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文档简介
1、实验五霉菌的形态观察一、实验目的(1)观察霉菌菌落的特征。 (2)观察根霉、青霉、曲霉的形态结构和无性孢子。 (3)学习和掌握霉菌的制作方法。 二、实验原理霉菌为真核微生物,菌丝粗,有分支和不分支的。 菌丝体呈无色透明或暗褐色到黑色,或鲜艳的颜色。 用显微镜观察,菌丝体都是管状的。 生长在固体培养基上,绒毛状或绵棉状。 高丝状的丝状管中有横隔,也有把菌丝分成多个细胞的。 由于霉菌细胞容易收缩变形,孢子容易分散,所以制作标本时经常使用乳酸苯酚棉兰染色液。 这种染色液具有不能使细胞变形的防腐杀菌作用,不易干燥,可以长时间保持的溶液本身呈蓝色,具有一定的染色效果。 另外,为了得到保持明确且完全自然状
2、态的霉菌形态,也可以用载玻片培养法和玻璃纸透析培养法进行观察。 载玻片培养法是在一定湿度的培养皿中释放霉菌载体培养物,盖上玻璃罩,使霉菌在狭窄的间隙中生长、繁殖,用显微镜容易观察霉菌的特殊形态结构,如曲霉的足细胞、分生孢子、顶包等的生长状况。 另外,还可以在同一标本上观察它们不同阶段的生长发育情况。 玻璃纸透析培养法利用玻璃纸的半透膜特性和透光性,在琼脂培养基表面复盖的玻璃纸上生长霉菌,然后在长菌的玻璃之间取小片贴在载玻片上,在显微镜下进行观察。 本实验以电影制作观察为中心。 三、实验材料,一.菌种曲霉、青霉、黑根霉。 2 .其他显微镜、培养箱、培养盘、乳酸酚棉蓝染色液、载玻片、盖玻片、无菌水
3、、接种环、接种钩、解剖针、酒精灯、火柴、滤纸、玻璃铅笔等。 四、操作方法(一)电影观察法(水浸片法制作标本片)(一)在清洁载玻片上滴入乳酸酚棉兰染色液的无菌操作,用解剖针在染色液中选择少量带孢子的霉菌丝(注:选择带颜色的菌丝),仔细地拨开菌丝,用盖玻璃复盖(注(2)放在显微镜下观察霉菌菌丝的形态(观察菌丝的隔膜、假根、匍匐枝、足细胞的有无)。 无性、有性孢子的形态、大小、颜色等。 (2)玻璃纸透析培养观察法(1)在霉菌斜面试管中加入5ml无菌水洗下孢子,制作孢子悬浊液(2)用无菌镊子将灭菌直径与培养皿相同的圆形玻璃纸复盖在查尔培养基的平板上(3)用无菌移液管1ml在上述玻璃纸平板上吸引孢子悬浊液0.2ml 打开盘子盖,用镊子把玻璃纸和培养基分开,用剪刀取小片放在载玻片上,用显微镜观察其特殊形态。根霉、黑根霉(匍匐根霉)菌落:初期白色,老熟后灰色褐色,显微镜形态:菌丝体无间隔,有假根和匍匐枝,其中匍匐枝无色,假根发育成褐色。 孢子囊的簇生呈黑色或褐色,可以形成球状的接合孢子。 孢子,接合孢子,曲霉,曲霉菌丝体心理:有横隔,总是无色,老熟时从淡黄色变成褐色,足细胞无性生殖体:分生孢子梗、顶囊、小梗、分生孢子、足细胞、分生孢子、隔菌丝、小梗、顶囊、分生孢子梗、分生孢子梗、分生孢子发菌丝体形态:营养菌丝上有横隔的无足细胞分生孢子梗有横隔分生孢子头无顶囊,呈扫帚状的小梗顶串分生孢子(球
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