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《仪器分析实验》分子荧光分析法Molecular

FluorimetryForshort:M-F一、分子荧光分析法简介(对光的吸收)发生激发态反应分子内的激发和衰变过程1.1荧光的产生激发态能量的跃迁与转化的形式和速率：A1,A2吸收:10-15sVR振动松弛：10-12sic内转化：

10-11sisc系间窜越：

10-6

~10-2sF荧光：10-9~10-6sP磷光：10-6~100s激发光谱发射光谱1.2荧光光谱

任何荧光化合物，都具有两种特征的光谱：激发光谱和发射光谱。组成、结构与衍化信息☆物质的化学结构☆环境与介质条件☆与其它溶质的相互作用☆反应动力学1.4荧光仪的基本构造？问题：荧光光度计与紫外-可见分光光度计在光路设置上有什么不同？为什么？1.5分子荧光分析法的应用简介★常规分析应用：

☆定性分析：φf；λex；λem；峰形等

☆定量检测：F=K﹒I0﹒φf﹒C

☆其它（略）★高端生化研究：

☆分子相互作用研究；☆代谢动力学跟踪；☆显微成像（物理迁移与化学衍化的原位“显迹”）二、维生素B6注射液中维生素B6含的

荧光法测定2.1实验原理★

在近中性的水溶液中有较强的荧光发射:

（323nm/392nm附近）

★在碱性介质中不稳定★易发生光降解VB6的化学结构2.2实验流程１、试液配制２、VB6的荧光光谱的绘制３、标准工作曲线的制作４、未知液的配制2.3注意事项：☆注射液的移取与稀释☆系列标液的测定顺序☆即放即测，防光降解☆荧光仪的开关机顺序2.4数据处理从荧光光谱图上读出最大激发（λex）和发射波长（λem）用标准工作曲线法算出所配

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