毕业论文答辩-狭叶荨麻中多糖的提取研究.ppt

狭叶荨麻中多糖的提取研究,姓名：指导老师：专业：食品科学与工程,研究意义,狭叶荨麻是我国常用民间药，始载于图经本草，药用历史悠久，已被收入1995年卫生部药品标准（藏药）第一册。在东北地区资源丰富，却尚未被开发利用，具有广阔的市场前景。,目前，我国对狭叶荨麻的基础研究甚少，多为其同属植物的研究，因此我们选取狭叶荨麻作为研究对象，对狭叶荨麻中多糖进行提取研究，为对其进行深入研究奠定基础。因此，本论文的研究内容具有重要的意义。,国内外研究现状,目前国内外对狭叶荨麻的研究还很少，主要在于它的提取物的药理作用的研究。国外研究表明狭叶荨麻提取物有抗肾上腺素作用，而国内也有报道狭叶荨麻水煎液具有明显的抗凝血作用。现代药理研究也证实，荨麻多糖有显著的抗炎、增强免疫作用。因此，对狭叶荨麻的活性成分-多糖的深入研究有待进一步开展。,研究内容,狭叶荨麻多糖的提取狭叶荨麻多糖的分离纯化狭叶荨麻多糖光谱分析狭叶荨麻多糖组分分析,1.狭叶荨麻多糖提取纯化工艺流程图,狭叶荨麻干品,预处理,热水浸提,浓缩醇沉,离心,狭叶荨麻粗多糖,Sevage法脱蛋白,有机溶剂萃取,干燥,狭叶荨麻多糖,狭叶荨麻多糖的提取,(1)葡萄糖标准曲线如图1所示，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标得标准曲线。回归方程为：C=12.188A-0.0005（R=0.9991）通过回归方程以及提取率的计算公式计算狭叶荨麻在最优试验条件下的多糖提取率为6.309%。,图1葡萄糖标准曲线,2.狭叶荨麻多糖含量测定,(2)葡萄糖稳定性实验如图2所示，以时间为横坐标，吸光度为纵坐标进行绘图。结果表明所用测定方法显色后5min内稳定，10min内吸光度略有下降。因此应该在显色后5min内完成测定。,图2葡萄糖标品稳定性图,2.狭叶荨麻多糖含量测定,浸提温度浸提时间料液比,3.狭叶荨麻多糖提取的影响因素,(1)浸提温度如图3所示，90C为最佳提取温度。,图3浸提温度对多糖提取率的影响,(2)浸提时间如图4所示，1h为最佳提取时间。,图4浸提时间对多糖提取率的影响,(3)料液比如图5所示，110为最佳料液比。,图5料液比对多糖提取率的影响,4.正交试验,通过单因素试验得出正交试验因素水平表（如表1），选择L9（34）正交表（表2）进行试验。,表1因素水平表,表2正交试验结果,表3正交试验方差分析表,由正交试验结果（表2）和方差分析表(表3)可知，最佳提取工艺条件为：料液比110，温度90，时间1h。影响狭叶荨麻多糖提取率各因素的主次关系为：浸提温度浸提时间料液比。,5.优化方案验证试验,表4优化工艺提取验证结果,优选出最佳工艺后，进行验证试验，以确保其重复性和准确性。,由表4可知，验证的最佳工艺多糖得率稳定，提取率高，证明优选出的最佳工艺合理可行。,6.醇沉比的选择,由图6可知，醇沉比为13时狭叶荨麻多糖的提取率最高，所以醇沉比13为最佳条件。,图6醇沉比对多糖提取率的影响,1.Sevage法脱蛋白,在多糖溶液中按51与Sevage试剂（氯仿正丁醇=51）混合，经充分振摇，将游离蛋白质沉淀，经分液除去。其脱蛋白效果如图7所示。,图7Sevage法脱蛋白效果图,狭叶荨麻多糖的分离纯化,2.有机溶剂萃取,1)石油醚萃取,在多糖溶液中按31加入石油醚，经充分振摇，将杂质溶于石油醚中，经分液除去。其杂质除去效果如图8所示。,图8石油醚除杂质效果图,2)乙醚萃取,在多糖溶液中按31加入乙醚，经充分振摇，将杂质溶于乙醚之中，经分液除去。其杂质除去效果如图9所示。,图9乙醚除杂质效果图,3)乙酸乙酯萃取,在多糖溶液中按31加入乙酸乙酯，经充分振摇，将杂质溶于乙酸乙酯中，经分液除去。其杂质除去效果如图10所示。,图10乙酸乙酯除杂质效果图,红外光谱分析,图11中3467cm-1处有吸收峰，为多糖-O-H形成的分子间或分子内氢键；1430cm-1处为CO的伸缩振动峰，为多糖的特征吸收峰；850cm-1处表明组成的单糖有-D-吡喃葡萄糖存在；760cm-1为吡喃糖环C-O-C对称振动峰。,图11红外光谱图,狭叶荨麻多糖光谱分析,狭叶荨麻多糖组分分析,图12气相色谱分析图,气相色谱分析,由图12及表5可知，狭叶荨麻多糖主要由3种单糖组成：葡萄糖、木糖、甘露糖。并根据面积归一化法，面积之比近似等于物质量之比，可推算出各个单糖物质量之比大致为：木糖葡萄糖甘露糖=15.2417.6666.10。,表5狭叶荨麻多糖气相色谱数据表,结论,本论文通过对狭叶荨麻多糖提取、分离纯化的研究和多糖组成成分分析，主要得出以下结论：对狭叶荨麻多糖进行提取条件优化的研究表明：料液比为110，浸提温度为90，浸提时间为1h为最佳提取工艺条件。最佳醇沉比为13。经优化试验验证，狭叶荨麻多糖在优选工艺条件下提取率为6.309%。本试验用Sevage法脱蛋白，有机溶剂萃取对狭叶荨麻粗多糖进行纯化，结