，使学生掌握动物体的微细结构，并能 从细胞、组织和器官 3 个层次上对鱼类有机体的形态结构与功能 有一个总体认识。 通过胚胎实验课， 使学生掌握普通胚胎学基础 知识及动物发生的一般规律。通过实验特别是 1 周的综合实验， 使学生掌握生物绘图、切片、染色等基本技能或能力，为以后的 生产实践和科学研究打下坚实的基础。 目前， 实验教学以组织切 片为主，因而准备好动物体的每个器官系统的组织切片至关重 要。近年来，组织胚胎学的教学学时大幅缩减，出现“学时少， 内容多”的现象， 教学中亦缺少好的示教片。 这些问题严重影响 学生学习本课程的兴趣与自觉性， 教学质量堪忧。 本文旨在介绍 为学生

3、提供普通心肌纤维与浦肯野纤维的组织切片的方法， 让学 生形象地掌握普通心肌纤维与浦肯野纤维的差别 3-5 。1 实验方法取健康猪心 1 颗，购自阿拉尔市塔里木大学农贸市场。 取心 室左右束支大小适中的组织固定于波恩氏液中 36 h ，梯度酒精 脱水，二甲苯透明处理，石蜡包埋，连续切片，HE染色，中性树胶封片，在 Nikon 显微镜下观察拍照。载玻片的清洗：将新的 载玻片放入洗衣粉或肥皂水中煮沸 20 min ；玻片上的污物用热 水洗去；用自来水反复冲洗若干次，再用蒸馏水冲洗3 遍，随后保存于无水乙醇中； 切片前用眼镜布擦干载玻片上的无水乙醇备 用。2 实验结果组织学观察可见心内膜由内皮、 内皮

4、下层、心内膜下层组成。 内皮为单层扁平上皮，细胞界限不清，细胞核呈椭圆形，胞质较 少，核的部位隆起；内皮下层是由一层较薄的结缔组织组成；心 内膜下层则由疏松结缔组织组成， 其中含有丰富的血管、 神经和 浦肯野纤维。浦肯野纤维（图 14）是心脏传导系的分支，是 一种特殊的心肌纤维，纤维短而粗，细胞中央有12个核，胞质内含丰富的糖原和线粒体，肌原纤维少，HE染色时，胞质浅淡。浦肯野纤维与普通心肌纤维相连， 将冲动快速传到心室各部。 心肌膜由大量心肌纤维组成。 比较心内膜下层与心肌膜的肌纤维 可见，心内膜下层的浦肯野纤维的形态不同于心肌膜的普通心肌 纤维，浦肯野纤维的细胞较普通心肌纤维短， 但是比普

5、通心肌纤维要粗。3 实验效果 以多年教学经验为基础，本教学团队借鉴“看图、辨图、画 图”的图形教学法， 该方法突显了图片在学习中形象、 直观的作 用，培养学生的观察能力和描述能力，尤其在实验教学中，围绕 图形进行互动教学， 效果明显。 好的教学方法需要与之匹配的教 学资源。 组织胚胎学实验教学在多媒体互动教室上课， 授课教师 先利用实验课件向大家讲解循环系统中心脏的结构，以心室为 例，由 3 层组成：心内膜、心肌膜及心外膜。通过幻灯图片展示 心内膜的 3 层结构：内皮、内皮下层及心内膜下层。先低倍镜下 查看浦肯野纤维与普通心室肌（图 1、 2），再换高倍镜比较二 者的区别。 理论讲解完毕后， 要求学生用显微镜观察内皮下层中 浦肯野纤维与心肌膜层中普通心肌纤维， 并比较二者的特征。 如 图14所示，无论纵切还是横切，浦肯野纤维均粗大，普通心 肌纤维均纤细， 学生通过切片观察更形象地掌握 2 种心肌纤维的 区别。在以往的循环系统实验教学过程中， 学生所观察的切片心 脏的心内膜层中没有浦肯野纤维， 在实验报告的绘图环节， 学生 无法绘出浦肯野纤维的组织结构， 而观察了含有浦肯野纤维的切 片后，学生能把握要点，绘出完整的心脏切片图，体现出图形教 学法的重要性的同时，也强调了教学资