2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年浙教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷287考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞，培育成了抗虫杨树。下图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒，图中Apr表示氨苄青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是（）

A.目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中B.为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstIC.成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素D.可用DNA分子杂交或抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否表达2、培养人细胞与小鼠细胞的融合细胞发现，细胞会随机丢失来自人细胞的染色体，在仅含有人的1号染色体的融合细胞中，合成出人的尿苷单磷酸激酶。下列有关叙述中，不合理的是A.与人或小鼠细胞相比，融合细胞发生了遗传物质的改变B.研究方法中需要选择适当的培养基和细胞融合诱导技术C.在融合细胞中，人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组D.这种研究可能发现人的某一特定基因与特定染色体的关系3、新型冠状病毒可通过表面的刺突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合；侵入人体，引起肺炎。单克隆抗体可阻断病毒对细胞的粘附或入侵，故抗体药物的研发已成为治疗新冠肺炎的研究热点之一。图为筛选；制备抗S蛋白单克隆抗体的示意图。下列相关叙述，不正确的是（）

A.给图中小鼠注射S蛋白，一段时间后从小鼠的脾脏中提取B细胞，与骨髓瘤细胞融合B.经HAT培养筛选出来的杂交瘤细胞在体外扩大培养，便可大量生产出抗S蛋白单克隆抗体C.单克隆抗体可以制成诊断盒，用于疾病的诊断D.与血清抗体相比，该方法制备的单克隆抗体灵敏度更高4、下图表示利用乳腺生物反应器生产人抗凝血酶Ⅲ的过程，①②③为相关操作步骤，下列叙述错误的是（）

A.①需要将人抗凝血酶Ⅲ基因与乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起B.早期胚胎与代孕羊子宫建立的生理和组织联系不影响移入胚胎的遗传特性C.在③前最好取处于囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定D.通过该操作步骤得到的转基因羊只有乳腺细胞含有人抗凝血酶Ⅲ基因5、人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，通常从血液中提取，成本较高。如果将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，利用奶牛乳汁来生产血清白蛋白，能够极大地降低成本，且安全高效。下图是利用奶牛乳汁生产HAS的过程图，下列叙述错误的是（）

A.①进入③之前，必须构建基因表达载体，⑥进入⑦之前，必须取滋养层做性别鉴定B.在⑥阶段移植的胚胎为桑葚胚或囊胚C.该过程综合利用了核移植、动物细胞培养和胚胎移植等工程技术D.血清蛋白基因只在牛的乳腺细胞中表达与特定的启动子有关6、大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述不正确的是（）

A.提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定C.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D.根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶I和II的切割位点，而有限制酶III的切割位点7、实践表明，普通的单克隆抗体易被人体的免疫系统识别为异源蛋白而被清除。为解决这一问题，科研工作者对人源性单克隆抗体进行了研究，具体的操作过程如下：先用人的抗体基因取代小鼠的抗体基因，获得转基因小鼠；然后从接受抗原刺激的转基因小鼠体内获取B淋巴细胞，使这些B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经过筛选之后获得杂交瘤细胞用于单克隆抗体的制备。以下叙述错误的是（）A.获取转基因小鼠时，常用显微注射法将目的基因导入小鼠受精卵B.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合时，可以利用灭活的病毒进行诱导C.对融合后获得的杂交瘤细胞进行培养即可获得大量的单克隆抗体D.人源性单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、抗原性低等特点8、为探究抗生素对细菌的选择作用，将含抗生素的滤纸片放到接种了大肠杆菌的平板培养基上（如下图），一段时间后测量并记录抑菌圈的直径。从抑菌圈边缘的菌落上挑取细菌扩大培养，重复实验2~5次。下列叙述不正确的是（）

A.接种时，将高浓度菌液涂布在平板培养基上B.①处滤纸片上不含抗生素，起对照作用C.重复2~5次实验后，抑菌圈的直径会变大D.抑菌圈边缘的菌落上挑取的细菌抗药性较强9、科学家将相关基因导入体细胞，使其成为诱导多能干细胞（iPSC）。将iPSC与心肌细胞融合，获得杂交细胞（Hybridcell）。一定条件下分别诱导iPSC和杂交细胞向心肌细胞分化，统计其分化率，结果如图。相关说法不正确的是（）

A.向心肌细胞分化是基因选择性表达的结果B.诱导多能干细胞和杂交细胞都具有分化能力C.诱导20d后iPSC和杂交细胞都不再分化D.临床使用前需评估两种细胞致癌的风险评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)10、大多数哺乳动物的早期胚胎具有调节发育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以发育成一个完整的胎儿，调节能力随着发育进程逐渐减弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分离的卵裂球仍具有调整发育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而发育至囊胚。下列说法正确的是（）A.桑椹胚的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能B.桑椹胚不同部位的细胞致密化程度不同C.胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴D.胚胎发育到原肠胚阶段，可将其取出向受体移植11、2022年6月10日；世界首例体细胞克隆北极狼在北京呱呱坠地。克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园引进的一只野生北极狼的皮肤样本，卵母细胞来自一只处于发情期的母犬，代孕母体则是一只比格犬。克隆过程如图所示，下列有关叙述正确的是（）

A.体细胞核移植技术比胚胎干细胞核移植技术更易成功B.用电刺激、Ca2+载体等方法激活重构胚，促进其分裂发育C.图中细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组D.体细胞核移植技术有望用于增加濒危动物的种群数量12、高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌；其筛选过程如下图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图2所示情况。下列选项正确的是（）

A.过程①②合称为稀释涂布平板法B.甲乙试管中的液体均为选择培养基C.Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法D.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种13、下列关于限制酶和DNA连接酶的理解，错误的是（）A.限制酶能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键B.DNA连接酶可以恢复DNA分子中的氢键，将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶D.限制酶广泛存在于动植物体内，微生物内很少分布14、某植物有甲、乙两品种，科研人员在设计品种乙组织培养实验时，参照品种甲的最佳激素配比（见下表）进行预实验。为确定品种乙的II阶段的最适细胞分裂素浓度，参照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1为梯度，设计5个浓度水平的实验，其中细胞分裂素最高浓度设为M。下列有关叙述正确的是（）。品种甲组织培养阶段细胞分裂素/（μmol·L-1）生长素/（μmol·L-1）I诱导形成愈伤组织α1b1II诱导形成幼芽α2b2Ⅲ诱导生根α3b3

A.表中发生基因选择性表达的是II和Ⅲ阶段B.实验中共配制了2种不同的培养基，即生根培养基和生芽培养基C.确定品种乙II阶段最适细胞分裂素浓度的实验中，M为α2+2μmol·L-1D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)15、人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质一一培养基。其中，配制成的_______________的基质称为液体培养基，配制成的固体状态的基质称为________________________。在液体培养基中加入凝固剂_______________________后，制成琼脂固体培养基，它是实验室中最常用的培养基之一。微生物在_________________培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。（琼脂是一种从红藻中提取的____________________。琼脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常规培养条件下呈现固态。）16、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。17、原核基因采取______获得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。18、去除DNA中的杂质，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反应10—15分钟，嫩肉粉中的________________能够分解_______________。19、我国中科院神经科学研究所团队率先攻克了体细胞克隆灵长类动物这一世界难题｡他们首次成功培育出体细胞克隆猴，分别叫中中和华华（下图）｡猴子与人类同属灵长类，此前克隆灵长类动物在技术上存在着不可逾越的障碍｡克隆猴的诞生打破了这个障碍，也再次引起人们对于克隆人的担忧和猜测｡

从1997年宣布克隆羊多莉（上图）的出生，到2018年克隆猴中中､华华的诞生，这期间一些科学家试图克隆人｡举例说出克隆人面临哪些伦理问题｡_____评卷人得分四、综合题(共4题，共8分)20、图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr)和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：

（1）EcoRV酶切位点为EcoRV酶切出来的线性载体P1为___________末端。

（2）用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段；其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为___________的脱氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重组质粒P3。

（3）为筛选出含有重组质粒P3的菌落；采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A；B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“﹣”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是__________（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是_____、________________。

（4）为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是__________。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段，原因是_______________。21、乳酸菌中的谷氨酸脱羧酶（GAD）能消耗H+将谷氨酸转化为y-氨基丁酸（GABA）；GABA在制药；食品等方面具有较大应用。研究人员从泡菜样品中筛选高产GABA的乳酸菌株，并优化其发酵条件。回答下列问题：

（1）已知MRS固体培养基因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌所产的酸可与碳酸钙发生反应，从而在培养基上形成____________。从功能上判断，MRS培养基可作为乳酸菌的___________培养基。

（2）利用MRS培养基分离纯化乳酸菌时，首先需用_________对泡菜滤液进行梯度稀释，然后再结合其他方法筛选出具高产GABA特性的乳酸菌。进行梯度稀释的目的是__________________。

（3）研究人员对高产菌株产GABA的发酵时间和温度分别进行了研究；结果显示，发酵时间在48～60h范围内，GABA的相对产量较高；发酵温度在35～39℃范围内，GABA的相对产量较高。研究人员认为，要进一步提高GABA相对产量，以达到最佳生产效果，还需同时对发酵时间和发酵温度进行优化。请为该优化实验设计一个实验结果记录表。

______22、下图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图；请据图分析，回答下列问题：

（1）上述图示中，该实验的正确操作顺序是__________________（用序号与箭头表示）。

（2）在提取过程中使用不同浓度的NaCl溶液的目的是______________。

（3）步骤①的目的是____________，其依据原理是__________________。

（4）实验室还可以利用香蕉等植物样品提取DNA，利用植物组织提取DNA时，须先破碎细胞，破碎细朐时需添加食盐和_____________进行研磨，添加后者的目的是_____________。

（5）由于鸡血较难找到，某学生试图用猪血代替，结果没有成功，其原因最可能是________________。23、现代人追求高效率；高品质的健康生活；因此市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。请回答：

(1)在果酒酿造过程中，发酵罐先____________，促进酵母菌大量繁殖，然后密闭，有利于获得更多的酒精产物。若产物中生成了酒精，使用酸性重铬酸钾试剂检验呈现____________色。

(2)在果酒酿造过程中，如果果汁灭菌不严格，含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为酸并说明理由？_____________________。

(3)当缺少糖源时仍可进行醋酸发酵，其反应式为_______________。

(4)为了进一步提高果酒的品质，我们在利用发酵工程生产果酒时要向发酵罐内接种优良品种的酵母菌，某生物兴趣小组在用平板划线法分离优良品种的酵母菌时，进行了如图操作：其中较明显的一处错误是不要____________，在第二次划线前灼烧接种环，目的是_________。

参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、D【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

2；分析图示可知；为保证目的基因的完整性，不能选用BamHⅠ酶；为了防止目的基因自身环化，应选用目的基因两侧的两种不同的限制酶；重组质粒中至少要保留一个抗生素的抗性基因，PstI和TthⅢ1只能选其中一个；综上所述，可选用EcoRI和PstI或者EcoRI和TthⅢ1，为保留重组质粒中的复制原点，最好选用EcoRI和PstI同时切割目的基因和质粒。

【详解】

A；农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞；并且整合到受体细胞染色体的DNA上，根据这一特点，将目的基因插入到质粒的T-DNA上，才能整合到受体细胞染色体中，A正确；

B；由分析可知；为使目的基因与质粒高效重组，最好选用EcoRI和PstI同时切割目的基因和质粒，B正确；

C；由分析可知；应选用EcoRI和PstI切割质粒，氨苄青霉素抗性基因被破坏，故成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素，C正确；

D；检测目的基因是否表达应检测是否成功产生蛋白质；可用抗原-抗体杂交技术，D错误。

故选D。2、C【分析】【分析】

【详解】

A；融合细胞细胞会随机丢失来自人细胞的染色体；这就发生遗传物质的改变，A正确；

B；适当的培养基用来选择融合细胞；常用PEG,灭活病毒和电激来诱导细胞融合，B正确；

C；在仅含有人的l号染色体的融合细胞中；合成出人的尿苷单磷酸激酶，表明人的l号染色体有人的尿苷单磷酸激酶基因，并无证据说明人的1号染色体DNA与小鼠DNA发生了重组，C错；

D；因为融合细胞会随机丢失来自人细胞的染色体；可以借助此方法来研究某个细胞的特定性状与特定染色体的关系，D正确。

故选C

【点睛】3、B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备时动物细胞融合技术的应用之一；此过程中需要先注射抗原，使生物体产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，并筛选出能产生特异性抗体和大量增殖的杂交瘤细胞，最后经过体内和体外培养获取单克隆抗体。单克隆抗体具有特异性强；灵敏度高，并可能大量制备的优点。

【详解】

A；给图中小鼠注射S蛋白；检测到小鼠血清出现S蛋白抗体之后，说明小鼠已经产生了相应的体液免疫过程，这时从脾脏中获得相应B淋巴细胞，并诱导其与骨髓瘤细胞融合，A正确；

B；经HAT培养基筛选得到杂交瘤细胞经克隆化培养后还需进行抗体检测才能用于单克隆抗体的生产；B错误；

C；根据抗原-抗体特异性结合的原理；将单克隆抗体制成诊断盒，用于疾病的诊断，C正确；

D；一般抗血清中的抗体是一群识别不同抗原部位的抗体混合物；而单克隆抗体识别抗原部位具有专一性，所以单克隆抗体比血清抗体的灵敏度更高，D正确。

故选B。

【点睛】4、D【分析】【分析】

动物乳腺生物反应器是基于转基因技术平台；使外源基因导入动物基因组中并定位表达于动物乳腺，利用动物乳腺天然；高效合成并分泌蛋白的能力，在动物的乳汁中生产一些具有重要价值产品的转基因动物的总称。据图分析，图中人抗凝血酶Ⅲ属于目的基因，过程①表示将目的基因导入受体细胞（供体羊的受精卵），常用的方法是显微注射法；过程②表示早期胚胎培养；过程③表示胚胎移植技术。

【详解】

A；过程①表示将目的基因导入受体细胞（供体羊的受精卵）；因此，需要将人抗凝血酶Ⅲ基因与乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起，A正确；

B；早期胚胎与代孕羊子宫建立的生理和组织联系后；受体只是为胚胎的发育提供相应的环境和发育过程所需要的各种营养物质，对胚胎不会造成影响，B正确；

C；用囊胚期胚胎进行性别鉴定时；可用分割针分割部分滋养层细胞进行性别鉴定，C正确；

D；通过乳腺生物反应器生产得到的转基因羊每个有核细胞都含有人抗凝血酶Ⅲ基因；但只有乳腺细胞表达了人抗凝血酶Ⅲ基因，D错误。

故选D。5、A【分析】【分析】

分析题图：①是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用转基因技术；将目的基因（血清白蛋白基因）导入受体细胞的过程；④是重组细胞；⑤是早期胚胎；⑤～⑥采用了胚胎分割技术，对囊胚进行胚胎分割时，要将内细胞团均等分割；⑥～⑦表示胚胎移植过程；⑧是转基因生物（乳腺生物反应器）。

【详解】

A；在⑤的囊胚阶段DNA分析；进行性别鉴定，取样部位为滋养层细胞，A错误；

B；⑥阶段移植的胚胎为桑葚胚或囊胚；B正确；

C；以上过程涉及的现代生物学技术中；属于细胞工程的有核移植技术、动物细胞培养；属于胚胎工程的是早期胚胎培养、胚胎分割、胚胎移植，C正确；

D；启动子是RNA聚合酶结合和识别的位点；用于驱动基因的转录，血清白蛋白基因只在奶牛的乳腺细胞中表达与是否有启动子有关，故要使人血清白蛋白基因在转基因奶牛的乳腺细胞中表达，应将其与（牛）乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组，D正确。

故选A。6、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA时加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；

B；将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；

C；DNA带负电；电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；

D；因为质粒的本质是环状的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。

故选D。7、C【分析】【分析】

单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；在动物转基因技术中；常采用显微注射法将目的基因导入动物的受精卵，A正确；

B；常用灭活病毒诱导动物细胞融合；其原理是病毒表面的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，B正确；

C；用特定的选择培养基培养之后；筛选得到的杂交瘤细胞需经过克隆化培养和抗体检测，多次筛选才能获得分泌单一抗体的杂交瘤细胞，C错误；

D；经过转基因技术改造小鼠之后；获得的抗体是由人的抗体基因编码的，所以称为人源性单克隆抗体，能够有效解决鼠源性单克隆抗体被人体识别为异源蛋白的问题，即具有特异性强、灵敏度高、抗原性低等特点，D正确。

故选C。8、C【分析】【分析】

本实验的思路为：将含抗生素的滤纸片放到接种了大肠杆菌的平板培养基上；滤纸片周围会出现抑菌圈，在抑菌圈边缘生长的细菌可能是耐药菌；若抗生素对细菌起选择作用，则随着培养次数增多，耐药菌的比例增大，在连续培养几代后，抑菌圈的平均直径变小。

【详解】

A；将高浓度菌液涂布在平板培养基上；使平板上长出密集菌落，利于观察抑菌圈，A正确；

B；①处滤纸片周围未出现抑菌圈；滤纸片上不含抗生素，起对照作用，B正确；

C；随重复次数增加；抗药菌株的比例增加，抑菌圈的直径会变小，C错误；

D；抑菌圈边缘的菌落可能是耐药菌；所以，抑菌圈边缘的菌落上挑取的细菌抗药性较强，D正确。

故选C。9、C【分析】【分析】

1；基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术；是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子，然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性、获得新品种、生产新产品。2、细胞分化是指同一起源的细胞逐渐产生具有不同形态结构和功能特征细胞群的过程。细胞分化的实质是基因组在时间和空间上的选择性表达，通过开启或关闭不同基因的表达，产生最终的特征蛋白。

【详解】

A；多能干细胞（iPSC）向心肌细胞分化是基因选择性表达的结果；遗传物质不变，基因进行选择性表达，从而使细胞的结构、功能、形态发生变化，A正确；

B、结合图示iPSC和Hybridcells的分化率可知；诱导多能干细胞和杂交细胞都具有分化能力，且iPSC的分化率较高，B正确；

C；诱导20d后iPSC和杂交细胞都具有较高的分化率；还可以再分化，C错误；

D；iPSC是将相关基因导入体细胞而获得；杂交细胞是iPSC与心肌细胞的融合细胞，引入机体都具有一定的风险，临床使用前需评估两种细胞致癌的风险，D正确。

故选C。二、多选题(共5题，共10分)10、A:C【分析】【分析】

当胚胎细胞数目达到32个左右时；胚胎形成致密的细胞团，形似桑椹，叫做桑椹胚；实验证实，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，属于全能细胞，这些细胞都是由受精卵经有丝分裂产生的。

【详解】

A；桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能；属于全能细胞，A正确；

B；囊胚期细胞可分化内细胞团和滋养层两部分；不同部位的细胞致密化程度有差异，桑椹胚不同部位的细胞致密化程度相同，B错误；

C；胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；经移植获得同卵双胚或多胚的技术，胚胎分割属于无性繁殖或克隆的范畴，C正确；

D；胚胎移植一般选择桑椹胚或囊胚期进行；D错误。

故选AC。11、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物体通过体细胞进行的无性繁殖；以及由无性繁殖形成的基因型完全相同的后代个体。通常是利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因的个体或种群。

【详解】

A；体细胞的分化程度比胚胎干细胞的分化程度高；与体细胞核移植技术相比，胚胎干细胞核移植技术更易成功，A错误；

B；在体细胞核移植过程中；用物理方法或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白质合成酶抑制剂等）激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，B正确；

C；基因重组发生在有性生殖的生物进行减数分裂产生配子的过程中(狭义上的基因重组)以及基因工程技术中（包含在广义的基因重组内）；而细胞分裂、分化的过程一般不会发生基因重组，C错误；

D；体细胞核移植技术是无性繁殖；有望用于增加濒危动物的种群数量，D正确。

故选BD。12、A:C:D【分析】【分析】

接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法；

稀释涂布线法：逐步稀释菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养；

平板划线法由接种环沾取少许待分离的材料；在无菌平板表面进行平行划线；扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

【详解】

A；根据I号培养基上菌落分布均匀；可知①②过程为稀释涂布平板法，A正确；

B；甲乙试管中的液体是用于样品稀释；应为无菌水，B错误；

C；由Ⅱ号培养基上上的划线区域可知从I号培养基上挑选的菌落进行接种的方法是平板划线法；C正确；

D；淀粉与碘液反应呈蓝色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶将淀粉水解后就不能呈蓝色，因此周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，D正确。

故选ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。

DNA连接酶是链接两个DNA的片段；形成磷酸二酯键。

【详解】

A；限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的两个核苷酸之间切断磷酸二酯键，A正确；

B；DNA连接酶可以恢复DNA分子中的磷酸二酯键；将两条DNA片段的黏性末端之间的缝隙连接起来，B错误；

C；DNA聚合酶将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯键，DNA连接酶是链接两个DNA的片段，形成磷酸二酯键。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA连接酶，C错误；

D；限制酶主要来源于微生物；D错误。

故选BCD。14、A:B:D【分析】【分析】

植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时；两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化。

【详解】

A；Ⅰ阶段为脱分化；II阶段和Ⅲ阶段为再分化，Ⅰ、II、Ⅲ阶段中会发生基因的选择性表达，A错误；

B；实验至少配制了3种不同的培养基；即形成愈伤组织的培养基、生根培养基和生芽培养基，B错误；

C、由于参照品种B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，则细胞分裂素浓度依次为a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可见细胞分裂素的最高浓度M应设为a2+1.0μmol/L；C错误；

D；生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素；D正确。

故选ABD。三、填空题(共5题，共10分)15、略

【解析】①.液体状态②.固体培养基③.琼脂④.固体⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】直接分离人工合成反转录法化学合成法18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白质19、略

【分析】【详解】

①克隆人是对人权和人的尊严的挑战：

人不仅是自然人；在生物进化中人自从脱离了动物界，还成为有价值观念的社会的人，因此人是具有双重属性的，是生物；心理和社会的集合体。克隆人也就是人工无性生殖的人，只在遗传性状上与原型人一致，而人的心理、行为、社会特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一个丧失自我的人，严重违反了人权，危害人类尊严；

②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念：

克隆人的出现将彻底搅乱代际关系和家庭伦理定位；克隆人过程中可以出现体细胞核供者；卵细胞供者以及孕育者三位生物学父母，以及抚养者的社会学父母的多种选择，被克隆者只是生物学上复制，人类世代的传承也将被打破，家庭伦理关系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；

④克隆人违反生物进化的自然发展规律：

人类所以发展到如此高的进化文明程度，是由其自然发展规律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到无性生殖，这种行为如不加阻止，必将给人类种下无穷的灾难。【解析】①克隆人是对人权和人的尊严的挑战；②克隆人冲击了现有的婚姻家庭和两性关系等传统的伦理道德观念；③克隆人是制造在心理上和社会地位上都不健全的人；④克隆人违反生物进化的自然发展规律等。四、综合题(共4题，共8分)20、略

【分析】【分析】

基因表达载体的基本结构包括复制原点、目的基因、标记基因、启动子、终止子等。根据题干信息和图形分析，P0是载体质粒，其含有的氨苄青霉素抗性基因（ampr）和四环素抗性基因（tetr）都属于标记基因，可用于检测目的基因是否导入受体细胞；EcoRV酶为限制酶，其切割质粒后会破坏四环素抗性基因（tetr）。

【详解】

（1）根据题意分析；EcoRV酶识别的序列是-GATATC-，并且两条链都在中间的T与A之间进行切割，因此其切出来的线性载体P1为平末端。

（2）依题意并据图分析；目的基因两侧为黏性末端，且露出的碱基为A，则在载体P1的两端需要各加一个含有碱基T的脱氧核苷酸，以便形成具有黏性末端的载体P2，再用DNA连接酶将P2与目的基因连接起来形成重组质粒P3。

（3）根据以上分析已知；限制酶（EcoRV酶）切割后破坏了四环素抗性基因，但是没有破坏氨苄青霉素抗性基因，因此含有重组质粒P3的菌落在含有四环素的培养基中应该不能生长，而在含有氨苄青霉素的培养基中能生长，结合表格分析可知，应该选择B类菌落。根据表格分析，A类菌落在氨苄青霉素和四环素的培养基中都能够生长，说明其导入的是P0；C类菌落在任何抗生素的培养基中都不能生长，说明其没有导入任何质粒。

（4）据图分析，根据目的基因插入的位置和PCR技术的原理分析，PCR鉴定时应该选择的一对引物是乙和丙；根据题意和图形分析，某同学用图中的另外一对引物（甲、乙）从某一菌落的质粒中扩增出了400bp的片段；说明其目的基因发生了反向连接。

【点睛】

解答本题的关键是识记并理解基因工程的四个基本步骤，尤其是对核心步骤——构建基因表达载体步骤的理解，明确基因表达载体的几个必须的成分及其作用，进而结合题干要求分析答题。【解析】（1）平。

（2）胸腺嘧啶（T）DNA连接。

（3）BA类菌落含有P0C类菌落未转入质粒。

（4）乙丙目的基因反向连接21、略

【分析】

【分析】

微生物常见的接种的方法。

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养，在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）MRS固体培养基因含有碳酸钙而不透明；乳酸菌所产的酸可与碳酸钙发生反应，从而在培养基上形成溶解圈（透明圈），即形成以乳酸菌为中心的透明圈，从功能上判断，MRS培养基可作为乳酸菌的鉴别培养基。

（2）微生物分离纯化培养时；关键做到防止杂菌污染，则使用无菌水对样品滤液进行梯度稀释。进行梯度稀释的目的是选择合适浓度的乳酸菌在培养基上观察，保证获得菌落数在30～300之间；适于计数的平板。

（3）要优化发酵时间和发酵温度从而使GABA相对产量进一步提高；可在发酵时间在48～60h范围内；发酵温度在35～39℃范围内进行等时间、温度梯度的实验，根据表格记录实验结果，从而分析比较出最佳的发酵条件，具体表格如下：

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记接种微生物常用的两种方法，能根据题干信息推断筛选高产GABA的乳酸菌株的原理，能设计简单实验优化其发酵条件，再结合所学的知识准确答题。【解析】透明圈鉴别无菌水通常选用一定稀释范围的样品液进行培养；以保证获得菌落数在30～300之间；适于计数的平板不同温度、不同发酵时间GABA的相对产量。

。48小时49小时50小时51小时5