免疫学教学课件肿瘤免疫讲课2014

CMABCMABCMABCMAB 王王 皓皓 第二军医大学肿瘤研究所第二军医大学肿瘤研究所 2014.52014.5 肿瘤免疫、抗体药物肿瘤免疫、抗体药物 及转化医学及转化医学 CMABCMAB 排名通用名主要适应应症 销销量(10亿亿美元) 2009年2010年 1阿伐他汀高胆固醇血症12.4511.4 2氯吡格雷动脉粥样硬化9.299.6 3Etanercept类风关、强柱、银屑病8.08.4 4Fluticasone哮喘7.767.8 5Infliximab类风类风 关、克罗罗恩病、强柱、银银屑病6.917.4 6Bevacizumab结直肠癌5.926.9 7Rituximab淋巴瘤5.86.5 8阿立哌唑精神分裂症药物5. 66.2 9Valsartan高血压6.016.1 10瑞舒伐他汀高胆固醇血症4.745.6 11Adalimumab类风类风 关、克罗罗恩病、强柱、银银屑病5.495.4 12Trastuzumab乳腺癌5.025.1 CetuximabCetuximab结直肠癌结直肠癌2.572.573.23.2 RanibizumabRanibizumab老年性黄斑变性老年性黄斑变性2.432.433.03.0 NatalizumabNatalizumab多发性硬化症多发性硬化症1.061.061.31.3 OmalizumabOmalizumab过敏性哮喘过敏性哮喘0.910.911.21.2 AbataceptAbatacept类风关类风关0.80.81.11.1 PalivizumabPalivizumabRSVRSV病毒感染病毒感染1.11.10.90.9 20102010年全球畅销药年全球畅销药 年销售50亿美元以上的12种“超级重磅炸弹”药物，有6种为抗 体、抗体融合蛋白 CMABCMAB 国内企业： n4 个重组抗体类产品 n仅占国内药物 1%以下。远 低于国际水平。 n主要瓶颈：规模化生产工艺 及分析技术 n2010年销售达 6亿元。复合 年增长率 50%。 1%1% 国内总体状况国内总体状况 6 %6 % CMABCMAB 抗体药物国家工程研究中心 （上海 张江） 中信 国健 百迈博/ 张江生物 第二军医大学第二军医大学中信国健药业中信国健药业 上海交通大学上海交通大学百百迈迈博博药业药业 张张江生物技江生物技 术术 有限公司有限公司 抗体中心抗体中心 CMABCMABCMABCMAB 2 2 3000L3000L规模生产线规模生产线 细细细细胞培养胞培养 细细细细胞培养胞培养 蛋白蛋白纯纯纯纯化化 亲亲亲亲和和层层层层析析 CMABCMAB 抗CD20抗体与蛋白糖基化修饰饰 CMABCMABCMABCMAB 抗肿瘤抗体抗肿瘤抗体靶点靶点 VEGF-trap 美罗华单抗美罗华单抗 健妥昔单抗健妥昔单抗 CMABCMAB 抗体作用机理ADCC CMABCMAB CDC CMABCMAB 健妥昔单抗药效 nADCC活性：2-3倍于原研药；? CDC活性：与原研药一致 n临床3期结果： n单药有效率（CR+PR）较原研药报道高5%左右 nR+CHOP有效率较原研药报道高10%左右 可能的原因 人群差异、实验设计实验设计 不同 抗体蛋白的性质不同 CMABCMAB 抗体糖蛋白 N-糖基 化位点 Ig Fc 常见寡糖链 50倍ADCC活性 CMABCMABCMABCMAB CMABCMABCMABCMAB CMABCMAB 基于质谱质谱 技术术的蛋白质质分析 Quantitation, Isomer discrimination MS confirmation 完整抗体 糖 肽寡糖链 质谱结构确证液相-荧光定量 FL tag MW profiling ESI MS Enzymatic Digestion Peptide Mapping UPLC/UV(MS) Glycan site location and determine if different glycans are attached to the same site Profiling, and MS confirmation CMABCMAB 完整轻、重链分子量比较 轻链轻链 重链重链 说明两种不同来源的说明两种不同来源的 抗体蛋白，其氨基酸抗体蛋白，其氨基酸 序列完全一致序列完全一致 CMABCMABCMABCMAB 液相色谱 LC-MS 寡糖链的LC-MS分析 CMABCMABCMABCMAB 非岩藻糖化的寡糖链比例更高，导致更好的非岩藻糖化的寡糖链比例更高，导致更好的ADCCADCC活性活性 CMABCMAB Further analytical testing CMABCMAB 抗EGFR抗体与蛋白糖基化修饰饰 CMABCMABCMABCMAB TargetsTargets VEGF-trap CMABCMAB 西妥昔西妥昔单单单单抗（抗（ErbituxErbitux，爱爱爱爱必妥）必妥）发发发发展史展史 n1980年代：鼠源单抗 n1990年代末：Imclone公司开发嵌合抗体进行临 床试验。失败。CEO入狱。 nBMS公司接手，重新进行 临床试验，于2003年获FDA 批准上市 CMABCMAB Erbitux and k-ras CMABCMAB CMABCMAB n但随着Erbitux的日益广泛应用，其严重过敏反应成为临床应用中的 重要障碍（3-4级，休克甚至致死） n在美国部分地区，有22%的病人在接受Erbitux治疗之后出现了严 重的超敏反应（T h e New England Journal o f Medicine March 13, 2008 ） n该回顾性研究发现，血清中 含有抗 Cetuximab 单抗的 IgE 型抗体与不良反应发生 密切相关。 IgE 过敏休克 致敏原 CMABCMAB Cetuximab（Erbitux) CMABCMAB 不同种属细胞的糖基化差异 Beck A, et al. Current Pharmaceutical Biotechnology, 2008;9:482-501 CMABCMAB Our ongoing workOur ongoing work nThe largest group of perspective clinical trail of k -ras wild type screening nCetuximab expressed in CHO cell instead of SP2/0, clinical trail, none of 400 cases occurred SAE nAnti-Gal-1,3-Gal antibody detection n n LC-MS analysis LC-MS analysis CMABCMAB A comparison of deconvoluted average mass between innovator and CMAB009 mAbs after treated with PNGase (mirror plot of heavy chain) CMABCMAB Glycosylation profiles in the Fc regions LC-fluorescence chromatograms of 2-AB labeled glycans released from Fc CMABCMAB Glycosylation profiles in the Fab regions LC-fluorescence chromatograms of 2-AB labeled glycans released from Fab CMABCMAB Breakthrough of the Year 2013 癌症免疫治疗 名列2013年度 十大科学突破之 榜首！ 2013年12月20日科学杂志 CMABCMAB PD-1通路：免疫效应阶 段的刹车器 CMABCMAB PD-1：炙手可热的癌症免疫治疗靶点 n国外临床试验所包括的肿瘤类型： n非小细胞肺癌、小细胞肺癌 n肾癌、胃癌 n肝癌、胰腺癌 n转移性黑色素瘤 n三阴性乳腺癌 n淋巴瘤 n联用药物 nIpilimumab nRituximab CMABCMAB 最新报道 (2014.3) nSurvival, Durable Tumor Remission, and Long-Term Safety in Patients With Advanced Melanoma Receiving Nivolumab. J Clin Oncol, 2014;March 3 online n107例晚期黑色素瘤患者（平均预期寿命1年），接受96 周的Nivolumab治疗。1年生存率62%，2年生存率43% n总生存期（OS）大于疾病无进展生存期（PFS），表明 nivolumab正帮助控制晚期黑色素瘤病情，即使是已经历 了新的肿瘤生长的患者群体，而这普遍被视为癌症发起 新的攻击的先兆； n在治疗结束后，肿瘤倾向于保持瘤体大小或收缩。 CMABCMAB PD-1/PD-L1抗体in Clinic Target名称及别别名原研厂家抗体亚亚型* Clinic stage PD-1Nivolumab (MDX1106, BMS936558,) BMS-ONOIgG4人源III Lambrolizumab (MK-3475)MerckIgG4人源III Pidilizumab (CT-011)CureTech-TevaIgG1人源II AMP-224 Amplimmune-GSK PD-L2融合蛋 白 I PD-L1 BMS935559 (MDX-1105)BMS-ONOIgG4人源 I MPDL3280A RocheIgG1人源 I MEDI4736