高三二轮复习生物基因工程课件

基因工程20．人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点，该位点结合BCL11A蛋白后，γ基因的表达被抑制。通过改变该结合位点的序列，解除对γ基因表的抑制，可对某种地中海贫血症进行基因治疗。科研人员扩增了γ基因上游不同长度的片段，将这些片段分别插入表达载体中进行转化和荧光检测，以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。相关信息如图所示。（1）为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加限制酶识别序列。据图可知，在F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是

，在R末端添加的序列所对应的限制酶是

。本实验中，从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要

种酶。考点：限制酶的选择和启动子功能启动子的方向研究启动子的方法限制酶的选择2021年山东（2）将构建的载体导入除去BCL11A基因的受体细胞，成功转化后，含F1～F6与R扩增产物的载体表达荧光蛋白，受体细胞有荧光，含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光。含F7与R扩增产物的受体细胞无荧光的原因是

（3）向培养液中添加适量的雌激素，含F1～F4与R扩增产物的受体细胞不再有荧光，而含F5～F6与R扩增产物的受体细胞仍有荧光。若γ基因上游调控序列上与引物序列所对应的位置不含有BCL11A蛋白的结合位点序列，据此结果可推测，BCL11A蛋白结合位点位于

，理由是

。启动子的调控2022年山东25.某种类型的白血病由蛋白P引发，蛋白UBC可使P被蛋白酶识别并降解，药物A可通过影响这一过程对该病起到治疗作用。为探索药物A治疗该病的机理，需构建重组载体以获得融合蛋白FLAG-P和FLAG-P△。P△是缺失特定氨基酸序列的P，FLAG是一种短肽，连接在P或P△的氨基端，使融合蛋白能与含有FLAG抗体的介质结合，但不影响P或P△的功能。（1）为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是两种引物分别与两条模板链3'端的碱基序列互补配对、为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的5'端（填“3'端”或“5'端”）。考点：引物需满足的条件、限制酶序列添加在引物的位置（2）PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后，与编码FLAG的序列形成一个融合基因，如图甲所示，其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细胞后，融合基因转录出的mRNA序列正确，翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确，但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析，出现该问题的原因是在转录出的mRNA中，限制酶识别序列对应的最后两个碱基与P基因对应的第一个碱基构成一个密码子，导致读码框改变，翻译出的氨基酸序列改变。修改扩增P基因时使用的带有EcoRⅠ识别序列的引物来解决该问题，具体修改方案是在EcoRⅠ识别序列前后增加碱基，使其碱基数目加上FLAG的碱基数目为3的倍数

。考点：密码子碱基问题（3）融合蛋白表达成功后，将FLAG-P、FLAG-P△、药物A和UBC按照图乙中的组合方式分成5组。各组样品混匀后分别流经含FLAG抗体的介质，分离出与介质结合的物质并用UBC抗体检测，检测结果如图丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC，由①②③组结果的差异推测，药物A的作用是促进UBC与FLAG-P的结合；由②④组或③⑤组的差异推测，P△中缺失的特定序列的作用是P△中缺失的特定序列是与UBC结合的关键序列

。（4）根据以上结果推测，药物A治疗该病的机理是药物A促进UBC与FLAG-P的结合，从而促进蛋白P被蛋白酶识别并降解，达到治疗目的。考点：抗体检测、疾病治疗25.科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5。2023年山东

（1）与图甲中启动子结合的酶是

RNA聚合酶。除图甲中标出的结构外，作为载体，质粒还需具备的结构有限制酶切割位点、标记基因、复制原点等（答出2个结构即可）。（2）构建重组质粒后，为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物F2和R1或F1与R2。已知J基因转录的模板链位于b链，由此可知引物F1与图甲中J基因的a链（填“a链”或“b链”）相应部分的序列相同。（3）重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。其中，出现条带1证明细胞内表达了J-V5融合蛋白，条带2所检出的蛋白不是（填“是”或“不是”）由重组质粒上的J基因表达的。考点：启动子、载体组成、目的基因插入质粒时引物的选择、检测、电泳【解析】【分析】基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，其中标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。【小问1详解】基因表达载体的构建启动子是为了启动下游基因的“表达”，表达首先需要转录，因此RNA聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始。作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来，图中甲有启动子和终止子等，因此质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点等。【小问2详解】据图甲可知，引物F2与R1或F1与R2结合部位包含J基因的碱基序列，因此推测为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，进行PCR检测时，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物F2和R1或F1与R2。b是模板链，而根据图上启动子和终止子的位置可知转录方向是图上从左向右，对应的模板链方向应该是3’-5'，非模板链（也就是a链）是5'-3'；考虑到DNA复制的方向是子链的5’-3'，引物基础上延伸的方向肯定是5'-3'，所以引物结合的单链其方向是3'-5'；图中F1是前引物，在左侧，所以其配对的单链是3’-5'的b链，故其序列应该与a链相应部分的序列相同。【小问3详解】据图乙可知，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测，均出现条带1，说明条带1是J-V5融合蛋白。抗J蛋白抗体检测出现条带2，抗V5抗体检测不出现条带2，说明条带2所检出蛋白不是由重组质粒上的J基因表达的。基因工程的基本工具和基本操作程序基因工程

基因工程是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。（章首页）01基因工程(重组DNA技术/转基因技术)的概念理解操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达原理基因重组结果创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品分子运输车分子手术刀分子缝合针限制性内切核酸酶----“分子手术刀”主要来自原核生物数千种▲限制酶不是一种酶，而是一类酶。来源种类特点GAATTCCTTAAG能识别双链

DNA分子的特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。02结果产生黏性末端或平末端GAATTCCTTAAG限制性内切核酸酶----“分子手术刀”作用部位识别序列长度特定切点上的磷酸二酯键大多数是6个核苷酸序列磷酸二酯键02限制性内切核酸酶----“分子手术刀”EcoRⅠ中轴线粘性末端平末端SamⅠ02限制性内切核酸酶----“分子手术刀”注意①能被限制性酶特异性识别的切割位点一般都具有回文序列：即在切割位点，DNA一条链正向读的碱基序列与另一条反向读的碱基序列完全一致。②在切割含目的基因的DNA分子时，需要在目的基因的两端都用限制性核酸内切酶切割，会产生4个末端。02DNA重组技术的基本工具:(1)限制性内切核酸酶(也称“限制酶”)原核生物特定核苷酸序列黏性末端思考：①原核生物中存在限制酶的作用是什么？提示原核生物中限制酶的作用是切割外源DNA以保证自身安全，防止外来病原物的危害。②限制酶来源于原核生物，为什么不能切割自己的DNA分子？提示限制酶不切割自身DNA的原因是原核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。DNA链接酶----“分子缝合针”将双链DNA双链片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶从大肠杆菌中分离得到只能链接互补黏性末端从T4噬菌体中分离得到黏性末端与平末端均可连接，但连接平末端的效率相对比较低。作用种类03DNA链接酶----“分子缝合针”E.coliDNA连接酶&T4DNA连接酶E.coliDNA连接酶T4DNA连接酶磷酸二酯键作用部位★DNA连接酶没有识别特异性03DNA链接酶----“分子缝合针”★思考：DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗？为什么？相同点：都是催化磷酸二酯键形成的酶不同点：DNA聚合酶连接的是游离的脱氧核苷酸，需要模板；DNA连接酶连接的是DNA片段。03DNA链接酶----“分子缝合针”名称作用部位作用结果限制酶磷酸二酯键将DNA切成两个片段DNA连接酶磷酸二酯键将两个DNA片段连接为一个DNA分子DNA聚合酶磷酸二酯键将单个脱氧核苷酸依次连接到单链末端DNA(水解)酶磷酸二酯键将DNA片段水解为单个脱氧核苷酸解旋酶碱基对之间的氢键将双链DNA分子局部解旋为单链，形成两条长链归纳总结几种相关酶的比较03(2)DNA连接酶磷酸二酯键大肠杆菌黏性末端黏性末端基因进入受体细胞的载体----“分子运输车”质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。质粒04质粒、噬菌体、动植物病毒等基因进入受体细胞的载体----“分子运输车”作用将目的基因转入受体细胞&在受体细胞内对目的基因进行大量复制通常是用质粒，噬菌体、动植物病毒也可以。种类04基因进入受体细胞的载体----“分子运输车”便于插入（携带）目的基因☆真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。运载体需具备的条件①能在受体细胞中稳定保存并复制②有一个至多个限制酶切割位点③具有标记基因，便于筛查含有重组DNA分子的细胞④对受体细胞无害、易分离04基因进入受体细胞的载体----“分子运输车”载体上标记基因的标记原理普通培养基不含抗生素选择培养基50µg/ml四环素04(3)载体环状双链DNA分子噬菌体有一个至多个自我复制染色体DNA标记对受体细胞无害、易分离图解限制酶的选择原则(1)不破坏目的基因原则：如图甲中可选择PstⅠ，而不选择SmaⅠ。(2)保留标记基因、启动子、终止子、复制原点原则：质粒作为载体必须具备标记基因，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中不选择SmaⅠ。(3)确保出现相同黏性末端原则：通常选择与切割目的基因相同的限制酶，如图甲中PstⅠ；为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶。DNA的粗提取与鉴定05一、实验原理①利用DNA、RNA、蛋白质和脂质在理化性质方面的差异进行提取和分离

DNA在不同NaCl溶液中的溶解度不同，可溶于2M的NaCl溶液中

DNA不溶于（冷）酒精，但某些蛋白质溶于酒精②在一定的温度下（沸水浴），DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色①研磨：30g洋葱切碎＋10mL研磨液，充分研磨。②过滤：纱布过滤得滤液③4℃冰箱放置或离心：1500r/min离心5min，取上清液。④加冷酒精（95%）：入等体积冷酒精，静置2～3min，用玻璃棒沿一个方向搅拌卷起丝状物。研磨液成分作用SDS使蛋白质变性EDTA抑制DNA酶活性Tris-HCl缓冲液稳定DNANaCl溶解DNA二、实验步骤DNA的粗提取与鉴定05二、实验步骤⑤鉴定：丝状物或沉淀物＋二苯胺试剂4mL混匀，沸水浴加热5min，冷却后观察到蓝色（二苯胺试剂4mL不加DNA做对照）。从左至右：少量DNA、大量DNA、空白对照DNA的粗提取与鉴定06例1.下表为常用的限制性内切核酸酶(限制酶)及其识别序列和切割位点，由此推断以下说法中，错误的是（）注：Y为C或T，R为A或G。A.HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端B.Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部C.BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端D.一种限制酶一定只能识别一种核苷酸序列限制酶名称识别序列和切割位点限制酶名称识别序列和切割位点BamHⅠG↓GATCCKpnⅠGGTAC↓CEcoRⅠC↓AATTCSau3AⅠ↓GATCHindⅡGTY↓RACSmaⅠCCC↓GGGDDNA的粗提取与鉴定06例2.第三代疫苗——DNA疫苗是指将编码保护性抗原蛋白的基因(如图甲)插入到适宜的质粒(如图乙)中得到的重组DNA分子，将其导入人体内，在人体细胞内表达的产物可直接诱导机体免疫应答，且可持续一段时间。限制性内切核酸酶的切点分别是BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。下列分析错误的是（）A.构建DNA疫苗时，可用BglⅡ和

Sau3AⅠ切割目的基因和质粒B.图乙中只用EcoRⅠ切割后的质粒，含有2个游离的磷酸基团C.用EcoRⅠ切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶连接，只产生1种连接产物D.抗原基因在体内表达时不需要解旋酶C基因工程的基本操作程序目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定07从生物材料获取目的基因基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取生物材料DNARNA一定大小范围的DNAcDNA逆转录基因组文库cDNA文库基因文库获取目的基因PCR导入受体菌中保存限制酶酶切包括①从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。②利用序列数据库和序列比对工具进行筛选。几种获取目的基因方法：项目从基因文库中获取人工合成方法从基因组文库中获取从cDNA文库中获取化学合成法逆转录法聚合酶链式反应（PCR）根据DNA半保留复制的原理，在体外（PCR扩增仪）提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）DNA模板引物稳定的缓冲溶液（一般添加Mg2+）PCR条件:四种脱氧核苷酸(dNTP)激活真核细胞和细菌的DNA聚合酶

利用PCR获取和扩增目的基因注：引物是一小段能与________的一段碱基序列________的___________。

用于PCR的引物有

种，长度通常为20~30个核苷酸。DNA母链互补配对短单链核酸3’5’DNA母链3’5’DNA母链3’5’引物3’5’引物2

▲引物:在DNA复制时，DNA聚合酶不能直接从模板链的一端直接开始合成子链，必须由引物提供3′端之后才能开始连接脱氧核苷酸。是能与DNA母链互补配对的一小段短单链核酸序列.基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取--PCR思考用PCR可以扩增mRNA吗？不能！由于RNA不稳定，需要将RNA逆转录为cDNA，然后再进行扩增单链RNA逆转录酶杂交双链DNA链RNA链核酸酶H单链DNADNA聚合酶双链DNAPCR扩增DNA模板Step1：加热至90℃以上使双链分开Step2:冷却至50℃左右使引物与DNA结合引物Step3:DNA合成+DNA聚合酶+dATP+dGTP+dCTP+dTTP第一轮的产物①变性90℃以上②复性③延伸冷却加热50℃左右引物模板结合72℃左右DNA从5’端到3’端延伸。72℃时，基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取--PCR①变性②复性③延伸循环基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取--PCR思考获取目的基因时至少要经过几次循环才能分离出目的基因？三次才能得到目的基因如何对产物进行检测鉴定？思考如何对产物进行检测鉴定？琼脂糖凝胶电泳基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取--PCR

DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷,在电场的作用下,这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就叫电泳。思考如何对产物进行检测鉴定？琼脂糖凝胶电泳凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300纳米的紫外灯下被检测出来。

DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷，在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就叫电泳。基因工程的基本操作程序071.目的基因的筛选与获取--PCRPCR技术和DNA复制的比较基因工程的基本操作程序072.基因表达载体的构建(核心工作)游离的DNA片段进入受体细胞，一般会直接被分解，就算可以进行转录和翻译成蛋白质，游离的DNA片段也无法随着细胞分裂进行复制，导致子代细胞不再含有目的基因。解决办法？思考质粒细菌染色体植物染色体细胞核表达载体基因表达载体的作用：①让目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代；②使目的基因能够表达和发挥作用。☆基因表达载体的构建是基因工程的核心工作。启动子：一段特殊DNA序列，位于基因的上游，是RNA聚合酶的识别和结合位点，启动转录过程。终止子：一段特殊DNA序列，位于基因的上游，终止转录。基因工程的基本操作程序072.基因表达载体的构建(核心工作)列表比较启动子、终止子、起始密码子、终止密码子项目启动子终止子起始密码子终止密码子本质_________________________位置目的基因上游目的基因下游mRNA首端mRNA尾端功能__________________________________________________________________________________________________________________________________________DNADNAmRNAmRNA使转录在所需要的地方停下来翻译的起始信号(编码氨基酸)翻译的结束信号(不编码氨基酸)RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA基因工程的基本操作程序072.基因表达载体的构建(核心工作)思考限制酶的选择构建载体时，需要用同种限制酶切割载体和目的基因，以获得相同的黏性末端，便于两者顺利连接。但是由于被切割后的质粒本身也具备相同的黏性末端，所以会有一定概率的自身环化，你有办法解决这个问题吗？请提出自己的看法。基因工程的基本操作程序072.基因表达载体的构建(核心工作)①单酶切法目的基因3.基因表达载体的构建过程思考：单酶切的方法缺陷是什么？单酶切缺点:质粒重新环化目的基因自身环化质粒与目的基因反向连接

(后果)如何避免上述问题？abab双酶切的优点:防止质粒重新环化防止质粒与目的基因反向连接防止目的基因自身环化②双酶切法构建过程抗虫棉的培育过程2.基因表达载体的构建1.目的基因的筛选与获取3.将目的基因导入受体细胞4.目的基因的检测与鉴定Bt基因Ti质粒重组DNA分子将目的基因插入染色体DNA中

从社会中来基因工程的基本操作程序073.将目的基因导入受体细胞目的基因导入受体细胞细胞种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射法Ca2+处理法（感受态细胞法）受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程以农杆菌转化法为例：将目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA上→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取受精卵→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子基因工程的基本操作程序073.将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法农杆菌生活在土壤中的微生物，自然条件下可侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。基因工程的基本操作程序073.将目的基因导入受体细胞农杆菌转化法122.将新鲜的从叶片上取下的圆形小叶与农杆菌共培养，然后筛选转化细胞，并再生成植株；1.将花序直接浸没在含农杆菌的溶液中一段时间，然后培养植株并获得种子，再进行筛选、鉴定。基因工程的基本操作程序073.将目的基因导入受体细胞两次拼接：第一次拼接是将目的基因拼接到Ti质粒的T-DNA上；第二次拼接(非人工操作)指被插入目的基因的T-DNA拼接到受体细胞染色体的DNA上。两次导入：第一次导入是将含目的基因的Ti质粒导入农杆菌；第二次导入(非人工操作)是指含目的基因的T-DNA导入受体细胞。

提醒：农杆菌转化法中的两次拼接、两次导入基因工程的基本操作程序074.目的基因的检测与鉴定分子水平检测目的基因DNA分子杂交检测mRNA检测表达的蛋白质分子杂交抗原—抗体杂交PCR反应PCR反应标记基因标记基因检测目的基因DNA分子杂交检测mRNA检测表达的蛋白质分子杂交抗原—抗体杂交基因工程的基本操作程序074.目的基因的检测与鉴定分子水平PCR检测普通培养基不含抗生素选择培养基50µg/ml四环素抗性鉴定基因工程的基本操作程序074.目的基因的检测与鉴定个体水平抗虫鉴定棉铃虫棉铃虫（死亡）基因工程的基本操作程序074.目的基因的检测与鉴定个体水平基因工程的应用和蛋白质工程基因工程在农牧业方面的应用①转基因抗虫植物②转基因抗病植物③转基因抗除草剂植物④转基因改良植物的品质提高作物抗逆能力改良作物的品质改良动物的品质⑤用于提高动物生长速度⑥用于改善畜产品的品质01基因工程在农牧业方面的应用①转基因抗虫植物提高作物抗逆能力从某些生物中分离出抗虫基因导入作物，使之具有抗虫性状①-1优点：减少化学农药的使用、降低生产成本、提高产量Bt毒蛋白基因

蛋白酶抑制剂基因

淀粉酶抑制剂基因植物凝集素基因等

①-2抗虫基因：①-3实例：转基因抗虫棉、玉米、大豆、水稻和马铃薯等。转基因抗虫棉01基因工程在农牧业方面的应用②转基因抗病植物提高作物抗逆能力将某些病毒、真菌等的抗病基因导入作物，培育出抗病作物。②-1优点：减少化学农药的使用、降低生产成本、提高产量②-2抗病基因：②-3实例：抗病毒转基因甜椒、番木瓜和烟草等抗病毒的目的基因抗真菌的目的基因病毒外壳蛋白基因病毒复制酶基因几丁质酶基因抗毒素合成基因01基因工程在农牧业方面的应用②转基因抗病植物提高作物抗逆能力易感（非转基因）番木瓜品种被PRSV感染。在非转基因番木瓜田的植物中没有收获果实。工程抗病毒木瓜领域完全免受PRSV感染。病毒外壳蛋白基因(CP)的机理a.在植物细胞中积累的外壳蛋白会将入侵的病毒核酸包裹，抑制核酸的复制和表达；b.抑制病毒脱外壳；c.外壳蛋白基因转录出的RNA和病毒RNA相互作用。01基因工程在农牧业方面的应用③转基因抗除草剂植物提高作物抗逆能力抗草甘膦玉米抗草甘膦大豆实验01基因工程在医药卫生领域的应用干扰素是动物或人体受到病毒侵染后产生的一种细胞因子，是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，因此在临床上常作为抗病毒的特效药。★生产过程01基因工程在医药卫生领域的应用反刍动物乳腺人生长激素基因显微注射01基因工程在食品工业方面的应用阿斯巴甜天冬氨酸-苯丙氨酸利用基因工程菌除了可以生产药物，还能生产食品工业用酶、氨基酸和维生素等。01

以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。(教材P93黑体字)---第二代基因工程途径目的蛋白质工程蛋白质工程的原理和利用02基因工程的局限性：原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。天然蛋白质符合特定物种生存需要不一定符合人类生产、生活需要蛋白质工程改造蛋白质工程的原理和利用02干扰素改造干扰素（半胱氨酸）体外很难保存干扰素（丝氨酸）体外可以保存半年赖氨酸（人体必需氨基酸）玉米中含量较低蛋白质工程改造蛋白质工程的原理和利用02天冬氨酸激酶二氢吡啶二羧酸合成酶前体物质赖氨酸玉米活性很低，造成赖氨酸含量较低天冬氨酸激酶（352位的苏氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（104位的天冬酰胺）天冬氨酸激酶（异亮氨酸）二氢吡啶二羧酸合成酶（异亮氨酸）改造