湖南省2012届高考生物复习 现代生物科技专题 第1讲 基因工程课件 新人教版选修3.ppt

1、讲座1:基因工程，首先，基因工程的概念和基本工具，答案基因重组体外基因重组转基因遗传特征生物型生物产品限制性内切酶(限制性内切酶)磷酸二酯键两个核苷酸之间的特定位置的特定核苷酸序列粘端平端脱氧核糖核酸连接酶磷酸二酯键质粒小双链环状脱氧核糖核酸限制性内切酶复制并稳定保存标记基因的衍生物噬菌体，2。基因工程的基本操作程序，答案编码蛋白21。聚合酶链反应技术。启动子23。终结者，答案 24。农杆菌转化法25。显微注射法。插入目标基因27。转录基因，1。基因工程的基本操作工具。与脱氧核糖核酸分子有关的酶(1)几种酶的比较，续。脱氧核糖核酸连接酶的功能不需要模板。载体(1)作为载体将目标基因转移到宿主细

2、胞中。它可以用来在宿主细胞中复制大量的目标基因。(2)具有在宿主细胞中稳定保存和大量复制的条件。有许多限制性酶切位点与外源基因相连。它有特殊的筛选标记基因。(3)质粒：一种裸的、结构简单的、小的双链环状脱氧核糖核酸分子，它独立于细菌的类核脱氧核糖核酸并能自我复制。噬菌体的衍生物。动植物病毒。【友好提醒】一般来说，自然载体往往不能满足所有人的需求，所以人们根据不同的目的和需要对一些自然载体进行人工改造。限制性内切酶切割位点必须位于所需标记基因之外，以确保标记基因的完整性并有利于目标基因的检测。下面对基因工程中限制性内切酶的描述是错误的： (一)限制性内切酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列；(二)限制

3、性内切酶的活性受温度的影响；(三)限制性内切酶可以识别和切割核糖核酸；(四)限制性内切酶可以从原核生物中提取。大多数酶的化学本质是蛋白质，而少数酶的化学本质是核糖核酸。酶的活性受温度和酸碱度的影响；限制性内切酶的特点是能识别双链DNA中的特定核苷酸序列，并能在特定位点切割；限制性内切酶主要从原核生物中分离。回答 C，实施例2质粒作为“分子转运体”的条件是()具有多重限制性内切酶和标记基因的自我复制双链环状DNA分子。真核细胞中没有分析载体。条件是：有一个标记的基因；有多个限制性酶切点；它可以在宿主细胞中稳定储存并大量复制。回答丙，二。基因工程的操作程序。利用基因工程技术生产凝乳酶的工艺。基因工

4、程操作程序分析(1)目标基因的获取是从自然界现有物种中分离出来的，如基因组文库或cDNA文库。合成靶基因的常用方法是反转录和化学合成。通过聚合酶链反应技术扩增靶基因可以扩增获得的靶基因，获得大量的靶基因。(2)基因表达载体的构建友好提示插入的靶基因的表达需要调节序列，因此用作载体的质粒需要在插入的基因位点之前有一个启动子，然后是一个终止子。两次使用的限制性内切酶是同一种酶，因此以这种方式形成的粘性末端碱基是互补的，便于连接。(3)将靶基因导入受体细胞(4)靶基因的检测和鉴定实施例3以下关于基因表达载体构建的陈述是不正确的：(a)限制性酶和DNA连接酶b必须在细胞中进行。c抗生素抗性基因可作为目

5、标基因头端的标记基因d启动子。【分析】基因表达载体是目的基因和载体的组合，在此过程中应使用相同的限制性内切酶切割目的基因，基因表达载体的构建在细胞外进行。基因表达载体包括启动子(位于基因首端开始转录)、终止子、靶基因和标记基因。回答 B，1。(国家2010)以下描述符合基因工程的概念：(1)抗体淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞在B淋巴细胞中含有抗体基因B。将人干扰素基因重组入质粒后，导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株C。用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生变化，经筛选得到青霉素产生菌D。在天然噬菌体自身感染细菌后，它的脱氧核糖核酸被整合到细菌的脱氧核糖核酸中。用紫外线照射青霉菌获得产青霉素

6、菌株属于诱变育种，基因工程技术是提取一个生物体的某个基因，对其进行修饰和转化，然后将其放入另一个生物细胞中定向转化该生物体的遗传性状，因此选择B。2。(浙江，2009)下面关于基因工程的说法是错误的：(1)靶基因和受体细胞可以自动使用，植物或微生物的限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶是两种常用的工具酶，丙型胰岛素原基因在大肠杆菌中表达没有生物活性。D载体上的抗性基因有利于筛选含有重组DNA的细胞，促进目的基因的表达。在基因工程中，靶基因和受体细胞都可以自动使用，常用的工具酶是限制性内切酶和脱氧核糖核酸连接酶。人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原没有生物活性，只有被某些物质激活后才能具有生物活

7、性。载体上的抗性基因主要有利于筛选含有重组DNA的细胞，但不能促进目的基因的表达。所以d是错的。3。(江苏，2010)下表列出了几种限制性酶识别序列及其切割位点。图1和图2中的箭头表示相关限制性酶的切割位点。请回答以下问题：(1)图1所示的质粒分子在Sma切割前后含有_ _ _ _ _ _ _ _ _游离磷酸基团。(2)如果图中的质粒被修饰，插入的Sma切割位点越多，质粒的热稳定性就越高。(3)图中用质粒和外源基因构建的重组质粒不能被Sma切割，因为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。形状记忆合金可以破

8、坏质粒的抗性基因和外源基因中的目的基因。(4)与单独的生态修复相比，用BamH和Hind同时处理质粒和外源基因的优点是可以预防_ _ _ _ _ _ _ _ _。(5)为了获得重组质粒，将切割的质粒与靶基因片段混合，并加入_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _酶。(6)抗生素抗性基因在重组质粒中的作用为_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _。(7)为了从cDNA文库中分离蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入失去蔗糖吸收能力的大肠杆菌突变体中， 然后在_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _培养基中培养。为了鉴定和筛选含有靶基因的细胞，蔗糖是唯一的含碳营养物。 分析 (1)质粒是切割前的双链环状脱氧核糖核酸分子，因此它们不含游离磷酸基团。从图1可以看出，质粒仅包含SMA酶的一个切割点，并且在被Sma酶切割后包含两个游离磷酸基团。(2)石墨和碳含量越高，热稳定性越高。(3)构建重组质粒时，标