山东省枣庄市滕州市2022-2023学年高二下学期期中质量检测生物试题（含答案）

山东省枣庄市滕州市2022-2023学年高二下学期期中质量检测生物试题姓名：__________班级：__________考号：__________题号一二三总分评分一、单选题1．《齐民要术》关于泡菜制作的记载为“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中。其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止”，意思是制作极咸的盐水，用盐水洗过的菜放入菜坛中，再把洗过菜的澄清盐水倒入菜坛中，直至淹没菜为止。下列说法错误的是（）A．泡菜发酵液表面有一层白膜是乳酸菌大量繁殖的结果B．“极咸”盐水可减少杂菌繁殖，降低泡菜中的亚硝酸盐含量C．再倒入菜坛中的“洗菜盐水”也可能含有泡菜发酵的乳酸菌D．“令没菜把即止”主要是为泡菜中乳酸菌发酵创设无氧条件2．约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵为含酒精的饮料，后来又通过固体发酵法制得其他食品；如酱油、醋、豆豉、腐乳等，从而形成了中华民族特有的饮食文化。下列与传统发酵技术相关的描述，正确的是（）A．传统发酵技术是利用不同原核生物产生不同代谢物的原理，生产人们需要的产物B．发酵是在适宜的条件下，将原料通过微生物的无氧呼吸转化为人类所需产物的过程C．谷物，水果等原料可为微生物的生长提供各种营养物质，发酵前无需进行灭菌处理D．果醋制作过程中pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反3．下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，错误的是（）A．基因工程是一种在体外进行的重组DNA技术B．通过蛋白质工程可以获得功能更符合人类需求的蛋白质C．基因工程和蛋白质工程分别在DNA分子水平和蛋白质分子水平上进行设计和施工D．基因工程可以改造出更符合人类需求的新的生物类型和生物产品4．啤酒生产的简要流程如图所示，制麦时用赤霉素溶液浸泡大麦种子，糖化主要将麦芽中的淀粉等有机物水解为小分子。下列说法错误的是（）A．过程①利用大麦发芽产生的淀粉酶进行发酵，在焙烤时该酶失活B．过程②碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，使淀粉分解，形成糖浆C．发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期可以延长排气时间间隔D．过程③在菌种的选育上，可通过基因工程改造啤酒酵母，缩短生产周期5．聚羟基脂肪酸酯（PHA）是某些细菌以蔗糖为原料合成的一种胞内聚酯，具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性。PHA进入海洋后，可以被动物食用，约1~3年完全自然降解。下图为PHA的生产工艺流程，有关分析错误的是（）A．培养基A需添加蔗糖，为选择培养基B．菌株M可用细菌计数板进行直接计数C．发酵罐内应严格控制温度、pH等条件D．采用过滤、沉淀的方法得到PHA产品6．制备新型冠状病毒单克隆抗体的简要过程如下：给小鼠注射N蛋白（新型冠状病毒重要的标志蛋白）→从脾脏中获取细胞①→诱导细胞①与小鼠的细胞②融合→筛选出细胞③→克隆化培养和抗体检测，获得细胞④。上述过程的细胞①～细胞④中，可能不具有增殖能力的是（）A．细胞① B．细胞② C．细胞③ D．细胞④7．病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。利用组织培养技术可以快速生产出脱毒苗。下列叙述错误的是（）A．获取的植株茎尖切段需用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%的次氯酸钠进行消毒处理B．形成愈伤组织的过程中，可能会发生染色体变异、基因突变及细胞分化C．脱毒苗培育过程需要更换培养基，适当提高生长素的比例有利于根的分化D．植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达8．为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森病的治疗，科研人员利用帕金森病模型鼠进行如下图所示实验，下列相关叙述不正确的是（）A．过程①中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性恢复B．过程②重组细胞培养经历了桑葚胚、原肠胚和囊胚等过程C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达D．过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能9．中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（）A．卵母细胞去核的方法是显微操作法，还可以用紫外光短时间照射等方法B．兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质C．重组胚胎需要用电融合法激活，使之完成细胞分裂和发育进程D．在大熊猫早期胚胎移植时，应选择有健康体质和正常繁殖能力的受体10．嵌合体在免疫学上的含义是指一个机体身上有两种或两种以上染色体组成不同的细胞系同时存在，彼此能够耐受，不产生排斥反应，相互间处于嵌合状态。如图表示构建嵌合体小鼠的实验，下列叙述错误的是（）A．卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不增加B．胚胎在囊胚阶段开始分化，其中的滋养层细胞将发育成胎膜和胎盘C．嵌合体幼鼠的一个细胞中同时有白鼠和黑鼠的基因D．囊胚中分离的胚胎干细胞具有分化成各种细胞并进一步形成组织、器官甚至是个体的潜能，IPS细胞是与其相类似的一种细胞11．为解决杂交瘤细胞在传代培养中出现来自B淋巴细胞的染色体丢失问题，研究者将抗原刺激后的B淋巴细胞，用EBV（一种病毒颗粒）感染，获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感。骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感。下图表示操作过程。下列分析错误的是（）A．B淋巴细胞可从多次间歇注射某种抗原的动物脾脏中获得B．HAT培养基和Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞C．杂交瘤细胞染色体丢失可能会导致抗体的产生能力下降D．图中获得的杂交瘤细胞需经抗体检测筛选后才可用于生产12．我国科研人员将番木瓜环斑病毒（PRSV，一种单链RNA病毒）的复制酶基因转入番木瓜，培育出抗病毒番木瓜“华农一号”。“华农一号”能产生与PRSV的RNA形成局部双链的RNA，阻止病毒的复制。下列分析错误的是（）A．培育抗病毒番木瓜“华农一号”需要用到植物组织培养技术B．“华农一号”通过表达出复制酶使番木瓜获得对PRSV病毒的抗性C．PCR扩增复制酶基因时，反应体系中需加入逆转录酶和Taq酶D．培育“华农一号”时，可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因13．人工基因驱动是以基因编辑技术为核心发展来的，可用于消灭携带疟疾的按蚊。决定野生型按蚊能携带疟原虫的基因组成为aa，科学家合成了使按蚊不能携带疟原虫的基因A。将由“A基因”“Cas9蛋白基因”和“可转录出sgRNA（可识别a基因的RNA序列）的基因”组成的基因驱动器转入野生型按蚊受精卵中，基因驱动器被整合到含a基因的同源染色体（1和1＇）中的1上，使a基因改造成A基因，随后sgRNA识别并引导Cas9蛋白将1＇上的a基因切除，切除部位的DNA会以1上同一位点未断裂的DNA为模板完成修复。下列说法错误的是（）A．Cas9蛋白作用于双链DNA分子中特定部位的磷酸二酯键B．经过人工基因驱动改造的野生型按蚊的基因型为AaC．可利用显微注射将基因驱动器注入野生型按蚊受精卵中D．若人工基因驱动中的目的基因使按蚊只能繁衍雄性后代，则一段时间后按蚊物种将灭绝14．原位PCR技术是利用原位PCR仪，在组织或细胞中靶DNA所在的位置上进行的PCR循环扩增，通过掺入标记基因直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。进行扩增时，反应体系中的反应成分需渗透到组织或细胞的靶DNA处才能进行扩增。PCR反应体系中需要添加一定浓度的Mg2+，而组织细胞间的物质会吸附Mg2+，使进入细胞的Mg2+减少。下列说法正确的是（）A．PCR技术中复性是当温度下降到65℃时，两种引物与两条DNA单链结合的过程B．反应体系中dNTP作为扩增的原料，会依次连接到子链的5端C．反应体系中引物的G，C碱基含量越高越好，因为越高引物结合的特异性越强D．原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR高15．新型冠状病毒（2019-nCoV）的检测可以采用实时荧光RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）的方法，RT-PCR的具体过程如图，下列叙述正确的是（）A．PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶B．过程Ⅱ拟对单链cDNA进行5次循环的扩增，理论上需要32个引物BC．该技术可用于获取并大量扩增目的基因，所得基因不含启动子D．PCR反应中周期性的温度设置是特定的，与扩增的目的基因和引物无关二、多选题16．生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组把该菌的悬浮液与不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示，下列说法正确的是（）A．倒成平板后直接培养可判断有无污染B．倒成平板后需要进行灭菌处理C．图示结果表明该菌需要生长因子乙或丙D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选17．一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科学家通过动物细胞融合技术，将两株不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，可以产生双特异性抗体AB。过程如图所示。下列说法错误的是（）A．杂交瘤细胞A．B混合并诱导融合后，利用选择培养基可以筛选出双杂交瘤细胞ABB．双杂交瘤细胞同时识别α、β抗原后，才能产生双特异性抗体C．对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理D．将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔，腹水能为细胞提供所需的营养条件18．中国科研团队利用一只流产的雌性猕猴胚胎的成纤维细胞经克隆得到一对克隆猴“姐妹花”，它们的诞生具有重大意义。其中几个关键的技术创新与突破有：①在将供体细胞注入去核的卵母细胞前用灭活的病毒短暂处理；②通过反复试验，可以在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里；③将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚。以下相关叙述正确的是（）A．灭活是指用物理或化学手段破坏病毒或细菌的抗原结构使其失去感染能力B．克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程C．组蛋白去甲基化和乙酰化有利于基因的表达从而促进重构胚的发育D．胚胎移植时进行同期发情处理，目的是降低代孕母猴对克隆猴“姐妹花”的免疫排斥反应19．大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是（）A．提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B．根据电泳结果，质粒上可能有一个限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，可能有两个限制酶Ⅲ的切割位点C．电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D．将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂进行鉴定20．细菌抵御噬菌体的机理如下图所示：当某些细菌第一次被特定的噬菌体感染后，细菌Cas2基因开始表达出Cas2（一种限制酶），Cas2会随机低效切断入侵的噬菌体DNA，并将切下的DNA片段插入CRISPR位点。当再次遭到同种噬菌体入侵时，细菌转录产生的crRNA便会将另一种限制酶（如Cas9）准确带到入侵者DNA处，并将之切断。下列叙述错误的是（）A．Cas2切下1个DNA片段的过程中，需破坏4个磷酸二酯键B．Cas9借助crRNA识别外来噬菌体身份最可能是依靠碱基互补配对来实现C．切下的DNA片段插入CRISPR位点后，会随着细菌DNA的复制而复制D．上图中crRNA的模板链最初来源于噬菌体DNA，其翻译的产物是Cas9三、综合题21．GA3是一种由C、H、O三种元素构成的与赤霉素作用类似的植物生长调节剂，能促进茎伸长和种子萌发。GA3的广泛施用会导致其在土壤中残留，研究小组从长期施用GA3农田的土壤中筛选出了能降解GA3的菌株。据图回答下列问题：（1）过程②是将稀释的含有降解GA3的菌株接种到甲瓶培养液中，这样做的目的是。（2）乙培养基中含有的唯一的碳源应该是，实际操作时，乙培养基上可能还有其他微生物，原因是。（3）振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，原因是振荡培养能提高培养液中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。（4）为调查土壤中能降解GA3的菌的数量，进行了如下实验：下图中3号试管中样品液的稀释倍数为倍，5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为个。22．如图是科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导胚胎干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠的流程。回答下列有关问题：（1）图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的过程类似。该过程结束后，细胞的全能性（填“提高”或“降低”）。（2）从黑鼠体内获得体细胞培养时，必须保证环境是的，培养液需定期更换，原因是。将它们置于含有的混合气体的CO2培养箱中进行培养（3）将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为，克隆鼠X的体色为。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是。23．马铃薯是一种分布广泛、适应性强、产量高、营养价值丰富的粮食和经济作物。培育脱毒和抗毒的马铃薯品种是解决马铃薯质量退化和产量下降的有效方法。（1）马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，茎尖离体培养大致过程如图1所示，马铃薯茎尖外植体大小对苗的脱毒率和成活率的影响如图2所示。请回答问题：①依图1分析，马铃薯脱毒苗培养依据的主要原理是。将微茎尖接种在添加有等植物激素的培养基中，经过过程完成组织培养，获得试管苗。对脱毒苗进行病毒检测时，可采用方法检测病毒的蛋白质。②由图2可知，应大小为mm的茎尖外植体适宜马铃薯脱毒苗的培养。（2）研究表明将感染马铃薯的病毒（遗传物质是DNA）的蛋白质外壳基因导入马铃薯体内可以获得抗病毒的植株。①将马铃薯病毒的蛋白质外壳基因转入马铃薯核基因组中，常用的导入目的基因的方法是。筛选出抗病毒马铃薯细胞后，再将马铃薯细胞培养出完整植株。②在个体水平鉴定马铃薯植株是否具有抗病毒特性的方法是，观察其生长状况。24．新冠病毒是一种带包膜的RNA病毒，膜表面的刺突蛋白（S蛋白）与宿主细胞膜表面的受体ACE2结合，介导病毒进入宿主细胞。进一步研究发现，RBD是S蛋白中负责和受体ACE2结合的关键蛋白。基于以上研究，某科研团队研发了一种重组新冠病毒疫苗，制备过程如图所示。请回答下列问题：（1）为获得更多的RBD蛋白基因，可利用PCR技术进行扩增，该技术需要设计一对引物（引物1和引物2），引物的作用是，PCR过程完成三次循环所需引物的数目共为个。六次循环后，产生的双链等长的DNA片段数目是。（2）逆转录获得的RBD蛋白基因不含有限制酶识别序列，这就需要在对目的基因进行PCR扩增时，在设计的目的基因引物的一端加装限制酶的识别序列，应加在引物的（填“3'”或“5'”）端，为了避免目的基因自身环化，最好在两种引物的一端加装（填“相同”或“不同”）的限制酶的识别序列。（3）为了确定目的基因是否表达，应先从受体细胞中提取（填“RBD蛋白”或“所有蛋白质”），再利用抗原-抗体杂交法来检测。（4）下图所示的引物中，引物设计不合理，原因是。25．幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，该菌的Ipp20基因能合成其特有的蛋白质，据此，研究者利用基因工程制备Hp疫苗。已知Ipp20基因表达时，双链DNA的一条链是编码链，另一条链是模板链，如图1；四种限制酶及其识别序列如图2；三种质粒如图3，箭头表示限制酶的切割位点；操作步骤如图4。回答下列问题：（1）Ipp20基因终止子序列位于图1中的区段。若通过PCR技术大量扩增Ipp20基因的编码区段，则需要设计一对引物，其中结合到编码链上的引物序列是（方向为5'→3'，写出5'端8个碱基序列）。（2）据图1，2，3分析，构建基因表达载体时，应选用的限制酶是，最适合用作载体的质粒是。（3）图4中为筛选出含有目的基因的大肠杆菌，通常采用影印法（使用无菌的线毡布压在培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在培养基B上、结果如图所示）。培养基A、B中应分别添加，符合实验要求的菌落是（填写数字）。（4）启动子具有物种和组织特异性，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达，基因表达载体中启动子的作用是。

答案解析部分1．【答案】A【解析】【解答】A、泡菜发酵液营养丰富，其表面氧气含量也很丰富，因此泡菜发酵液表面有一层白膜是酵母菌大量繁殖的结果，A错误；

B、在制作泡菜时，食盐用量过低，容易造成细菌大量繁殖，所以“极咸”盐水可减少杂菌繁殖，降低泡菜中的亚硝酸盐含量，B正确；

C、洗过菜的盐水中会有蔬菜表面的乳酸菌，所再倒入菜坛中的“洗菜盐水”也可能含有泡菜发酵的乳酸菌，C正确；

D、“令没菜把即止”就是要用盐水淹没蔬菜，乳酸菌发酵需要无氧条件，所以“令没菜把即止”主要是为泡菜中乳酸菌发酵创设无氧条件，D正确。故答案为：A。【分析】1、泡菜制作原理：乳酸菌在无氧条件下进行乳酸发酵，将葡萄糖分解成乳酸。

2、加入调味料后要装坛密封(坛盖边沿水槽注水)，目的是创造无氧条件，利用乳酸菌发酵。

9.泡菜中亚硝酸盐的含量与腌制时间、腌制温度和食盐用量有关。温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，易造成细菌大量繁殖，使亚硝酸盐含量增加。2．【答案】C【解析】【解答】A：传统发酵技术不一定利用的就是原核生物，果酒制作中会利用酵母菌，酵母菌是真核生物，A错误；

B、果醋制作中，醋酸发酵需要有氧条件，所以发酵是在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物，B错误；

C、谷物，水果等原料可为微生物的生长提供各种营养物质，发酵前无需进行灭菌处理，C正确；

D、果酒、果醋制作过程中都有二氧化碳产生，二氧化碳溶于水生成碳酸使pH降低，所以果醋、果酒制作过程中pH都会逐渐降低，D错误。故答案为：C。【分析】1、果酒制作菌种是酵母菌，是一种单细胞真菌，真核生物，代谢类型为异养兼性厌氧型，适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。

2、果醋制作菌种是醋酸菌，原核生物，代谢类型为异养需氧型。原理如下：（1）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。（2）当氧气充足，缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。3．【答案】C【解析】【解答】A、基因工程又叫转基因技术，是一种在体外进行的重组DNA技术，A正确；B、蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，B正确；C、蛋白质工程本质上是改造基因，不是直接改造蛋白质分子，C错误；D、基因工程可以按照人们的意愿赋予生物新的遗传特性，改造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，D正确。故答案为：C。

【分析】1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

2、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。蛋白质工程的过程：（1）根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。（2）最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。4．【答案】A【解析】【解答】A、结合题图信息可知，焙烤后大麦依然发生了糖化，可见焙烤并没有让酶失去活性，A错误；

B、过程②碾磨有利于淀粉与淀粉酶充分接触，这样会利于反应的进行，使淀粉完全分解，形成糖浆，B正确；

C、发酵过程中酵母菌的无氧呼吸会产生二氧化碳，为了防止发酵液溢出，发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质较少，产生的二氧化碳较少，可以延长排气时间间隔，C正确；

D、使用基因工程改造的啤酒酵母，符合人们的生产需要，这样的酵母发酵效率高，能够提高酒精产生量，可以加速发酵过程，缩短生产周期，D正确。故答案为：A。【分析】酿酒的菌种是酵母菌，是一种单细胞真菌，真核生物，代谢类型为异养兼性厌氧型，适宜条件下进行出芽生殖。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。5．【答案】D【解析】【解答】A、题干信息指出聚羟基脂肪酸酯（PHA）是某些细菌以蔗糖为原料合成的一种胞内聚酯，在培养基A中需要添加蔗糖，不能利用蔗糖的微生物是不能在该培养基上繁殖的，所以该培养基为选择培养基，A正确；

B、细菌计数板可以对细菌直接计数，B正确；

C、温度、pH等条件会影响微生物细胞内酶的活性，进而影响发酵过程，所以发酵罐内应严格控制温度、pH等条件，C正确；

D、结合题意可知，PHA是由某些细菌产生的代谢产物，需要根据其性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得PHA产品，D错误。故答案为：D。【分析】发酵工程中，如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，即可得到产品。如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。6．【答案】A【解析】【解答】A、细胞①是经免疫处理后获得的B细胞，其中包括能产生抗体的浆细胞，浆细胞不具有增殖能力，A正确；B、细胞②是骨髓瘤细胞，在体外培养时，适宜条件下具有无限增殖能力，B错误；C、细胞③是杂交瘤细胞，既能无限增殖，也能产生特异性抗体，C错误；D、细胞④是所需的杂交瘤细胞，既能无限增殖，也能产生所需抗体，D错误。故答案为：A。

【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。7．【答案】B【解析】【解答】A、植物组织培养中多用70%的酒精和5%的次氯酸钠对植物的外植体进行消毒处理，A正确；

B、形成愈伤组织的过程中，细胞分裂能力强，容易发生染色体变异和基因突变，但是愈伤组织细胞不发生细胞分化，B错误；

C、脱毒苗培育过程需要更换培养基，通过调整生长素与细胞分裂素比例来诱导愈伤组织、根和芽的分化，当生长素比例大于细胞分裂素时，利于根的形成，所以适当提高生长素的比例有利于根的分化，C正确；

D、根据题干信息可知“病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散”，由此推测植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达，D正确。故答案为：B。【分析】植物组织培养技术：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。8．【答案】B【解析】【解答】A、正是由于卵母细胞中含有易于细胞核表达的物质，所以过程①在进行核移植中才选择MⅡ期的卵母细胞，这样有利于细胞核全能性恢复，A正确；

B、图中过程②是要获得胚胎干细胞，不需要经过原肠胚，B错误；

C、图中过程③是诱导细胞分化获得神经元，而细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，所以过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，C正确；

D、由于移植神经元来自小鼠自身皮肤细胞的诱导分化，该神经元的细胞核内遗传物质与该小鼠几乎一样，所以给小鼠移植神经元不会出现免疫排斥反应，无需注射免疫抑制剂，D正确。故答案为：B。【分析】哺乳动物的胚胎干细胞：简称ES或EK细胞，是由早期胚胎（即囊胚期的内细胞团）或原始性腺中分离出来的。胚胎干细胞功能上特点：具有发育的全能性，可以分化成任何一种组织细胞。9．【答案】C【解析】【解答】A、卵母细胞去核的方法有显微操作去核法、也可以通过紫外光短时间照射、化学物质处理等方法去核，A正确；

B、结合题干信息可知，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，由此确定兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质，B正确；

C、去核的卵母细胞与供体细胞融合可以通过电融合法促进其融合，但是要激活重组胚胎的分裂和发育需要用物理或化学的方法进行激活，C错误；

D、胚胎移植过程中，受体负责繁育子代，则受体需要有健康体质和正常的繁育能力，所以在大熊猫早期胚胎移植时，应选择有健康体质和正常繁殖能力的受体，D正确。故答案为：C。【分析】细胞全能性是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。植物细胞具有全能性，动物细胞的细胞核具有全能性。10．【答案】C【解析】【解答】A、卵裂期的胚胎中细胞不断分裂会使细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加或略有缩小，A正确；

B、囊胚阶段细胞开始分化，囊胚的滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，B正确；

C、结合题干和题图信息可知，嵌合体幼鼠只是由黑鼠受精卵和白鼠受精卵嵌合在一起，而非融合，通过受精卵嵌合构成的胚胎进一步发育形成的，所以该小鼠体中有的细胞含黑鼠基因，有的细胞含白鼠基因，但一个细胞中不会同时有白鼠和黑鼠的基因，C错误；

D、囊胚中分离的胚胎干细胞来自囊胚中的内细胞团细胞，该类细胞诱导能发育成各种组织，器官甚至是个体的潜能，IPS细胞是与其相类似的一种细胞，也能分化成各种组织、器官，D正确。故答案为：C。【分析】1、卵裂期：在透明带中进行。此期细胞分裂方式为有丝分裂；细胞的数量不断增加；每一个细胞的体积减小；但胚胎的总体积并不增加，或略有缩小；由于胚胎有氧呼吸使有机物减少。

2、桑椹胚：胚胎细胞数目达到32个左右时，胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹。此阶段前（包括此阶段）的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞。

3、囊胚：聚集在胚胎一端，个体较大的细胞，称为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，而沿透明带内壁扩展和排列的、个体较小的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘。11．【答案】B【解析】【解答】A、对动物进行多次间歇注射抗原处理，可以刺激动物机体免疫系统产生能够合成并分泌相应抗体的B淋巴细胞，可以从动物脾脏中获得该类B淋巴细胞，A正确；

B、结合题干信息可知，EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但对Oua敏感，骨髓瘤细胞在HAT培养基中不能存活，但对Oua不敏感，由此可确定HAT培养基去除的是未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合细胞，Oua筛选去除的是未融合的EBV转化细胞、EBV转化细胞与EBV转化细胞的融合细胞，B错误；

C、B淋巴细胞会产生抗体，若杂交瘤细胞丢失来自B淋巴细胞的染色体，可能会导致抗体产生能力下降，C正确；

D、图中杂交瘤细胞需要经过抗体检测，才能确定该细胞是否产生所需要的抗体，才能用于生产单克隆抗体，D正确。故答案为：B。【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。12．【答案】B【解析】【解答】A、结合题干信息可知，要将含有目的基因的番木瓜细胞培育成完整植株，需要用到植物组织培养技术，A正确；

B、结合题干信息可知，华农一号获得对病毒的抗性不是表达出复制酶实现的，而是通过转录出相应的RNA与PRSV病毒的复制酶基因RNA互补配对，从而抑制其翻译过程，使其不能产生复制酶，进而阻止病毒的繁殖，B错误；

C、结合题干信息可知，该复制酶基因本质上是单链RNA，而PCR技术只能扩增DNA，则首先要通过逆转录过程获得DNA，同时PCR技术中还需要Taq酶，所以需要向反应体系中加入逆转录酶Taq酶，C正确；

D、不同的限制酶切割DNA也可能产生相同的末端，所以可以用不同的限制酶切割质粒和目的基因，D正确。故答案为：B。【分析】基因工程技术的基本步骤：

1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。13．【答案】B【解析】【解答】A、结合题干信息可知，Cas9蛋白将1＇上的a基因切除，要剪切基因需要使脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，由此推测Cas9蛋白作用于双链DNA分子中特定部位的磷酸二酯键，A正确；

B、结合题干信息可知，决定野生型按蚊能携带疟原虫的基因组成为aa，通过基因工程要将组成的基因驱动器转入野生型按蚊受精卵中，基因驱动器被整合到含a基因的同源染色体中的1上，使a基因改造成A基因，所以经过人工基因驱动改造的野生型按蚊的基因型为AA，B错误；

C、将目的基因导入动物细胞中，可以利用显微注射法将基因驱动器注入野生型按蚊受精卵中，C正确；

D、若人工基因驱动中的目的基因使按蚊只能繁衍雄性后代，按蚊是有性生殖生物，将来没有与雄性按蚊交配的雌按蚊，则雄按蚊无法繁衍子代，一段时间后按蚊物种将灭绝，D正确。故答案为：B。【分析】将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。14．【答案】D【解析】【解答】A、PCR技术中复性需要将当温度降到55℃~60℃之间左右，A错误；

B、反应体系中dNTP作为扩增的原料，会依次连接到子链的3端，B错误；

C、DNA分子中G、C碱基对之间三个氢键，A、T碱基对之间两个氢键，反应体系中引物的G、C碱基含量适当增加，其结合的特异性越强，但是G、C过高，稳定性过强，将来DNA链不易解旋，不利于DNA的扩增，C错误；

D、结合题干信息可知，组织细胞间的物质会吸附Mg2+，所以原位PCR反应体系中使用的Mg2+浓度要比常规PCR高，D正确。故答案为：D。【分析】PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。

（4）过程：高温变性、低温复性、中温延伸。15．【答案】C【解析】【解答】A、PCR体系中需要添加耐高温的DNA聚合酶，而不是从受体细胞中提取的DNA聚合酶，A错误；

B、引物是要引导DNA子链的延伸，合成多少条新的DNA子链，则需要多少个引物。图中过程Ⅱ拟对单链cDNA进行5次循环的扩增，由于是以单链为模板扩增的，循环5次后总的DNA链为32条，其中1条链为模板链，所以扩增需要引物数为31个，B错误；

C、图中过程Ⅰ是以mRNA为模板合成cDNA，由于启动子是不会被转录的，所以以mRNA为模板合成的cDNA中也没有启动子，扩增获得的基因也不含启动子，C正确；

D、PCR反应中周期性的温度可在一定范围内设置，不是特定的，D错误。故答案为：C。【分析】PCR技术：

（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。

（2）原理：DNA复制。

（3）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。

（4）过程：高温变性、低温复性、中温延伸。16．【答案】A,D【解析】【解答】解：A、若要判断培养基是否污染，可将空白培养基培养后观察是否有菌落产生，A正确；B、应先灭菌再倒平板，B错误；C、图中菌落生活在乙丙区域之间，说明该菌需要生长因子乙和丙两种生长因子，C错误；D、根据题意，不同菌种生长所需的生长因子不同，故可利用生长图形法筛选菌种，D正确。故答案为：AD。【分析】据图分析，菌落主要分布于添加了乙和丙的区域的交界处，说明该嗜热菌所需生长因子为丙和乙。种群密度是种群最基本的数量特征，是农林害虫的监测和预报、渔业上捕捞强度的确定、草地放牧强度的确定等的基础。17．【答案】A,B【解析】【解答】A、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选是利用选择培养基筛选出双杂交瘤细胞AB，A错误；

B、杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合形成，无需接触抗原就能产生抗体，B错误；

C、由于题干信息可知，双杂交瘤细胞能够悬浮在培养基中生长繁殖，不会出现接触抑制现象，所以传代培养时不用胰蛋白酶处理，C正确；

D、将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中，腹水相当于培养基，腹水能为细胞提供所需的营养条件，杂交瘤细胞可以在小鼠腹水中繁殖并分泌抗体，D正确。故答案为：A、B。【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：（1）筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）（2）筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。最终获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。18．【答案】A,B,C【解析】【解答】A、灭活是指用物理或化学手段破坏病毒或细菌的抗原结构使其失去感染能力，A正确；

B、克隆猴与人类亲缘关系较近，有相似的生理功能，将研究的药物对克隆猴使用，可以较快的判断药物对人类疾病的有效性和毒性，从而有效缩短药物研发进程，B正确；

C、题干信息指出将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚，由此看出促进组蛋白去甲基化和乙酰化，利于其基因表达，从而促进重构胚胎发育，C正确；

D、胚胎移植时进行同期发情处理，目的是使受体和供体具有相同的生理环境，利于胚胎的正常，而代孕母猴对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，D错误。故答案为：A、B、C。【分析】甲基化，是指从活性甲基化合物上将甲基催化转移到其他化合物的过程，可形成各种甲基化合物，或是对某些蛋白质或核酸等进行化学修饰形成甲基化产物。在生物系统内，甲基化是经酶催化的，这种甲基化涉及重金属修饰、基因表达的调控、蛋白质功能的调节以及核糖核酸加工。19．【答案】A,B,C,D【解析】【解答】A、由于DNA在冷酒精中几乎不溶解，提取DNA时可加入酒精，利于析出DNA，同时使溶于酒精的蛋白质等物质溶解，A正确；

B、结合题图可知，对三种限制酶处理提取的产物获得的电泳图中只用单独使用限制酶Ⅰ只产生一个条带、单独使用限制酶Ⅱ只产生一个条带，单独使用限制酶Ⅲ产生两个条带，由此说明质粒上可能有一个限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，可能有两个限制酶Ⅲ的切割位点，B正确；

C、由于DNA带负电，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；

D、在沸水条件下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，所以将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后，可用二苯胺试剂进行鉴定，D正确。故答案为：A、B、C、D。【分析】DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。20．【答案】D【解析】【解答】A、Cas2切下1个DNA片段的过程中，切割的DNA片段两侧都需要剪切，由于DNA又是双链结构，所以需破坏4个磷酸二酯键，A正确；

B、结合题干和题图信息可知crRNA会将另一种限制酶（如Cas9）准确带到入侵者DNA处，则crRNA会与DNA链结合，依靠的是碱基互补配对原则，B正确；

C、切下的DNA片段插入CRISPR位点后，相当于细菌DNA的一部分，所以该DNA片段会随着细菌DNA的复制而复制，C正确；

D、结合题干和题图信息可知，crRNA是由切下的DNA片段插入CRISPR位点后由细菌转录得到的，所以其模板链最初来源于噬菌体DNA，但是Cas9不是crRNA翻译的产物，crRNA只是将另一种限制酶Cas9准确带到入侵者DNA处，并将之切断，D错误。故答案为：D。【分析】1、转录是指以DNA的一条链为模板合成RNA的过程。

2、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”，又称限制酶。这类酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。迄今约4000种。一种限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。21．【答案】（1）富集培养GA3降解菌（2）GA3；有些微生物可利用空气中的二氧化碳作为碳源（3）溶解氧；营养物质（4）104；1.7×109【解析】【解答】（1）结合题图可知，无菌水中含有降解GA3的菌株，而过程②是将稀释的含有降解GA3的菌株接种到甲瓶培养液中，目的是富集培养GA3降解菌。

（2）结合题图信息可知，过程④要挑出单菌落接种，则乙培养基应该是选择培养基，该培养基只能降解GA3的菌种生存，所以乙培养基含有的唯一的碳源应该是GA3。实际操作时，乙培养基上可能还有其他微生物，原因是有些微生物可利用空气中的二氧化碳作为碳源。

（3）振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快，原因是振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，利于细菌呼吸作用产生更多能量用于自身生长；同时振荡还能使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。

（4）结合题图可知，10g土样加入无菌水定容至100mL，相当于稀释了10倍，然后取1mL菌液加入含9mL无菌水的1号试管又相当于稀释了10倍，同理加入2号试管稀释了10倍，加入3号试管又稀释了10倍，所以图中3号试管中样品液的稀释倍数为104倍。最后分离细菌的方法是稀释涂布平板法，三个培养皿中的菌落数都在30~300之间，数据都是有效的，首先计算出培养皿中平均菌落数：（168+175+167）÷3=170。接种到培养皿上的菌液是0.1mL，而到5号试管土壤中的菌种稀释了106倍，所以每克土壤中的活菌数为170÷0.1×106=1.7×109。【分析】稀释涂布平板法：用移液管(工具)和无菌水将菌液进行一系列的梯度稀释，然后用涂布器(工具)将不同稀释度的菌液分别均匀地涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。22．【答案】（1）脱分化；提高（2）无菌、无毒；细胞代谢物积累对细胞自身造成危害；95%空气+5%CO2（3）胚胎移植；黑鼠；核移植技术需要卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响【解析】【解答】（1）图中黑鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似。该过程结束后，细胞分化程度降低，所以细胞的全能性提高。

（2）动物细胞培养时，必须保证环境是无菌、无毒的，培养液需定期更换，原因是细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。将它们置于含有95%空气+5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。

（3）将重组囊胚移入白鼠子宫内的技术为胚胎移植。结合题图可知，克隆鼠X的体色为黑色。科学家又利用图中的三只鼠（黑鼠作为体细胞供体）通过核移植技术得到克隆鼠Y，克隆鼠X和克隆鼠Y的性状不完全相同，若不考虑环境因素的影响，造成该现象的原因可能是核移植技术需要卵细胞，卵细胞的细胞质基因对性状有一定影响。【分析】1、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。

2、胚胎干细胞的特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。23．【答案】（1）植物细胞的全能性；生长素和细胞分裂素；脱分化和再分化；抗原——抗体杂交；0.27（2）农杆菌转化法；将相应的马铃薯病毒接种到马铃薯植株上【解析】【解答】（1）①图1中将马铃薯茎尖通过植物组织培养技术培育得到马铃薯脱毒苗植株，所以马铃薯脱毒苗培养依据的主要原理是植物细胞的全能性。植物组织培养过程中需要在培养基中添加生长素和细胞分裂素等植物激素。植物组织培养技术需要经过脱分化和再分化两个过程获得试管苗。检测病毒的蛋白质可采用的方法是抗原-抗体杂交技术。

②结合图2数据可知，茎尖大小为0.27mm时，脱毒率和成苗率均较高，所以选大小为0.27mm的茎尖外植体适宜马铃薯脱毒苗的培养。

（2）①将目的基因导入