2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年沪科版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，下列有关胚胎干细胞的叙述错误的是（）A.胚胎干细胞可以由早期胚胎或原始性腺中分离获得B.在形态上具有体积大、细胞核小、核仁明显的特点C.ES细胞在饲养层细胞上，能够维持不分化的状态D.分化诱导因子可诱导ES细胞向不同类型细胞分化2、用质粒（甲）和含目的基因的DNA片段（乙）构建基因表达载体获得转基因大肠杆菌；下列叙述错误的是（）

A.若通过PCR技术获取该目的基因，应该选用引物甲和引物丙B.利用质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和HindⅢ剪切C.若将基因表达载体导入受体细胞中，需选用感受态的大肠杆菌D.用含氨苄青霉素的培养基即可筛选出含目的基因的大肠杆菌3、下面是3种限制性核酸内切酶对DNA分子的识别序列和剪切位点图（箭头表示切点；切出的断面为粘性末端），下列叙述错误的是（）

限制酶1：--↓GATC--；限制酶2：--CCGC↓GG--；限制酶3：--G↓GATCC--A.不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，体现了酶的专一性B.限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对C.限制性酶1和酶3剪出的粘性末端相同D.限制酶2能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列4、下列关于现代生物技术应用的叙述，错误的是（）A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体C.植物组织培养技术可用于作物脱毒D.动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育5、研究人员制备哺乳动物膀胱生物反应器，用其获得人体特殊功能蛋白W的基本过程如下图所示。下列有关叙述正确的是（）

A.步骤①和②所代表的操作分别是显微注射、受精卵获能B.步骤③的代孕性体无需进行同期发情处理C.可收集膀胱生物反应器的尿液来提取WD.转基因的动物乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞中都能表达W基因6、下列关于转基因技术的应用的叙述，不正确的是（）A.可以将抗病虫害、抗除草剂等基因转入农作物使其具有相应的抗性B.可以使用DNA重组技术，使微生物生产稀缺的药物，如免疫球蛋白等C.可以通过转基因技术使奶牛变成生物反应器，使它们的奶中富含某种营养物质、珍贵药材或人类所需要的蛋白质D.将不同生物的DNA进行转移和重组，会创造出新物种评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述。对图示生物概念模型的分析正确的是（）

A.若该模型表示体外受精技术，则C不能直接移植到代孕母体B.若该模型表示核移植技术，则C→D过程与胚胎移植技术有关C.若B表示培养液和胚胎干细胞，则C→D的培养过程中有可能出现分化现象D.若该模型表示农杆菌转化法操作流程，则C可表示Ti质粒，D是植物细胞8、荧光定量PCR技术可定量检测样本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸检测。其原理是：先由病毒的RNA逆转录得到cDNA，然后对得到的DNA进行PCR扩增。在PCR反应体系中加入引物的同时，加入与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每个DNA分子扩增一次，就有一个荧光分子生成（如图）。Ct值（循环阈值）的含义为：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。下列说法错误的是（）

A.扩增过程中引物先于探针结合到模板DNA上B.若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，经n次循环后，需要消耗荧光探针2n-1个C.C值越大表示被检测样本中病毒数目越多D.若样本被污染，RNA酶将病毒RNA降解，检测结果可能为阴性9、生物兴趣小组的三位同学吃冰激凌后有两人严重腹泻，他们怀疑冰激凌中大肠杆菌超标。卫生部门规定1000mL自来水37℃培养48h后大杆菌菌落数不能超过3个，于是他们设计实验对此冰激凌进行检测。下列实验操作，不合理的是（）A.再去小店买一个同样品牌的同种冰激凌，然后配制伊红美蓝培养基（该培养基可用来鉴别大肠杆菌），灭菌、倒平板B.取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×105C.取各个稀释浓度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，共培养18个平板，在适宜温度下培养48hD.统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小10、下列关于基因工程中几种工具的叙述，正确的是（）A.限制酶可水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来C.DNA聚合酶能够从核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因11、草莓是一种营养价值较高的水果，深受人们喜爱，但由于草莓是无性繁殖，感染的病毒很容易传给后代，导致产量降低，品质变差。科研人员通过热处理结合茎尖培养法，取得了较好的脱毒效果，实验结果如下表所示(S代表成活率，D代表脱毒率)。下列叙述正确的是（）。茎尖长度(mm)

38℃热处理时间(d)

10203040400.3~0.5S：36.7%

D：81.8%S：40.0%；

D：83.3%S：30.0%

D：100%S：16.7%

D：100%0.5~0.8S：60.0%：

D：66.7%S：60.0%；D：72.2%S：50.0%

D：93.3%S：40.0%

D：100%0.8~1.0S：93.3%：

D：57.1%S：85.7%：

D：69.2%S：60.0%：

94.4%S：46.7%：

D：92.5%

A.茎尖培养法运用了植物组织培养技术B.热处理的目的可能是阻止病毒进入茎尖C.热处理时间越长，成活率越高D.脱毒率与茎尖大小呈负相关12、利用胶体金检测技术检测抗原最常用的是双抗夹心法。双抗夹心法需要准备待测抗原的配对抗体；一个抗体用胶体金标记（即胶体金标记抗体）并固定在结合垫上，另一个抗体固定在NC膜的检测线（T线）上。另外，还需要准备能与金标抗体特异性结合的二抗并固定于NC膜的控制线（C线）上，如图所示。下列说法错误的是（）

A.样品中含有待测抗原时，T线和C线均会显色B.图中的抗体都需要与抗原结合C.结合垫是为了固定金标抗体D.若T线不显色说明检测结果无效13、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源14、某种物质S（一种含有C；H、N的有机物）难以降解；会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲，乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y下列分析正确的是（）

A.Y物质是琼脂，甲和乙均需采用高压蒸汽灭菌B.若摇瓶甲细菌细胞估算数为2×107个/mL，每个平板接种量为0．1mL，菌落平均数为200个，则摇瓶内菌液至少稀释104倍C.③过程所使用的接种环，需采用灼烧灭菌法进行灭菌D.⑤过程中若S的浓度超过某一浓度时，菌株对S的降解量可能会下降15、下列关于微生物发酵的叙述，错误的是（）A.制备培养基过程中，需要在灭菌后进行pH的调节B.制作果酒时适当加大接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌生长C.现代发酵工程选育出性状优良的菌种后即可进行发酵罐内的发酵D.醋酸菌能将乙醇变成乙醛而后变为乙酸，故夏天开瓶后的红酒容易变酸评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)16、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）17、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。18、结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：______和______。19、通常将DNAD的羟基（—OH）成为_______________端，而磷酸基团的末端成为___________端。由于_______________，因此DNA需要引物，因此DNA的合成方向总是从_________________延伸。20、通过____________的方式，来控制NaCL溶液的浓度，使DNA在盐溶液中溶解或析出。21、应用分析与比较的方法，对生殖性克隆与治疗性克隆进行列表阐述｡

生殖性克隆与治疗性克隆的比较。比较项目生殖性克隆治疗性克隆含义__________用到的技术__________目的__________22、在日常生活中，我们还遇到哪些有关生物技术安全与伦理问题？我们能基于所学生物学知识参与这些问题的讨论吗？尝试举一个实例加以说明______。评卷人得分四、判断题(共3题，共24分)23、目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。（选择性必修3P54）()A.正确B.错误24、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。（选择性必修3P90）()A.正确B.错误25、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共1题，共6分)26、黄粉虫可以吞食；降解塑料；利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解，是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化微生物的过程，回答下列问题：

(1)富集培养基按物理性质属于___________培养基，不含有_____________，但含有酵母膏、蛋白豚。酵母膏能提供所需的__________________。

(2)选择培养基中需加入_______________作为唯一碳源，稀释涂布后最后一组可能形成菌落。统计菌落数目的方法有_______________和利用显微镜直接计数。

(3)如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染，黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解______（填“会”或“不会”）造成二次污染。评卷人得分六、综合题(共4题，共36分)27、科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛；如果要加快转基因奶生的繁殖速度，可以对此转基因奶牛进行克隆（如图所示）。

（1）在进行细胞培养之前，要对取自转基因奶牛的组织进行分离，形成单个细胞，这一过程中需要利用________酶处理。

（2）在进行原代培养时，细胞的增殖方式是_________。此外，细胞增殖还表现出贴壁生长和_________等特点。

（3）操作中需要将人生长激素基因的奶牛体细胞的细胞核移入去核的___________中。

（4）利用____________技术可获得同卵多胎，对_____________时期的胚胎进行胚胎移植可获得多个的转基因个体。28、目前，常态化疫情防控已经成为我们生活的一部分，正确佩戴口罩是预防新冠肺炎的有效手段。为了解某种医用防护口罩（经灭菌）佩戴时间对防护功能的影响，进行了实验研究，参与实验的志愿者随机分为甲、乙，丙三组，在无菌实验室佩戴不同时间后取样。取样过程：分别剪取口罩内层（与口和皮肤接触面）和外层6cm×6cm无纺布，剪碎后加入5mL培养液中，震荡2分钟，待无纺布碎片自然沉降后，取上清液1mL接种于固体培养基上，37℃培养箱培养48小时后，在放大镜下统计每cm2培养基上的菌落数；每组取平均值。滤菌率=（内层菌落数-外层菌落数）/内层菌落数。结果见表。

。组别佩戴时间培养基上每cm2菌落数（个）滤菌率%内层外层内层外层甲20分钟23.670.9596.13乙2小时73.932.9196.06丙4小时129.7510.1692.17（1）上述实验中，需要进行灭菌处理的是____________

A．剪刀B．培养基C．放大镜D．取样的口罩纱布。

（2）口罩上细菌可能的来源有____________

A．人体皮肤B．人体呼出气体C．口罩D．外界空气。

（3）培养基上统计的菌落数往往比口罩上活菌的实际数目_____________，原因是_____________。

（4）从表中数据可知，口罩内层细菌数量较多，且随着佩戴时间的延长细菌数量增长显著。根据你的生活经验和所学知识，分析口罩内层细菌数量增长的可能原因是____________________。（要求答出两点）

（5）我国规定医用防护口罩对细菌的滤菌率达到95%为合格。根据表中数据，医务人员佩戴此类一次性口罩较为合理的时间是__________________。29、在拟南芥种子发育过程中；由受精极核（相当于含有一套精子染色体和两套卵细胞染色体）发育的胚乳到一定时期会被子叶完全吸收。在拟南芥种子萌发过程中，子叶的功能是为胚发育成幼苗提供营养。

（1）M基因具有抑制胚到发育的作用。研究者利用______法将T-DNA插入到拟南芥的M基因中；使M基因功能丧失（记为m），导致胚乳发育过度，而使种子败育。

（2）M基因具有MD、MR两种等位基因；为研究基因的遗传规律，研究者用不同基因型的拟南芥进行杂交实验（如下表）。

。实验一实验二实验三实验四母本MDMDMRMRMDMDMDm父本MRMRMDMDMDmMDMDF1种子育性可育可育可育1/2可育1/2败育表中的实验三与实验四互为____实验。分析实验一和实验二，可得出的结论是MD和MR不影响_____。依据实验三和四的结果推测，来自______（选填“母本”或“父本”）的M基因不表达。

（3）为进一步用杂交实验验证上述推测，将实验三的F1植株全部进行自交，若推测成立，F1植株所结种子中能发育成植株的占____。

（4）为从分子水平再次验证上述推测；研究者对实验一和实验二中所结种子的M基因的转录水平进行鉴定；结果如图1。

鉴定杂交结果时，分别提取种子中胚和胚乳的总RNA，通过____获得cDNA，进行PCR扩增后电泳。结果表明M基因在____细胞中均可转录，来自____的M基因在__细胞中不转录。30、阅读以下材料，回答（1）〜（5）。

基因魔剪：CRISPR/Cas系统。

要揭示生命的运作原理；常需要对基因进行编辑。在过去，这一步异常艰难。但随着CRISPR/Cas技术的出现，科学家已能在极短时间内就更改生命密码。

CRISPR/Cas9系统由Cas9蛋白和人工设计的gRNA构成。在gRNA引导下；Cas9与靶序列结合并将DNA双链切断。随后细胞通过自身的DNA损伤修复机制，将断裂上下游两端的序列连接起来，但通常会在断裂处造成少量核苷酸的插入或缺失。当DNA双链断裂后，如果细胞中有DNA修复模板（由需要插入的目的基因和靶序列上下游的同源序列组成），断裂部分可依据修复模板进行精确修复，从而将目的基因描入到指定位点。

通过在Cas9基因中引入突变，获得了只有切割一条链活性的nCas9。将nCas9与胞嘧啶脱氨酶或腺嘌呤脱氨酶融合，科学家开发出了单碱基编辑技术（图2)，能够对靶位点进行精准的碱基编辑，最终可以分别实现C→T(G→A)或A→G(T→C)的减基替换。

对CRISPR/Cas系统的不断改造；使其在基因编辑外，还可用于激活或抑制基因的转录等。虽然目前CRISPR/Cas技术还存在一些不足，如脱靶问题等，但作为一种革命性的技术，其应用前景广阔。

（1）利用CRISPR/Cas9技术进行基因编辑，需构建含gRNA基因和Cas基因的___________，并导入受体细胞。gRNA依据___________原则与靶序列特异性结合；引导Cas9蛋白进行切割。

（2）有些遗传病是由于基因中一个碱基对的改变引起的，如果要修正此基因突变，图示的三种途径中，哪种更为合适？__________请判断并说明理由__________。

（3）如果要利用CRISPR/Cas9技术将一个基因从基因组序列中删除，设计gRNA的思路是___________。

（4）将CRISPR/Cas9技术用于抑制基因转录时（不改变基因结构），需对CRISPR/Cas9系统进行改造和设计，请写出基本思路__________。

（5）将CRISPR/Cas技术应用于人类基因的编辑时，特别要注意___________方面的问题。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、B【分析】【分析】

胚胎干细胞：（1）来源：哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。

【详解】

A；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来；A正确；

B；胚胎干细胞在形态上表现为体积小；细胞核大，核仁明显的特点，B错误；

C；在饲养层细胞上；胚胎干细胞可维持不分化状态，C正确；

D；在ES细胞培养液中加入分化诱导因子牛黄酸或丁酰环腺苷酸等物质时；就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化，D正确。

故选B。

【点睛】2、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2；基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3；将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4；目的基因的检测与鉴定：

（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因：DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA：分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。

（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；根据图乙中子链延伸方向；若通过PCR技术大量扩增该目的基因，应该选用引物甲和引物丙，A正确；

B；图甲中BamHⅠ同时破坏两种抗性基因；不能选用，故图乙中目的基因左侧只能选BclⅠ，而质粒上没有目的基因右侧Sau3A的切点，两者都有HindⅢ的切点，为了防止目的基因与质粒随意连接，故质粒和目的基因构建表达载体，应选用BclⅠ和HindⅢ剪切，B正确；

C；若将基因表达载体导入受体细胞大肠杆菌时；需用钙离子等处理，使其处于感受态，C正确；

D；在受体细胞中；插入目的基因时氨苄青霉素抗性基因被破坏，不能和目的基因同时表达，含氨苄青霉素的培养基上含目的基因的大肠杆菌不能存活，D错误。

故选D。

【点睛】3、D【分析】【分析】

一种限制酶只能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．图中识别序列和剪切位点可以看出，限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对，并且限制酶1和3剪出的粘性末端均为GATC。

【详解】

A；酶具有专一性；不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点，A正确；

B；图中可得；限制酶2和3识别的序列分别是CCGCGG和GGATCC，均为6个碱基对，B正确；

C；限制酶1和3剪出的粘性末端相同；均为GATC，C正确；

D；限制酶只能识别特定的DNA序列；因此三种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核苷酸序列，D错误。

故选D。

【点睛】4、B【分析】蛋白质工程与基因工程不同；基因工程产生的是自然界中原有的蛋白质，而蛋白质工程能创造出自然界没有的蛋白质。体细胞杂交技术目前主要用于制备单克隆抗体，克隆动物涉及了细胞核移植；早期胚胎培养和胚胎移植等技术。

【详解】

A；蛋白质工程可通过对现有基因进行改造后而合成自然界中不存在的蛋白质；A正确；

B；克隆动物利用了细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术；体细胞杂交技术目前主要用于制备单克隆抗体，B错误；

C；茎尖和根尖等分生区几乎不含病毒；所以将植物分生区（茎尖、根尖等）进行组织培养可以获得脱毒苗，C正确；

D；动物细胞培养技术是细胞工程中基本的技术手段；可为动物的转基因技术提供受体细胞等，并且基因工程中的受精卵同样需要用动物细胞培养技术培养成早期胚胎进行移植，D正确。

故选B。5、C【分析】【分析】

分析题图：①表示将目的基因导入受体细胞；②表示早期胚胎培养；③表示胚胎移植。

【详解】

A；受精卵的全能性最大；利用受精卵作为重组表达载体的宿主细胞常采用显微注射的方法将载体注入，继而对受精卵进行早期胚胎的培养（②），直到适合移植，A错误；

B；步骤③的代孕性体需进行同期发情处理；这样移植胚胎容易成功着床，B错误；

C；根据题意：转基因动物的膀胱上皮细胞能表达出W蛋白质；因此可收集膀胱生物反应器的尿液来提取W，C正确；

D；W基因是选择性表达；只在膀胱上皮细胞中表达，D错误；

故选C。6、D【分析】【分析】

植物基因工程的应用：（1）抗虫转基因植物；（2）抗病转基因植物；（3）抗逆转基因植物；（4）转基因改良植物品质．总之基因工程在农业上用于生产高产；稳产和具有优良品质的品种；能产生抗逆性品种．动物基因工程的成果：（1）提高动物的生长速度：外源生长激素基因；（2）改善畜产品的品质；（3）转基因动物生产药物；（4）转基因动物作器官移植的供体；（5）基因工程药物，如人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等．

【详解】

A；可以将抗病虫害、抗除草剂等基因转入农作物使其具有相应的抗性；A正确；

B；可以使用DNA重组的微生物；生产稀缺的基因药物，B正确；

C；可以通过转基因技术使奶牛变成生物反应器；使它们的奶中富含某种营养物质、珍贵药材或人类所需要的蛋白质，C正确；

D；将不同生物的DNA进行转移和重组；可以创造出新品种，但不能产生新物种，D错误。

故选D。二、多选题(共9题，共18分)7、A:B:C【分析】【分析】

1；基因表达载体是目的基因和载体重组后形成的。

2；体外受精是指获能的精子和成熟的卵细胞结合形成受精卵的过程。

3；胚胎干细胞具有发育的全能性；能够分裂和分化。

4；动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核；移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。

【详解】

A；若该模型表示体外受精技术；则C（受精卵）不能直接移植到代孕母体，需要将C移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。当胚胎发育到适宜的阶段时，才可以将其取出向受体移植，A正确；

B；若该模型表示核移植技术；A和B表示供体细胞核和去核的卵细胞，则C→D过程表示胚胎体外培养和胚胎移植技术，B正确；

C；若A、B表示培养液和胚胎干细胞；则C→D的传代培养过程中有可能出现分化现象，C正确；

D；若该模型表示农杆菌转化法操作流程；则C可表示重组Ti质粒，D是农杆菌，D错误。

故选ABC。8、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶链式反应扩增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2；PCR反应过程是：变性→复性→延伸。

【详解】

A；基因扩增过程中需要特定的引物；该引物的作用是定位基因的位置，与模板链结合并为子链的延伸提供起点，扩增过程中引物和探针应同时结合到模板DNA上，A错误；

B、若最初该反应体系中只有逆转录而来的一个DNA分子，每个DNA分子需要1个探针，扩增n次，可得到2n个DNA分子，则共需要消耗2n-1个探针；B错误；

C；由题可知C值越大；该反应管内的荧光信号到达设定阈值经历的循环数越大，即每次循环出现的荧光信号越少。每次循环出现的荧光信号越少，代表被检测样本中的病毒数目越少，C错误；

D；如果样本内的病毒RNA被降解；会导致无法检测出样本内的正确病毒数目，D正确。

故选ABC。9、A:B:C【分析】【分析】

1；微生物常见的接种的方法：平板划线法和稀释涂布平板法；稀释涂布平板法可用于微生物的计数。

2；稀释涂布平板法统计菌落数目的原理：①当样品的稀释度足够高时；培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌；②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。

【详解】

A；若只对一个冰激凌进行检测；样品太少则不能确定是某个冰激凌的质量问题还是这个品牌冰激凌的质量问题，正确的做法是再去小店随机买多个同样品牌的同种冰激凌，A错误；

B、测定细菌的数量，一般选用104、105、106倍的稀释液进行培养，应取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释、稀释倍数为1×10～1×106；B错误；

C；实验应该设置对照；取各个稀释浓度的冰激凌液各0.lmL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，再取一个平板接种等量无菌水（作为对照），共培养19个平板，在适宜温度下培养48h，当对照组无菌落生长时，选择菌落数在30-300的平板进行计数，C错误；

D；因为当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，故统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小，该说法合理，D正确。

故选ABC。10、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶可识别并在特定位置水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键；A正确；

B；DNA连接酶可以连接黏性末端相同；即末端碱基互补的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；

C；DNA聚合酶只能从核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C错误；

D；标记基因可将含有目的基因的细胞筛选出来；故作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，D正确。

故选ABD。11、A:B【分析】【分析】

由表格数据可知；随着茎尖长度的增长，在相同处理时间下，成活率一般增大，脱毒率一般减小。

【详解】

A；茎尖培养法运用了植物组织培养技术；原理是植物细胞的全能性，A正确；

B；热处理可以杀灭病毒、病菌；故目的可能是阻止病毒进入茎尖，B正确；

C；相同茎尖长度下；20天热处理时成活率最高，热处理时间再增加，成活率降低，C错误；

D；由表格数据可知；40天热处理时，茎尖0.3~0.5mm和0.5~0.8mm时脱毒率相同，因此只能说在一定的热处理时间内，脱毒率与茎尖大小呈负相关，D错误。

故选AB。12、B:D【分析】【分析】

T线和C线处同时显示横杠；即阳性，若样品中不含病毒，样品经过结合垫时由于不存在病毒抗原，则不存在抗原抗体特异性结合，显色组分仍会随样品继续向前运动，由于不存在病毒抗原，抗体不能与待测抗原结合，故在T线不会显色。

【详解】

A；分析题图可知；若有抗原存在，T线上的抗体能够结合抗原（该抗体经过结合垫时已经与胶体金抗体结合），则T线显色，过量的胶体金抗体会移动到C线处与二抗结合，C线也会显色，故样品中含有待测抗原时，两条线均会显色，A正确；

B；题图中过量的胶体金抗体没有结合抗原；而是与二抗结合，B错误；

C；据题意可知；样本中含有某种抗原，就会首先被结合垫上的胶体金标记抗体结合，形成“抗原—金标抗体”复合物，所以结合垫中固定了金标抗体，C正确；

D；若T线不显色；说明样品中没有抗原，D错误。

故选BD。13、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。14、A:B:D【分析】【分析】

由题图信息分析可知；通过过程①获得菌悬液，此过程中的淤泥不需要灭菌操作，过程②可以使分解S的细菌大量繁殖（选择培养），过程③通过稀释涂布获得分解S物质的单菌落，过程④再次对各种单菌落进行筛选，经过过程⑤多次筛选后获得高效降解S的菌体。

【详解】

A；甲和乙的培养基均需采用高压蒸汽灭菌；乙与甲不同的是Y，乙的培养基上有菌落生长，说明是固体培养基，因此Y是凝固剂琼脂，A正确；

B、利用稀释涂布平板法对细菌进行计数，要保证每个平板上长出的菌落数为200个，假设稀释倍数为a，在每个平板上涂布100μL（0.1ml）稀释后的菌液，则有200×a÷0.1=2×107，则稀释倍数a=104；B正确；

C；③过程采用的是稀释涂布平板法；其接种工具为涂布器，涂布器需采用灼烧灭菌法进行灭菌，C错误；

D；⑤过程中若S的浓度超过某一浓度时；会导致细菌细胞由于渗透作用失水过多，会抑制菌株的生长，使得菌株对S的降解量可能会下降，D正确。

故选ABD。15、A:C【分析】【分析】

果酒的制作利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；醋酸菌在糖源；氧气充足时；直接将葡萄糖氧化为醋酸；在糖源不足、氧气充足时，可利用酒精，即乙醇作为呼吸底物，先将乙醇变成乙醛而后变为乙酸（醋酸）。

【详解】

A；制备培养基过程中；pH的调节应在灭菌前进行，A错误；

B；制作果酒时适当加大接种量；酵母菌菌体的基数增大，可使其快速形成优势菌群，抑制杂菌生长，提高发酵速率，B正确；

C；现代发酵工程选育出性状优良的菌种后；为满足发酵过程的需要，还要对菌种进行扩大培养，之后才可进行发酵罐内的发酵，C错误；

D；醋酸菌能够氧化酒精产生醋酸；造成葡萄酒的败坏。首先，乙醇被氧化生成乙醛，然后乙醛再被氧化生成醋酸（乙酸），故夏天开瓶后的红酒容易变酸，D正确。

故选AC。三、填空题(共7题，共14分)16、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】黏性末端平末端。19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】3，5，DNA聚合酶不能从头开始合成，而只能从3，端延伸DNA子链的5，端向3，端20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】滴加蒸馏水逐渐稀释2mol/L浓度的NaCL溶液21、略

【分析】【详解】

生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎；并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术，其目的是用于生育，获得人的复制品；治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术，其目的是用于医学研究和疾病的治疗。

据概念可知，实现生殖性克隆和治疗性克隆都会用到的技术有体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等；治疗性克隆在获取胚胎干细胞后，根据治疗目的诱导干细胞分化形成各种组织和器官，供患者移植用，故治疗性克隆还会应用到的技术为干细胞培养技术。【解析】生殖性克隆指利用克隆技术获得胚胎，并将胚胎孕育成为人类个体的克隆性技术治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定细胞或组织等，用于治疗性移植的克隆性技术体细胞核移植技术、动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等体细胞核移植技术，早期胚胎培养技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术、干细胞培养技术等用于生育，获得人的复制品用于医学研究和疾病的治疗22、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。【解析】在日常生活中；我们遇到的有关生物技术安全与伦理问题有：生殖性克隆人伦理问题；试管婴儿与设计试管婴儿伦理问题、转基因产品的安全性与伦理问题和生物武器的安全性等。

例如转基因产品的安全性：转基因技术的安全性的争议；主要集中在两个方面，一是对人是否安全，二是对环境的影响。

对人的安全方面；支持转基因技术的人认为投放市场的转基因作物都是经过充分实验的，被改变的基因仅限于增加作物的抗病；抗灾害能力，并且在北美地区转基因食品已经使用的很多年，可以说现在美国加拿大20岁左右的年轻人从小就是吃转基因食品长大的；反对转基因技术的人认为转基因食品有害，他们的证据主要是一位科学家的实验证明，用转基因食品喂养的小白鼠癌症发病率明显升高，但问题是这个实验只成功过一次，后来别的科学家在相同的条件下都没能再现这个实验结果。

在环境方面对转基因技术的争议是最大的；也是欧洲人反对转基因技术的重要依据，反对人持有的观点是，通过改良基因创造出抵抗病虫害和其他灾害的植物，这种技术如果失去控制可能会把农作物改造成适应性极强的超级植物，自然平衡使任何生物都不可能占绝对优势地位，但转基因技术产生的超级植物可能会打破自然平衡而泛滥成灾。

伦理问题：由于转基因技术创新打破了物种界限,使不同物种间的基因可以进行前所未有的新组合,其可能造成的危害难以预见,这就使转基因技术创新呈现前所未有的复杂性,并不可避免地会引发很多全新的社会伦理问题,引出种种有关生物科学家的道德责任和学术自由的哲学争论。在转基因植物技术创新中,功利主义的预设和学术自由的主张必须以人类的价值、尊严和社会公正为前提条件。相关领域的科学家必须担当起必要的道德责任,把握好伦理横杆,以促使转基因植物技术创新沿着科学的轨道健康发展。四、判断题(共3题，共24分)23、A【分析】【详解】

目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法。也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性，故正确。24、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故题中描述错误。25、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。五、实验题(共1题，共6分)26、略

【分析】【分析】

分离菌株的思路：

（1）自然界中目的菌株的筛选：①依据：根据它对生存环境的要求；到相应的环境中去寻找。②实例：PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。

（2）实验室中目的菌株的筛选原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养温度.pH等）；同时抑制或阻止其他微生物生长。

(1)

富集培养基不含有琼脂；按物理性质属于液体培养基，其中酵母膏能提供所需的碳源和氮源，可获得数目较多的塑料降解菌。

(2)

筛选能降解塑料的微生物；需要使用以塑料为唯一碳源的选择培养基，稀释涂布后最后一组可能形成菌落。微生物的接种方法主要有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可以用来进行微生物的计数。

(3)

如果对白色污染进行传统填埋焚烧容易造成二次污染；黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的种类及功能，掌握接种微生物的方法及菌种保藏方法，能结合所学的知识准确答题。【解析】(1)液体琼脂碳源和氮源。

(2)塑料稀释涂布平板法。

(3)不会六、综合题(共4题，共36分)27、略

【分析】【分析】

分析题图：图示为转基因奶牛克隆的过程。首先采用基因工程技术将人的生长激素基因导入奶牛的体细胞；然后采用体细胞核移植技术将细胞核移入去核卵细胞形成重组细胞；再进行早期胚胎培养和胚胎移植得到转基因克隆牛。

（1）

在动物细胞培养时；需要采用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，使组织细胞分离，形成单个细胞。

（2）

动物细胞的培养包括原代培养和传代培养。在进行原代培养时；细胞增殖的方式是有丝分裂，动物细胞在进行原代培养时，细胞的特点是贴壁生长；接触抑制。

（3）

为了使犊牛的性状主要由供体细胞核决定；需去掉卵母细胞核，然后将进行细胞培养的供体细胞核注入去核的卵母细胞中，获得重组细胞。

（4）

胚胎分割是借助显微操作技术或徒手操作方法切割早期胚胎成二；四等多等份再移植给受体母畜；从而获得同卵双胎或多胎的生物学新技术，因此利用此技术可获得同卵多胎。桑葚胚或囊胚是由于胚胎发育时间较短，还没有和母体建立实质性的联系，胚胎所需要的养分可以有自身的储存营养物质来进行提供，并且胚胎离开母体后可以在短时间内存活。放回在与之前相同的环境中不会影响到胚胎的继续发育，因此胚胎移植时用桑椹胚或囊胚。

【点睛】

本题结合转基因克隆牛的培育过程图，考查动物细胞培养、动物体细胞核移植、胚胎移植的相关知识，要求考生识记动物细胞培养的过程；识记动物体细胞核移植的概念、过程及应用；能运用所学的知识答题。【解析】（1）胰蛋白酶或胶原蛋白酶。

（2）有丝分裂接触抑制。

（3）卵母细胞。

（4）胚胎分割桑椹胚或囊胚28、略

【分析】【分析】

1；培养基的成分包括水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。

2；微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）剪刀作为取材工具；要防止取材时杂菌污染，还有培养基是用来培养菌种的，不能有杂菌污染，这二者需要