2025年人教版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年人教版选择性必修3生物上册月考试卷323考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共8题，共16分)1、研究人员用下图1中质粒和图2中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点）；将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及PCR鉴定。以下叙述不正确的是（）

A.构建重组质粒的过程应选用BclⅠ和HindⅠ两种限制酶B.使用DNA连接酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组C.能在添加四环素的培养基上生存的一定是含有重组质粒的大肠杆菌D.利用PCR鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物甲和引物丙2、下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是（）A.动物细胞培养一般也需要脱分化过程B.培养胚胎细胞时，原代和传代培养均可出现接触抑制C.对动物组织块和分散的细胞进行培养，效果基本相同D.可以通过动物细胞培养技术获得完整的动物个体3、下图为制备人工种子部分流程示意图；下列叙述正确的是（）

A.胚状体是外植体在培养基上脱分化形成的一团愈伤组织B.该过程以海藻酸钠作为营养成分，以CaCl2溶液作为凝固剂C.可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖，为胚状体的发育提供营养D.包埋胚状体的凝胶珠能够隔绝空气，有利于人工种子的储藏4、下列DNA片段中，加入T4DNA连接酶后，在适宜的条件下不可以连接在一起的组合选项是（）。选项片段1片段2A

BCD

A.AB.BC.CD.D5、下图表示改造哺乳动物遗传特性的两种途径。下列叙述错误的是（）

A.将外源基因导入受体细胞使用了显微注射法B.获得动物1的受体细胞是受精卵细胞C.获得动物2的过程体现了受体细胞具有全能性D.动物1和2的获得过程均运用了胚胎移植技术6、下图表示牛胚胎移植的流程，其中①～④表示相应的操作过程。下列相关叙述错误的是（）

A.过程①注射相关激素，使供、受体同期发情B.过程②注射促性腺激素，达到超数排卵的目的C.过程③主要涉及体内受精和从卵巢中冲取胚胎D.过程④的主要目的是选择适合移植的胚胎7、甲植物具有由核基因控制的多种优良性状；乙植物细胞质中存在抗虫基因；但与甲植物存在生殖隔离。现欲将乙植物细胞质中的抗虫基因引入甲植物，科学家进行了如图所示的实验。若只考虑细胞的两两融合，则下列有关说法错误的是。

A.取甲、乙植株顶芽细胞的原因是顶芽细胞生长旺盛，分裂能力强B.B过程可以实现任意两种生物细胞的融合并成功表达C.原生质体成功融合的标志是再生出细胞壁D.C过程筛选的目的是除去由同型细胞融合成的杂交细胞8、阅读下列材料；回答下列题：

材料一1962年下村修在普林斯顿大学做研究的时候从某种发光水母中分离出绿色荧光蛋白（GFP）；GFP在蓝光或紫外光的激发下会发出绿色荧光。

材料二1992年科学家克隆出了GFP基因；随后马丁·沙尔菲成功地让GFP基因在大肠杆菌和线虫中表达。之后，会发光的鼠；猪、猫、兔、蝌蚪、鱼也相继问世。下图是转基因绿色荧光鼠的培育过程。

材料三钱永健通过改造GFP基因；相继制造出了蓝色荧光蛋白（BFP）和黄色荧光蛋白（YFP）。

(1)若将GFP基因与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质可被激发出绿色荧光。下列叙述错误的是。A．构建的“融合基因”无需与其它DNA片段相连，可直接导入受体细胞B．基因表达载体的制备需利用限制性核酸内切酶和DNA连接酶C．导入受体细胞内的“融合基因”可视为一个独立的遗传单位D．利用该技术可以追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布(2)下列关于转基因绿色荧光鼠培育过程的叙述，错误的是。A．基因表达载体应具有复制能力和表达能力B．受体细胞应具有良好的全能性表达能力C．早期胚胎培养的培养液由于含有高温下易失活的有机成分，无需灭菌D．代孕母鼠身体各系统的发育状况应健康，必要时还需对其作同期发情处理(3)钱永健制造出蓝色荧光蛋白（BFP）、黄色荧光蛋白（YFP），这种技术称蛋白质工程。下列叙述正确的是。A．能定向改造蛋白质分子结构，使之符合人类需要B．由于其操作对象是蛋白质，因此无需构建基因表达载体C．实质是通过改变氨基酸的空间结构从而改造蛋白质的功能D．核心操作是对DNA上的基因进行增添、替换、删除评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究10、微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，因此，微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。根据“微卫星DNA”的特点判断，这种分子标记可应用于（）A.人类亲子鉴定B.种群遗传多样性研究C.诱导基因突变D.冠状病毒遗传物质测序11、下列有关动物细胞培养的叙述正确的是（）A.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织B.将所取的组织先用胃蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液D.动物细胞培养只能传50代左右，所培养的细胞全部衰老死亡12、我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是瓮中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列叙述正确的是（）A.用酒曲酿酒过程中，为加快微生物代谢需不断通入O2B.酒液温度的变化与酒曲中微生物呼吸作用释放热量有关C.起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的D.“曲势尽”可能是瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致13、为探究某物种的等位基因“CST1”与“cst1E81K”的功能，科研人员将表达CST1和cst1E81K的质粒分别导入无法吸收葡萄糖的酵母菌（以麦芽糖为碳源），经处理后再将其接种在含不同碳源的培养基上，结果如下图所示，下列说法正确的是（）

A.上述酵母菌在接种前的处理是对其进行等浓度梯度的稀释B.在含葡萄糖类似物的培养基上，导入CST1的酵母菌存活率最高C.据图推测，CST1的功能可能是转运葡萄糖进入细胞D.导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率大于导入CST1的酵母菌14、基因敲除技术针对某个序列已知但功能未知的序列，通过改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏蔽，并可进一步对生物体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。研究人员将某实验动物的第5号染色体上的一段DNA敲除，结果发现培育出的实验动物血液甘油三酯极高，具有动脉硬化的倾向，并可以遗传给后代。下列有关叙述错误的是（）A.敲除的DNA片段具有遗传效应B.动脉硬化的产生与遗传物质发生基因重组有关C.控制甘油三酯合成的基因就位于第5号染色体上D.利用DNA片段的敲除技术可以研究相关基因功能15、用来判断选择培养基是否起到了选择作用和培养基是否被污染需要设置的对照组分别是（）A.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C.未接种的该选择培养基D.接种了的该选择培养基16、大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是（）

A.提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定C.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D.根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点17、为了获得抗蚜虫棉花新品种，研究人员将雪花莲凝集素基因（GNA）和尾穗苋凝集素基因（ACA）与载体（pBI121）结合，然后导入棉花细胞（如下图所示）。下列操作与实验目的相符的是（）

A.用限制酶BsaBⅠ和DNA连接酶处理两种基因可获得GNA-ACA融合基因B.用KpnⅠ和XhoⅠ两种酶处理融合基因和载体可保证基因转录方向正确C.将棉花细胞接种在含氨苄青霉素的培养基上可筛选出转基因细胞D.用PCR技术可检测GNA和ACA基因是否导入棉花细胞中评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)18、一般包括______、______等技术19、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。20、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。21、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。22、DNA粗提取与鉴定实验中，二苯胺要___________。23、应用：______（微型繁殖、作物脱毒、神奇的人工种子）、______、细胞产物的工厂化生产。24、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、实验题(共1题，共10分)25、研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用；两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果评卷人得分五、综合题(共3题，共18分)26、科研人员在杂交瘤细胞的基础上；获得了双杂交瘤细胞，能够产生双特异性抗体，该抗体可以同时结合两种抗原。

(1).科研人员获得上述小鼠的脾脏细胞；制备两种杂交瘤细胞。每种杂交瘤细胞产生的抗体结构；与抗原结合的情况如图1所示。

①制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织，用有关酶处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞。将两种杂交瘤细胞用_____试剂处理促进其融合，在培养基中加入_____（天然成分）培养。如果两种细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b；这种细胞称作双杂交瘤细胞。

②抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b（a与b相同）。因此，双杂交瘤细胞产生的抗体种类较多，其中有一种抗体能同时与抗原α、β结合称为双特异性抗体，如图2请将A1、A2、B1、B2、a、b、α、β等字符填入下面的表格中。123456A2B2______α___

③为使双杂交瘤细胞只产生图2所示双特异性抗体，降低纯化分离成本，科研人员对重链、轻链的结构进行改造。改造思路是在A、B、a、b的恒定区通过改变_____，进而改变蛋白质的空间结构，实现“榫卯”式互补组装的唯一性，这种改造属于现代生物技术中的_____工程。

(2).结合双特异性抗体特点，请分析其在肿瘤治疗方面的应用前景：_____。27、果荚开裂并释放种子；是植物繁衍后代的重要途径。模式植物拟南芥果荚的开裂与传统油料作物具有相似的调控机制。研究者对拟南芥果荚开裂机理进行了系列研究。

（1）植物果荚开裂区域细胞的细胞壁在_______________等酶的作用下被降解；导致果荚开裂。野生型拟南芥果荚成熟后会完全开裂，以便种子传播。

（2）研究者通过筛选拟南芥T-DNA插入突变体库，获得两个果荚不开裂的突变体甲和乙。检测发现突变体甲的M酶活性丧失，推测编码M酶的M基因由于插入T-DNA，突变为m基因。研究者利用不同的引物对，分别进行PCR，检测野生型拟南芥及突变体甲的基因型，结果如图1所示，验证了上述推测。在图2中标出引物1、2的位置及方向_____。

（3）进一步研究发现突变体乙的E酶活性丧失。另有一突变体丙的果荚开裂程度介于不开裂与完全开裂之间（中等开裂）。突变体乙、丙的果荚开裂程度分别由E/e、A/a基因控制。将上述突变体进行杂交，后代表型及比例如下表所示。杂交组合F1表现型F2表现型及比例乙×丙完全开裂完全开裂:中等开裂:不开裂＝9:3:4甲×丙完全开裂完全开裂:中等开裂:不开裂＝2:1:1

图3为甲与丙杂交所得F1的部分染色体示意图，基因M、m的位置已标出，在图3中标出基因E/e、A/a可能的位置________。

据上述信息，预测甲与乙杂交所得F1的表现型及比例为______________，F1自交所得F2的表现型及比例为_________________。

（4）突变体丙体内的A蛋白缺失。为确定A蛋白的功能；研究者检测了野生型及突变体丙体内E基因及M基因的转录量，结果如图4所示。

根据图4数据推测A蛋白的功能是_________，突变体丙果荚开裂程度下降的原因是__________。28、已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。如果将P分子中158位的丝氨酸变成亮氨酸，240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留P的功能；而且具有了酶的催化活性。

（1）利用PCR技术扩增目的基因时_______________知道基因的全部序列。在PCR体系中除了模板、原料外，还应加入_____________________________________________。

（2）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_______________和_______________；进而确定相对应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达；纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物功能进行鉴定。

（3）“CRISPR/Cas9”技术是目前常用改造DNA序列的一种方法，下图为向导RNA引导Cas9蛋白切割目标DNA示意图。其中Cas9蛋白是一种_______________酶。Cas9蛋白和特定的向导引导序列可利用_______________法导入到动物受精卵或干细胞中发挥基因编辑作用。

（4）经改造后的细胞，若想工业化大量制备蛋白质P1，可利用_______________和_______________技术将改造细胞转化为即可产生P1又能无限增殖的细胞，最后自培养液中可得到目的蛋白质。参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、C【分析】【分析】

根据质粒的特点确定限制酶的种类。

1；所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致；以确保具有相同的黏性末端。

2；质粒作为载体必须具备标记基因等；所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。

【详解】

A；选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点；但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；

B；酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连接酶连接；构建重组载体，B正确；

C；能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌；C错误；

D；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合；沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确。

故选C。2、B【分析】【分析】

1；动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织；将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

2；细胞系：细胞株传到50左右不能再继续传代；部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，这部分细胞称为细胞系。

【详解】

A；植物组织培养技术经过脱分化和再分化两个过程；动物细胞培养不经过脱分化和再分化过程，A错误；

B；正常的动物细胞无论是原代培养还是传代培养均会有接触抑制；B正确；

C；细胞生长具有接触抑制的现象；因此对动物组织块和分散的细胞进行培养，效果不同，C错误；

D；动物体细胞不具有全能性；培养高度分化的动物体细胞一般不能发育成幼体，D错误。

故选B。

【点睛】3、C【分析】【分析】

1、据图分析，支柱组织培养诱导形成胚状体，用海藻酸钠溶液包埋胚状体，注射到CaCl2溶液中形成稳定结构；用无菌水冲洗形成人工种子。

2；人工种子是指通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料；通过人工薄膜包装得到的种子。

3；人工种子包括胚状体、人工胚乳和人工种皮；其中胚状体是通过脱分化和再分化过程形成的；人工胚乳可为种子提供营养；人工种皮具有保护作用（可添加植物生长调节剂以调节植物的生长发育。）

【详解】

A；外植体在培养基上脱分化形成的愈伤组织；再分化才能形成胚状体，A错误；

B、该过程以海藻酸钠作为包埋材料，以CaCl2溶液作为凝固剂；B错误；

C；可在海藻酸钠溶液中添加蔗糖；为胚状体提供碳源和能量，C正确；

D；包埋胚状体的凝胶珠能够保护胚状体；有利于人工种子的储藏，D错误。

故选C。4、A【分析】【分析】

根据酶的来源不同，可以将DNA连接酶分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E·coliDNA连接酶；另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为T4DNA连接酶。这两类酶都是将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，但这两种酶的作用有所差别：E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，不能将双链DNA片段平末端之间进行连接；而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端；又可以“缝合”双链DNA片段的平末端，但连接平末端之间的效率比较低。

【详解】

A；片段1、2为不互补的黏性末端；不可以连接在一起，A错误；

BC；片段1、2为均为平末端；可以连接在一起，BC正确；

D；片段1、2为互补的黏性末端；可以连接在一起，D正确。

故选A。5、C【分析】【分析】

分析题图：动物1是含有外源基因的受体细胞直接发育而来的转基因动物；动物2是采用基因工程；核移植技术培养形成的转基因克隆动物。

【详解】

A；受体细胞为动物细胞时；将外源基因导入受体细胞使用了显微注射法，A正确；

B；转基因动物的获得需将目的基因导入受精卵；故获得动物1的受体细胞是受精卵细胞，因为受精卵的全能性高，B正确；

C；由重组细胞发育成一个完整的生物体动物2依据的原理是全能性；受体细胞不具有全能性，C错误；

D；两种动物的获得均运用了胚胎移植技术（分别需要移植到动物1和动物2体内）；D正确。

故选C。6、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①对供；受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体；有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用孕激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。

题图分析：图示为牛胚胎移植的流程；其中①表示同期发情处理；②表示超数排卵；③表示冲卵；④表示胚胎的收集；检查、培养。

【详解】

A；图中过程①表示供、受体同期发情处理；该过程可通过注射孕激素实现，A正确；

B；过程②是注射促性腺激素；达到超数排卵，从而获得较多的卵母细胞，B正确；

C；过程③为体内受精和从输卵管中冲取胚胎；C错误；

D；过程④的主要目的是选择适合移植的胚胎；如可选择健康的桑葚胚和囊胚，D正确。

故选C。7、B【分析】【分析】

题图分析：该图为体细胞杂交过程；其中A为去除细胞壁，制备原生质体，可以酶解法，B为诱导原生质体融合，可以用聚乙二醇处理，融合的杂种细胞应该具备乙品种细胞质中的抗性基因和甲品种的控制多种优良性状的核基因。

【详解】

A；顶芽细胞分化程度低；分裂能力强，生长旺盛，因此该实验取甲、乙植株顶芽细胞，A正确；

B；B过程不能实现任意两种生物细胞的融合并成功表达；融合后细胞中常常会有染色体的部分丢失，可能导致某些基因不能表达，B错误；

C；植物体细胞融合完成的标志是融合的原生质体形成新的细胞壁；进而成为杂种细胞，C正确；

D；甲原生质体和乙原生质体融合时；会出现甲与甲、乙与乙、甲与乙融合，而C过程筛选的目的是除去由同型细胞融合成的杂交细胞，D正确。

故选B。8、略

【分析】【分析】

图中①为表达载体的构建；②为目的基因转入受体细胞，③为早期胚胎的发育（体外培养），④为早已胚胎移植到代孕母体，⑤为胚胎发育后出生。

(1)

A；构建的“融合基因”需与运载体（一般为质粒DNA片段）一起构建表达载体后才可导入受体细胞；A错误；

B；基因表达载体的制备需利用限制性核酸内切酶（产生相同的黏性末端）和DNA连接酶（将目的基因与与载体的DNA片段连接起来）；B正确；

C；导入受体细胞内的“融合基因”可视为一个独立的遗传单位；其有自己的启动子、终止子和标记基因等，C正确；

D；利用该技术可以通过荧光显示位置；追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布，D正确。

故选A。

(2)

A；基因表达载体应具有复制能力和表达能力；以保证能够正常表达出荧光蛋白，A正确；

B；受体细胞应具有良好的全能性表达能力；以保证目的基因能正常表达，B正确；

C；早期胚胎培养的培养液需灭菌；以保证早期胚胎不被杂菌污染，C错误；

D；代孕母鼠身体各系统的发育状况应健康；必要时还需对其作同期发情处理，以保证胚胎移植后能够正常发育，D正确。

故选C。

(3)

A；认为制造出不同的荧光担保；说明该技术能定向改造蛋白质分子结构，使之符合人类需要，A正确；

B；由题意可知；通过改造GFP基因，制造出对应的蛋白质，需要构建基因表达载体，B错误；

C；实质是通过改变基因的碱基排列顺序从而改变蛋白质的结构；影响蛋白质的功能，C错误；

D；核心操作是对基因表达载体的构建；D错误。

故选A。【解析】(1)A

(2)C

(3)A二、多选题(共9题，共18分)9、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】10、A:B【分析】【分析】

微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；由于重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性并且数量丰富，可以作为分子标记应用于人类亲子鉴定；种群遗传多样性研究。

【详解】

AB；微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列；且重复单位的重复次数在个体间呈高度特异性，因此可用于人类亲子鉴定、物种间亲缘关系鉴定、物质和遗传多样性的研究等，AB正确；

C；诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素；与微卫星DNA的特性无关，C错误；

D；冠状病毒的遗传物质是RNA；其测序与微卫星DNA的特性无关，D错误。

故选AB。11、A:C【分析】【分析】

动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

【详解】

A；用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织；因为胚胎或幼龄动物的器官或组织分裂能力旺盛，A正确；

B；动物细胞培养中需先用胰蛋白酶使所取的组织分散成单个细胞；胃蛋白酶的最适pH值呈酸性，而细胞培养液的pH大多数是7.2-7.4，B错误；

C；细胞存在接触抑制；因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；

D；动物细胞培养传到50左右不能再继续传代；部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去，D错误。

故选AC。

【点睛】12、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲酿酒菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【详解】

A、用酒曲酿酒是利用了微生物细胞呼吸的原理，进行的是酵母菌的无氧发酵，不能一直通入O2；A错误；

B；由于呼吸作用会产热；故会导致酒液温度产生变化，B正确；

C、起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放到发酵液中形成的；C正确；

D；“曲势尽”可能是随着发酵的进行瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致酵母菌大量死亡；D正确。

故选BCD。13、A:C【分析】【分析】

从左图看出；在添加麦芽糖的培养基中空质粒组；导入CST1和导入cst1E81K的酵母菌的酵母菌菌落数目相差不大，但在麦芽糖+葡萄糖类似物组中，导入CST1的酵母菌菌落数目最少，说明吸收葡萄糖类似物最多。

【详解】

A；从图中可以看出；后一稀释浓度是前一稀释浓度的5倍，所以是进行等浓度梯度的稀释，A错误；

B；在含葡萄糖类似物的培养基上；导入CST1的酵母菌菌落颜色最浅，说明存活率最低，B错误；

C；导入CST1的酵母菌在葡萄糖类似物的培养基上菌落数目降低；由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测CST1能转运葡萄糖类似物进入酵母菌，所以其功能可能是转运葡萄糖进入细胞，C正确；

D、在麦芽糖+葡萄糖类似物的培养基中，导入cst1E81K的酵母菌菌落数目多，说明其存活率更高，由于葡萄糖类似物被吸收后可以杀死酵母菌，因此可以推测导入cst1E81K的酵母菌葡萄糖吸收速率小于导入CST1的酵母菌；D错误。

故选C。14、B:C【分析】【分析】

根据题意；将某实验动物的第5号染色体上的一段DNA敲除，结果发现培育出的实验动物血液甘油三酯极高，具有动脉硬化的倾向，并可以遗传给后代，说明该变异是一种可遗传的变异。

【详解】

A；DNA敲除后结果发现培育出的实验动物血液甘油三酯极高；具有动脉硬化的倾向，并可以遗传给后代，说明敲除的DNA片段具有遗传效应，A正确；

B；动脉硬化的产生与遗传物质发生可遗传的变异有关；不能说明是基因重组，B错误；

C；上述信息只能表明敲除的DNA片段与甘油三酯代谢有关；不能表明控制甘油三酯合成的基因就位于第5号染色体上，C错误；

D；由题干信息可知；利用DNA片段的敲除技术可以研究相关基因功能，D正确。

故选BC。15、A:C【分析】【分析】

对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用；则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的牛肉膏蛋白胨培养基属于对照组。

【详解】

根据单一变量原则；对照组需要与选择培养基一样接种；培养，因此用接种了的普通培养基（牛肉膏蛋白胨）和选择培养基进行对照，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基具有选择的功能，作为选择培养基合格的依据；

而培养基是否被污染需要设置的对照是相同的选择培养基但不接种；在相同的条件下培养，观察是否有菌落产生。AC正确。

故选AC。16、A:B:C【分析】【分析】

DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA时可加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；

B；将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；

C；DNA带负电；电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；

D；因为质粒的本质是环状的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。

故选ABC。17、A:D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是Ca2+处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；两个基因中都有限制酶BsaBⅠ的一个识别位点；用该限制酶切割后再用DNA连接酶可拼接成GNA-ACA融合基因，A正确；

B；GNA-ACA融合基因的两端有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点；而质粒上也有限制酶KpnⅠ和XhoⅠ的切割位点，但方向不一致，用两酶切割，正好是反向连接目的基因和运载体，B错误；

C；运载体上带有卡那霉素的抗性基因；没有氨苄青霉素的抗性基因，转基因细胞在含有氨苄青霉素的培养基上不能存活，C错误；

D；用PCR技术扩增GNA和ACA基因后；再通过分子杂交或电泳的方式，可检测是否导入棉花细胞中，D正确。

故选AD。三、填空题(共7题，共14分)18、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30020、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】现配现用23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】植物繁殖的新途径作物新品种的培育（单倍体育种、突变体利用）24、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、实验题(共1题，共10分)25、略

【分析】【详解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。

(2)筛选、纯化培养某一特定微生物时，常用平板划线法或稀释涂布平板法。为防止杂菌的污染，需对器具培养基等进行消毒灭菌处理，培养基宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理，而超净工作台常使用紫外线或化学药物进行消毒处理。

(3)微生物培养过程中为微生物的生长提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分，是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，这些不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中不同分子的分离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速度越慢。

(4)抑菌实验时；在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【点睛】【解析】①.压榨②.过滤③.稀释涂布平板法(或：稀释混合平板法)④.高压蒸汽灭菌锅⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直径(或：大小)五、综合题(共3题，共18分)26、略

【分析】【分析】

1、题图分析：图1中是抗原a、β分别注射到小鼠体内，小鼠分别产生的a、β的两种单克隆抗体；图2中是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体。

2、图中抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装(A1与B1相同)，重链与轻链的组装依赖于恒定区A2、a或B2、b(a与b相同)。

【详解】

（1）①制备杂交瘤细胞时，需将上述小鼠的脾脏组织，用胰蛋白酶处理获得单细胞后，再与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选得到两种杂交瘤细胞。将两种杂交瘤细胞用PEG试剂处理促进其融合，在培养基中加入动物血清等成分培养。如果两种细胞成功融合，则会同时表达出抗体的重链A、B和轻链a、b；这种细胞称作双杂交瘤细胞。

②由于图2抗体是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体,可变区的重链1和2位置存在A2或B2，1是A2,2为B2,根据图1信息判断(a与A2在可变区并结合a,b与B2在可变区并结合),图2中3与1(A2)在可变区并结合5,故3对应a,5对应a,同时4与2(B2)在可变区并结合6,故4对应b,6对应β,因此3、4、5、6分别对应a.b、a、β。123456abβ

③使双杂交瘤细胞只产生图2所示双特异性抗体，降低纯化分离成本，科研人员可对重链、轻链的结构进行改造获得。改造思路是在A、B、a、b的恒定区通过改变氨基酸种类；进而改变蛋白质的空间结构，这种改造属于现代生物技术中的蛋白质工程。

（2）双杂交瘤细胞能够产生双特异性抗体；该抗体可以同时结合两种抗原。因此双特异性抗体在肿瘤治疗方面的应用前景是：研制与肿瘤细胞和抗肿瘤药物结合的双特异性抗体，特异性杀死肿瘤细胞。

【点睛】

本题考查单克隆抗体的制备过程和动物细胞的培养,意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力，能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】【小题1】①.PEG（或“聚乙二醇”）②.动物血清③.a④.b⑤.β⑥.氨基酸种类（或“序列”）⑦.蛋白质。

【小题2】研制与肿瘤细胞和抗肿瘤药物结合的双特异性抗体，特异性杀死肿瘤细胞27、略

【分析】【分析】

1；基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样；将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；

（4）目基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等；

2；基因自由组合定律的内容及实质：

（1）自由组合定律：控制不同性状的遗传因子的分离和组合是互不干扰的；在形成配子时；决定同一性状的成对的遗传因子彼此分离，决定不同性状的遗传因子自由组合；

（2）实质：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或组合是互不干扰的。在减数分裂过程中；同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合；

（3）