（药物化学专业论文）胭脂树种子制备红木素、降红木素工艺及微囊化红木素稳定性研究.pdf

q 弋ili 。l 目录 舢illli ii l lli ii l l l u l y 17 7 9 7 0 6 中文摘要1 英文摘要4 研究论文胭脂树种子制备红木素、降红木素工艺及微囊化红木素稳定性 研究 引言8 第一部分红木素制备工艺及微囊化红木素稳定性研究 前言9目i ) 舌9 材料与方法9 结果：1 3 附图j 2 7 附表2 9 讨论3 4 小结3 4 参考文献3 5 第二部分降红木素制备工艺研究 前言3 6刖看3 6 材料与方法3 6 结果3 8 附图4 3 附表4 6 讨论5 0 小结5 0 参考文献5 0 结论5 2 综述一5 3 致谢6 0 个人简历6 1 中文摘要 胭脂树种子制备红木素、降红木素工艺 及微囊化红木素稳定性研究 摘要 第一部分：红木素制备工艺及其微囊稳定性研究。红木素是一种天然类胡 萝卜素，具有淬灭单线态氧和清除自由基的功能，其清除活性自由基的功 效与1 3 胡萝b 素相当，不仅可以作为日用品、食品、化妆品的着色剂， 而且具有一定的药理作用，已知可以降低顺铂治疗癌症的副作用。本文研 究了从胭脂树种子分离纯化红木素的方法，确定了胭脂树种子制备红木素 的工艺，并考察了微囊化红木素对p h 、光照、温度、氧气的稳定性。 目的：通过设计工艺路线，进行提取工艺、析粉工艺的方法和条件的 筛选，优选出方法简便，条件确定的稳定的红木素制备工艺，制出高含量 的样品，并制备微囊，考察红木素微囊的稳定性。 方法：通过单因素试验，考察溶剂种类、浸提温度、浸提时间、物料 比对提取率的影响，并在单因素试验的基础上，选取影响单次浸提提取率 的浸提温度、浸提时间、液料比为考察因素，以红木素提取率为考察指标， 按l 9 ( 3 4 ) 表进行正交试验，得出最佳浸提工艺条件，通过考察提取级数 对提取率的影响，确定提取级数。 通过考察不同溶剂对红木素析粉收率和析粉含量的影响，确定析粉溶 剂。使用选定的析粉溶剂，分别考察析粉温度、析粉时间、液料比( 溶剂 体积油树脂重量，m l g - 1 ) 对红木素含量与析粉收率的影响，确定析粉 条件。 通过中试试验验证提取工艺及析粉工艺是否稳定。 将所得红木素精粉进行紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁分析，确认 所得红木素结构表征。 以变性淀粉为囊材喷雾干燥法制备红木素微囊，考察红木素微囊对 p h 、光、热、氧气的稳定性。 结果：选择提取收率高、毒性低的乙酸乙酯作为提取溶剂。以提取率 为考察指标，进行的正交试验确定的最佳提取工艺为：胭脂树种子加4 倍( 溶剂体积胭脂树种子重量，m l g - ) 乙酸乙酯，提取时间2h ，提 中文摘要 取温度6 0 。通过考察浸提级数对提取率的影响，确定为2 次浸提。 确定使用析粉含量和析粉收率均较高的乙醇作为析粉溶剂。试验确定 的析粉温度为5 ，析粉时间为4h ，乙醇与油树脂的液料比为5 ( m l 篙以) 。 中试试验证明红木素制备工艺稳定可控，平均提取率9 3 7 2 ，平均 析粉收率9 2 0 2 ，平均总收率8 6 2 3 ，红木素平均含量9 5 5 7 ( n = 3 ) 。 经紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁分析，确认了所得红木素结构表 征，与文献报道一致。 红木素微囊对p h 、光、热、氧气的稳定性明显优于未包埋红木素。 第二部分：降红木素制备工艺的研究。降红木素是一种类胡萝卜素，能 够溶于碱性水中，红木素通过水解可成为降红木素。降红木素具有的淬灭 单线态氧和清除自由基的功能，从而具有防癌、抗衰老等保健功能，还具 有药用价值，可以改变粥样动脉硬化小鼠的血脂水平和对氧磷脂酶的活 性，对脂肪肝也有一定的改善作用。本文研究了从胭脂树种子分离纯化降 红木素的方法，确定了胭脂树种子制备降红木素的工艺。 目的：通过设计工艺路线，进行提取及酸沉的方法和条件的筛选，优 选出方法简便，条件确定的稳定的降红木素制备工艺，制备出高含量的样 口 日日。 方法：通过考察乙醇浓度、碱液浓度对提取率的影响，确定碱液条件， 通过单因素试验，考察浸提温度、浸提时间、液料比对提取率的影响，确 定了乙醇浓度和碱液浓度，并在单因素试验的基础上，选取影响单次浸提 提取率的浸提温度、浸提时间、液料比为考察因素，以降红木素提取率为 考察指标，按l 9 ( 3 4 ) 表进行正交试验，得出最佳提取工艺条件，通过考 察提取级数对提取率的影响，确定提取级数。 通过考察不同p h 下的降红木素酸沉收率及降红木素含量，确定酸沉 p h 。 ， 通过中试试验验证降红木素制备工艺是否稳定。 将所得降红木素进行紫外光谱、红外光谱、质谱，确认所得降红木素 结构表征。 结果：确定采用6 0 浓度乙醇配制2 的氢氧化钾溶液为提取碱液。 以提取率为考察指标，进行的正交试验确定的最佳提取工艺为：提取温度 6 0 ，碱液与红木种子的液料比为3 ( m l g 。) ，提取时间3h 。通过考 中文摘要 察提取级数对提取率的影响，确定为2 次提取。 选择酸沉收率和降红木素含量均较高的p h = 3 作为酸沉p h 。 通过中试试验证明确定的降红木素制备工艺稳定可控。平均提取收率 9 2 3 5 ，平均酸沉收率9 8 3 6 ，总平均收率9 0 8 3 ，降红木素平均含 量9 3 31 ( n = 3 ) 通过对所得降红木素精粉进行紫外光谱、红外光谱、质谱，确证了所 得降红木素结构表征。 结论：红木素及降红木素制备工艺参数明确，工艺简便、合理，产品 含量高，适合工业化生产。将红木素制备成微囊，稳定性良好，可满足市 场对红木素稳定性的要求。 关键词：胭脂树种子；红木素；降红木素；工艺；结构表征；微囊； 稳定性 英文摘要 3 t u d v0 nd r e d a r a t i o n1 3 r o c e s so id i x i na n l ln o r d l x l niroma-q 1 ll a n n a t t os e e d sa n d0 ns t a b i l i t v0 ib i x i nm l c r o c a p s u l e s a 一一 一n 一 一 a b s t r a c t p a r ti ：s t u d yo np r e p a r a t i o np r o c e s so fb i x i na n do ns t a b i l i t yo fb i x i n m i c r o c a p s u l e s b i x i ni sak i n do fn a t u r a lc a r o t e n o i d ，w h i c hh a st h ef u n c t i o no f q u e n c h i n gs i n g l e to x y g e na n ds c a v e n g i n gf r e er a d i c a l t h ee f f e c t i v e n e s so f i t s f r e er a d i c a ls c a v e n g i n ga c t i v i t yi sr a t h e rt h a n1 3 - c a r o t e n e i tc a nb eu s e da s c o l o r a n t so fd a i l y n e c e s s i t i e s ，f o o da n dc o s m e t i c i ta l s o h a sc e r t a i n p h a r m a c o l o g i c a le f f e c t sa r ek n o w n t or e d u c et h es i d ee f f e c t so fc i s p l a t i ni nt h e t r e a t m e n to fc a n c e r i nt h i sp a p e r , t h em e t h o d so fs e p a r a t i o na n dp u r i f i c a t i o n o fb i x i nf r o ma n n a t t os e e d si ss t u d i e d ，t h ep r e p a r a t i o np r o c e s si se s t a b l i s h e d ， a n dt h es t a b i l i t yo fb i x i nm i c r o c a p s u l e so np h ，l i g h t ，h i 曲t e m p e r a t u r e ，o x y g e n i ss t u d i e d o b j e e t i v e ：i tc h o o s e sm e t h o d sa n dc o n d i t i o n so fe x t r a c t i n gp r o c e s sa n d p r e c i p i t a t i o np r o c e s sb yd e s i g n i n gp r o c e s sr o u t e t h eo p t i m a lp r e p a r a t i o n p r o c e s sf o rb i x i ni so b t a i n e d ，w h i c hi ss i m p l ea n ds t a b l e ，c a np r o d u c eh i g h c o n t e n tp r o d u c t t h e nm i c r o c a p s u l e si sm a d ef r o mb i x i n ，t h es t a b i l i t yo fb i x i n m i c r o c a p s u l e si ss t u d i e d m e t h o d s ：t h ee f f e c to fs o l v e n tk i n d s ，e x t r a c t i n gt e m p e r a t u r e ，e x t r a c t i n g t i m ea n ds o l v e n t - m a t e r i a lr a t i o ( m l 百1 ) o ne x t r a c t i o np e r c e n t a g ei ss t u d i e db y s i n g l e f a c t o rt e s t i tc h o o s e s e x t r a c t i n gt e m p e r a t u r e ，e x t r a c t i n g t i m e ， s o l v e n t - m a t e r i a lr a t i o ，w h i c he x e r ta ni n f l u e n c eo ne x t r a c t i o np e r c e n t a g e ，a s t e s tf a c t o r s i tc h o o s e st h ee x t r a c t i o np e r c e n t a g eo fb i x i na sl e v e l s a nl 9 ( 3 耳) o r t h o g o n a lm e t h o d o l o g yi sd e s i g n e dt oo p t i m i z et h ep r o c e s so fe x t r a c t i n g i t o b t a i n st h eo p t i m a lp r o c e s sf r o mt h es t a t i s t i cr e s u l t s i tc h o o s e se x t r a c t i n g t i m e sb ys t u d y i n gt h ee f f e c to ne x t r a c t i o np e r c e n t a g e t h es o l v e n tp r e c i p i t a t i n gp o w d e ri ss e l e c t e db ys t u d y i n gp r e c i p i t a t i o n y i e l da n db i x i nc o n t e n tw h e nu s i n gd i f f e r e n ts o l v e n t u s i n gs e l e c t e ds o l v e n t ，i t s t u d i e st h ee f f e c to ft e m p e r a t u r e ，t i m ea n da m o u n to fs o l v e n to np r e c i p i t a t i o n 4 i tv e r i f i e st h es t r u c t u r eo fb i x i nb yi rw m s ，1 hn m r a n d1 3 cn m r w i t hm o d i f i e ds t a r c ha sw a l lm a t e r i a l s ，b i x i nm i c r o c a p s u l e sa r ep r e p a r e d b ys p r a y - d r y i n g ，a n dt h es t a b i l i t yo fb i x i nm i c r o c a p s u l e st op h ，l i g h t ，h e a t , o x y g e ni ss t u d i e d r e s u l t s ：b e c a u s eo fl o wt o x i c i t ya n dh i g he x t r a c t i o np e r c e n t a g e ，e t h y l a c e t a t ei ss e l e c t e da se x t r a c t i n gs o l v e n t t h eo p t i m u me x t r a c t i o nc o n d i t i o n s a r ea sf o l l o w s ( c h o o s i n gt h ee x t r a c t i o np e r c e n t a g ea si n d i c a t o r s ) ：a d d i n g4 t i m e s ( m l g ) a m o u n to fe t h y la c e t a t et h a na n n a t t os e e d s ，e x t r a c t i n g2h o u r sa t 6 0 i ts e l e c t s2t i m e se x t r a c t i o nb ys t u d y i n gt h ei n f l u e n c eo fe x t r a c t i n g t i m e st oe x t r a c t i o np e r c e n t a g e b e c a u s eo fh i 曲c o n t e n to fb i x i na n dh i g hp r e c i p i t a t i o ny i e l d ，e t h a n o li s s e l e c t e da sp r e c i p i t a t i o ns o l v e n t t h ep r e c i p i t a t i o nc o n d i t i o n sa r ea sf o l l o w s ： a d d i n g5t i m e s ( m l g ) a m o u n to fe t h a n o lt h a na n n a t t os e e d s ，p r e c i p i t a t i o n t i m ei s2h o u r s ，p r e c i p i t a t i o nt e m p e r a t u r ei s5 t h ee x t r a c t i o nt e c h n i q u ei ss t a b l ea n df e a s i b l e a v e r a g ee x t r a c t i o n p e r c e n t a g ei s9 3 7 2 ，a v e r a g ep r e c i p i t a t i o ny i e l di s9 2 0 2 ，a v e r a g et o t a l y i e l di s9 6 2 3 ，a v e r a g ec o n t e n to f b i x i ni s9 5 5 7 t h es t r u c t u r eo ft h eb i x i ni sc h a r a c t e r i z e db yi r , u vm s ，1 hn m ra n d 1 3 cn m r t h es t a b i l i t yo fb i x i nm i c r o c a p s u l e st op h ，l i g h t ，h e a t ，o x y g e ni sb e t t e r t h a nc o m m o nb i x i n p a r ti i s t u d yo np r e p a r a t i o np r o c e s so fn o r b i x i n n o r b i x i ni sak i n do f n a t u r a lc a r o t e n o i d ，w h i c hc a nb ed i s s o l v e di na l k a l i n ew a t e r b i x i nc a l lb e h y d r o l y z e dt on o r b i x i n n o r b i x i nh a st h ef u n c t i o no fq u e n c h i n gs i n g l e to x y g e n a n ds c a v e n g i n gf r e er a d i c a l ，a n dt h u sh a v ea n t i c a n c e r , a n t i a g i n ga n do t h e r h e a l t hf u n c t i o n s i ta l s oh a sc e r t a i np h a r m a c o l o g i c a le f f e c t sa r ek n o w nt o l o w e r i n gp l a s m a c h o l e s t e r o l - a s s o c i a t e d l i p o p r o t e i n s a n d p l a s m a a r y l e s t e r a s e p a r a o x o n a s ea c t i v i t yo fa t h e r o s c l e r o s i sa t h e r o s c l e r o s i sm i c e ，a n d 5 英文摘要 t oi m p r o v et h es y m p t o m so fh e p a t i ca d i p o s ei n f i l t r a t i o n i nt h i s p a p e r , t h e m e t h o d so fs e p a r a t i o na n dp u r i f i c a t i o no fn o r b i x i nf r o ma n n a t t os e e d si s s t u d i e d ，t h ep r e p a r a t i o np r o c e s si se s t a b l i s h e d o b j e c t i v e ：i tc h o o s e sm e t h o d sa n dc o n d i t i o n so fe x t r a c t i n gp r o c e s sa n d a c i dp r e c i p i t a t i o np r o c e s sb yd e s i g n i n gp r o c e s sr o u t e t h es i m p l ea n ds t a b l e p r e p a r a t i o np r o c e s sf o rn o r b i x i ni so b t a i n e d ，w h i c hc a np r o d u c eh i g hc o n t e n t p r o d u c t m e t h o d s ：t h ea l k a l ii ss e l e c t e d b ys t u d y i n gt h ee f f e c to fe t h a n o l c o n c e n t r a t i o na n da l k a l ic o n c e n t r a t i o no ne x t r a c t i o np e r c e n t a g e t h ee f f e c to f e x t r a c t i n gt e m p e r a t u r e ，e x t r a c t i n gt i m ea n da l k a l il i q u i d - m a t e r i a lr a t i o ( m l 芎以) o ne x t r a c t i o np e r c e n t a g ei ss t u d i e db ys i n g l ef a c t o rt e s t t h ec o n c e n t r a t i o no f e t h a n o la n dt h ea l k a l ic o n c e n t r a t i o ni ss e l e c t e d i tc h o o s e s e x t r a c t i n g t e m p e r a t u r e ，e x t r a c t i n gt i m e ，a l k a l il i q u i d m a t e r i a lr a t i o ，w h i c he x e r ta n i n f l u e n c eo ne x t r a c t i o np e r c e n t a g e ，a st e s tf a c t o r s i tc h o o s e st h ee x t r a c t i o n p e r c e n t a g eo fb i x i na sl e v e l s ，a nl 9 ( 3 4 ) o r t h o g o n a lm e t h o d o l o g yi sd e s i g n e dt o o p t i m i z et h ep r o c e s so fe x t r a c t i n g i to b t a i n st h eo p t i m a lp r o c e s sf r o mt h e s t a t i s t i cr e s u l t s i tc h o o s e se x t r a c t i n gt i m e sb ys t u d y i n gt h ee f f e c to ne x t r a c t i o n p e r c e n t a g e t h ep hp r e c i p i t a t i n gp o w d e ri ss e l e c t e db ys t u d y i n gp r e c i p i t a t i o ny i e l d a n dc o n t e n to fn o r b i x i ni nd i f f e r e n tp h i tv e r i f i e st h es t a b i l i t yo fp r o c e s so fb i x i np r e p a r a t i o nb ys e m i - w o r k s p r o d u c t i o n i tv e r i f i e st h es t r u c t u r eo fn o r b i x i nb yi r , u v , m s r e s u l t s ：t h ee x t r a c t i o na l k a l ii s2 k o h ( p r e p a r e db y6 0 e t h a n 0 1 ) t h eo p t i m u me x t r a c t i o nc o n d i t i o n sa r ea sf o l l o w s ( c h o o s i n gt h ee x t r a c t i o n p e r c e n t a g e 嬲i n d i c a t o r s ) ：a d d i n g 3t i m e s ( m l g ) a m o u n to f2 k o h s o l u t i o n ( p r e p a r a t i o nb y6 0 e t h a n 0 1 ) t h a na n n a t t os e e d s ，e x t r a c t i n g3h o u r s a t6 0 i ts e l e c t s2t i m e se x t r a c t i o nb ys t u d y i n gt h ei n f l u e n c eo f e x t r a c t i n g t i m e st oe x t r a c t i o np e r c e n t a g e b e c a u s eo fh i g hp r e c i p i t a t i o ny i e l da n dh i g hc o n t e n to f n o r b i x i n , p h _ 3i s s e l e c t e da sp r e c i p i t a t i o np h 英文摘要 t h ee x t r a c t i o nt e c h n i q u ei ss t a b l ea n df e a s i b l e a v e r a g ee x t r a c t i o n p e r c e n t a g ei s9 2 3 5 ，a v e r a g ep r e c i p i t a t i o ny i e l di s9 8 3 6 ，a v e r a g et o t a l y i e l d i s9 0 8 3 ，a v e r a g ec o n t e n to f b i x i ni s9 3 31 ( n = 3 ) t h es t r u c t u r eo ft h en o r b i x i ni sc h a r a c t e r i z e db yi r , u vm s c o n c l u s i o n ：t h e p r e p a r a t i o np r o c e s sp a r a m e t e r s a r ec l e a ra n d p r e p a r a t i o n i ss i m p l ea n dr e a s o n a b l e ，i t i ss u i t a b l ef o ri n d u s t r i a l i z a t i o n p r o d u c t i o n b i x i nm i c r o c a p s u l e sh a v eag o o ds t a b i l i t y , w h i c hc a l lm e e tt h e r e q u i r e m e n to f m a r k e tf o rs t a b i l i t y k e yw o r d s ： a n n a t t os e e d s ；b i x i n ；n o r b i x i n ；p r e p a r a t i o np r o c e s s ； s t r u c t u r a lc h a r a c t e r i z a t i o n ；m i c r o c a p s u l e ；s t a b i l i t y 研究论文 胭脂树种子制备红木素、降红木素工艺 及微囊化红木素稳定性研究 引言 胭脂树( b i x ao r e l l a n a ) ，亦称红木，为红木科红木属速生小乔木，生 长在热带及亚热带地区。从胭脂树成熟种子假种皮中提取的红木色素，是 包含4 种类胡萝b 素的混合色素：红木素( b i x i n ) 、降红木素( n o r b i x i n ) 、 1 3 一胡萝b 素( 1 3 c a r o t e n s ) 和藏红花素( c r o c i n ) ，前2 种含量高，后2 种含量低。红木色素可以提供黄色、橘黄色、橘红色三种色调，着色时的 色调自然、光亮鲜艳、着色力强、耐热性好，可以作为日用品、食品、化 妆品的着色剂被广泛应用。此外，红木色素还具有淬灭单线态氧( 激发态 氧) 的抗氧化和清除体内剩余自由基的作用，从而具有防癌、抗衰老等保 健功能，安全营养，是重要的食用天然色素。 因制法不同可得到油溶性和水溶性两种制品。其中红木素是油溶性色 素，能够溶于乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇、二氯甲烷、氯仿。顺式红木素 ( c i s b i x i n ) 是棕红色晶体，反式红木素( t r a n b i x i n ) 为紫红色晶体。降红 木素为共轭多烯烃的加氧衍生物，即红木素羧基酯化物水解产物，红木素 在强碱条件下可水解为降红木素。降红木素易溶于o 1m o l l 以n a o h 溶 液，在酸性条件下发生色素沉淀，其钾盐或钠盐易溶于水。 本文采用溶剂提取法从胭脂树种子假种皮中直接提取红木素，通过正 交试验寻求最佳的提取工艺条件，采用溶析法，得到含量大于9 5 的红 木素，最高含量可达9 8 以上，并经过了结构表征分析，确认了其结构， 可用于食品或药品。采用喷雾干燥法用变性淀粉包埋将红木素制成微囊， 考察了p h 、光照、温度、氧气对红木素稳定性的影响，通过对比发现微 囊化的红木素稳定性优于普通红木素的稳定性。 本文采用碱提法由胭脂树种子水解精制降红木素，在水解提取中加入 乙醇，大幅度提高了提取率和水解效率，降低了杂质含量，经过酸沉、过 滤、干燥，得到含量大于9 0 的降红木素。 研究论文 第一部分 红木素制备工艺及微囊化红木素稳定性研究 - - 刖吾 红木素( b i x i n ) 俗称胭脂树橙，主要来源为胭脂树种子，是油溶性 食用色素，能够溶于乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇、二氯甲烷、氯仿。其着 色时色调自然、光亮鲜艳、着色力强、耐热性好，可以作为日用品、食品、 化妆品的着色剂被广泛应用【l 】。红木素还是一种类胡萝卜素，具有淬灭单 线态氧( 激发态氧) 的抗氧化和清除体内剩余自由基的作用，其清除活性 自由基的功效与1 3 胡萝卜素相当乜3 ，从而具有防癌、抗衰老等保健功能【3 4 】，它还具有药用价值，可以降低顺铂治疗癌症时产生的副作用【5 】。世界上 许多国家早已广泛使用红木素作为食品着色剂，并进行药用研究，而我国 对红木素的开发仍处于起步阶段，所得到的红木素产品基本上都是粗品， 限制了其应用范围。因此，开发纯度较高的红木素产品，并研究其组成、 结构和物理化学性质，在食品和医药工业领域都具有重要意义。 本试验主要完成以下工作： ( 一) 确定初步工艺路线，通过单因素试验考察了溶剂种类、提取温 度、提取时间、液料比对提取率的影响，确定了采用低毒、提取率高的乙 酸乙酯作为提取溶剂，并在单因素试验的基础上，采用正交试验的方法确 定最佳提取工艺条件； ( - - ) 通过考察析粉终温、析粉时间、溶剂体积对红木素含量与析粉 收率的影响，确定析粉条件； ( 三) 红木素制备工艺中试试验的研究； ( 四) 红木素结构表征确认； ( 五) 红木素微囊的稳定性研究。 1 材料与仪器 材料与方法 研究论文 1 1 材料 胭脂树种子( 云南省热带作物研究所提供) 乙酸乙酯、乙酸丁酯、无水乙醇、异丙醇、三氯甲烷、丙酮、石油醚 ( 沸程6 0 9 0 ) 、氢氧化钾、磷酸，磷酸二氢钾、磷酸氢二钾均为分析 纯。 乙腈为色谱纯。 红木素对照品，含量9 9 1 2 ，自制 c a p s u l e 变性淀粉，美国国民淀粉公司 蔗糖、抗坏血酸钠、l 一抗坏血酸棕榈酸酯、d 1 q 生育酚、玉米油均 为市售食品级。 1 2 仪器 高效液相色谱仪( 5 1 5 泵2 ，9 9 6 检测器) ，w a t e r s 公司 i n v o a5 0 0 型核磁共振波谱仪，瓦里安公司 z m dm i c r o m a s s 质谱仪e s i m s ，w a t e r s 公司 a e i m s 5 0 质谱仪( e i m s ) ，w a t e r s 公司 m a g n a - i r5 5 0 红外分光光度计，美国n i c o l e t 公司 a g e l a v e n u s i lc l s 色谱柱( 4 6 x 2 5 0 m m ，1 0 p m ) ，a g e l a 公司 u l t r o s p e c3 3 0 0p r o 紫外可见光分光光度计，安玛西亚 s h z i i i 真空泵，郑州长城科工贸公司 d l s b 低温冷却循环泵，郑州长城科工贸公司 9 8 1 b 5 0 0 0 型电子调温电热套，天津市泰斯特仪器有限公司 l a b o r a t a1 0 0 0 旋转蒸发仪，德国h e i d o l p h 公司 a t 2 01 分析天平，m e t t l e r - t o l e d o 公司 f a 2 5 高剪切分散乳化机，f l u k o 公司 r a n n i e5 高压均质机，丹麦a p v 公司 s o d a 1 2 型喷雾干燥塔，上海大川元干燥设备有限公司 9 0p l u s 粒度分析仪，b r o o k h a v c n 公司 三口圆底烧瓶、量筒、烧杯、布氏漏斗，天津市天玻玻璃仪器有限公 司 2 试验方法 2 1 高效液相色谱条件 进样量：1 0 “l 。 2 2 含量测定方法 精密称取红木素对照品1 0m g ，配制成5 0l a g m l 。乙醇溶液，对照品 溶液1op l 注入色谱仪，按上述色谱条件进行测定，按外标法测定，以峰面积 计算。该方法在红木素进样量为o 1 , - , 1l a g 时有良好线性关系( 严o 9 9 9 8 ) ； 加标回收试验( n = 5 ) 的平均回收率为9 9 3 ，r s d 为0 9 7 。 标准溶液与样品溶液采用外标法计算含量。以峰面积对质量浓度做工 作曲线，由试样峰面积求出试样的实际浓度。 2 3 工艺条件的选择 2 3 1 纯化工艺路线 红木素为共轭多烯烃的加氧衍生物，即类胡萝卜素羧基的酯化物。由 于分子内含有多个共轭多烯，本身极性较弱，同时分子内存在羧基和羧基 的酯化物，所以在中等极性溶剂，如乙酸乙酯、三氯甲烷等溶剂中有较大 的溶解度【1 。3 】。初步确定工艺路线为：采用中等极性溶剂搅拌提取红木素 种子，过滤后减压浓缩，溶剂析粉后过滤，真空干燥得红木素。 2 3 2 提取溶剂的选择 通过测定红木素在各种有机溶剂中的溶解度的方法选择浸提溶剂。选 取乙酸乙酯、丙酮、乙醇、异丙醇、石油醚五种有机溶剂测定红木素的溶 解度。分别取5 0m l 上述溶剂在5 0 下加入红木素，直至加入的红木素 不再溶解为止。将上述溶液分成几份放在不同的温度下保存，待溶液温度 平衡后，用o 4 5l a m 的过滤器过滤，测定溶液中红木素的浓度。 2 3 3 提取单因素试验 使用选定的溶剂，分别考察提取温度、提取时间、液料比对提取率的 影响 2 3 4 提取正交试验 根据单因素试验结果选择影响提取率的提取温度( a ) 、提取时间( b ) 、 研究论文 物料比( c ) 为考察因素，以红木素提取收率为考察指标进行正交试验，确 定最佳工艺条件。 2 3 5 提取级数的确定 取一定量的胭脂树种子，按照正交试验确定的条件进行多级提取，测 定提取率，综合提取率和经济因素确定提取级数。 2 3 5 析粉溶剂选择 按照选定的提取工艺提取一定量的胭脂树种子，过滤后用旋转蒸发仪 减压浓缩至油树脂。称取一定量的油树脂分别加入异丙醇、乙醇、丙酮、 乙酸丁酯及乙酸乙酯，l o 避光静置4h ，过滤，真空干燥，得红木素粉。 综合考虑析粉收率及红木素含量确定析粉溶剂。 2 3 6 析粉条件的选择 使用选定的析粉溶剂，分别考察析粉终温、析粉时间、溶剂体积对红 木素含量与析粉收率的影响，确定析粉条件。 2 4 结构确证 将所得红木素精粉进行紫外、红外、质谱、核磁分析，确证所得红木 素结构。 2 5 红木素微囊化 利用变性淀粉的乳化能力和水包油的特性，将红木素采用喷雾干燥法 用变性淀粉包埋，制成红木素微囊。水相：c a p s u l e 变性淀粉5 5 、蔗糖 1 7 5 、抗坏血酸钠1 ，用5 0 去离子水配制成浓度为3 0 的水溶液。 油相：玉米油l8 、红木素6 、l 抗坏血酸棕榈酸酯1 5 、d 1 q 生育 酚1 用高剪切分散乳化机混合均匀。油相用0 4m p a 氮气保护，升温至 9 0 ，加入至用高剪切分散乳化机剪切的水相溶液中，剪切转速2 5 0 0 0 r m i n ，剪切3 0m i n ，停止剪切后，将乳化液通过1 2 0m p a 高压均质机。 将高压均质后的液体用喷雾干燥机喷雾干燥，进风温度1 5 5 ，出风温 度7 8 ，得到红木素微囊。考察其水溶性和水溶液中红木素粒度。 2 6 红木素微囊稳定性研究 取一定量的红木素粉末和微囊化红木素，分别置于不同的条件下，定 期取样测定红木素的保存率，考察p h 值、光照、氧气、温度等对红木素 稳定性的影响。 2 6 1p h 值对微囊化红木素稳定性的影响 研究论文 分别取一定量的红木素和微囊化红木素，置于一定量的p h 值分别为 1 、3 、5 、7 、9 、1 1 、1 3 的缓冲溶液中( 缓冲溶液用9 0 浓度的乙醇配制) ， 室温放置3h ，分别测定红木素的保存率。 2 6 2 光照对微囊化红木素稳定性的影响 分别取一定量的红木素和微囊化红木素于室温下阳光直射存放，定期 取样测定叶黄素的保存率。 2 6 3 氧气对微囊化红木素稳定性的影响 分别取一定量的红木素和微囊化红木素置于高氧( 氧气：氮气= 7 ：3 ) 环 境中，定期取样测定红木素的保存率。 2 6 4 加热对微囊化红木素稳定性的影响 分别取一定量的红木素和微囊化红木素置于9 0 水浴中避光加热， 定期取样测定红木素的保存率。 结果 1 胭脂树种子中红木素含量的测定 称取胭脂树种子1 5g ，加入3 0 0m l 三氯甲烷，4 5 下超声提取2h ， 过滤，提取5 次，至胭脂树种子表皮成黑色，合并滤液，减压浓缩至油树 脂。将油树脂加无水乙醇溶解并定溶于1 0 0m l 容量瓶，精密吸取lm l 该溶液于5 0m l 容量瓶中，用无水乙醇定容，得样品溶液。 按照上述色谱条件测定，以外标法计算含量，测得胭脂树种子中红木 素含量为1 3 2 。 2 提取条件的选择 2 1 提取溶剂的选择 红木素是一种脂溶性类胡萝卜素，虽然甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷对 红木素具有较强的溶解性，但是这几种溶剂的毒性大，不利于工作人员的 身体健康和环境保护，而且终产品中会有一定的溶剂残留，在食品及药物 中的残留受到严格的限