2025年华东师大版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

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A.相比于农杆菌转化法，花粉管通道法还适用于玉米等单子叶植物的转基因培育B.相比于基因枪法和农杆菌转化法，花粉管通道法避免了植物组织培养这一操作C.必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法D.外源DNA不需要构建基因表达载体，就能借助花粉管通道进入受体细胞并表达3、植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不完全相符的是（）A.植物组织培养获得幼苗和单克隆抗体技术制备抗体-细胞的全能性B.酶解法处理植物细胞壁获得原生质体-酶的专一性C.原生质体融合和动物细胞融合获得杂交细胞-细胞膜的流动性D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养获得相应产品-细胞增殖4、由于某目的基因酶切后的末端为平末端，载体E只有产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P将目的基因接入载体E。据图分析，下列叙述正确的是（）

A.通过PCR扩增获取目的基因是基因工程的核心工作B.为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶EcoRV或SmaI切割载体PC.载体P只能作为中间载体，是因为其没有表达该目的基因的启动子与终止子D.若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入受体细胞5、miRNA是一类由基因编码的；长约22个核苷酸的单链RNA分子。在线虫中，Lin-4基因的转录产物经加工后形成miRNA-miRNA*双链，其中miRNA与Lin-14mRNA部分配对，使其翻译受阻，进而调控幼虫的正常发育模式，Lin-4miRNA的形成过程及其对Lin-14基因的调控如下图所示。下列有关叙述正确的是（）

A.转录miRNA的模板链碱基序列与miRNA*的碱基序列相同B.用抗原—抗体杂交技术可检测到线虫内Lin-4基因表达的蛋白质C.图中过程①、过程②分别需要RNA聚合酶、限制性核酸内切酶D.Lin-4基因调控Lin-14基因选择性表达的结果是Lin-14基因翻译水平降低评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)6、科学家将4个关键基因移植入已分化的肌肉细胞中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），下图为该实验示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.应用该技术可缓解器官移植时器官供应不足的问题B.iPS细胞所携带的遗传信息与肌肉细胞相同C.关键基因表达使细胞功能趋向专门化，降低了细胞的分化程度D.病人的iPS细胞分化而来的细胞移植回体内后，可以避免免疫排斥7、下列实验过程中，出现的正常现象有（）A.制作果酒时，发酵瓶中溶液产生较多泡沫B.用果酒制作果醋过程中，液面出现一层褐色菌膜C.制作腐乳过程中，豆腐表面发黏且长有白色菌丝D.用固定化酵母进行酒精发酵，凝胶珠浮在液面8、某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素；给抗感染治疗带来很大困难。利用检测试条可检测细菌是否产β-内酰胺酶，试条左右两侧对称含有一定浓度梯度的抗生素，并在一侧添加克拉维酸（一种β-内酰胺酶抑制剂）。将两个含不同抗生素的检测试条放置在涂布有待检菌株的培养基上，培养一段时候后结果如下图所示。下列说法正确的是（）

A.抗生素的大量使用会导致产β-内酰胺酶细菌的出现B.由实验结果可知，越靠近试条两端的抗生素浓度越大C.该菌能产生β-酰胺酶，试条1中克拉维酸添加在试条右侧D.使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好9、为探究不同糖源（蜂蜜、黄冰糖）对蓝莓酒发酵产物的影响，某研究小组研发出如下的蓝莓酒发酵工艺，其中“主发酵”时酵母菌会繁殖、大部分糖的分解和代谢物会生成，“后发酵”是在低温、密闭的环境下蓝莓酒会成熟。下列叙述错误的是（）

A.菌种甲在产生CO2的同时会产生酒精B.切片后需对发酵液进行消毒然后再分组C.倒罐均需保留空间以促进菌种有氧呼吸D.主发酵要控制无氧，后发酵要控制有氧10、大肠杆菌能在基本培养基上生长；X射线照射后产生的代谢缺陷型大肠杆菌不能在基本培养基上生长，但可以在完全培养基上生长。利用夹层培养法可筛选代谢缺陷型大肠杆菌，具体的操作是：在培养皿底部倒一层基本培养基，冷凝后倒一层含经X射线处理过的菌液的基本培养基，冷凝后再倒一层基本培养基。培养一段时间后，对首次出现的菌落做好标记。然后再向皿内倒一层完全培养基，再培养一段时间后，会长出形态较小的新菌落。下列说法正确的是（）A.X射线诱发染色体变异进而导致大肠杆菌代谢缺陷B.首次出现的菌落做标记时应标记在皿盖上C.夹层培养法可避免细菌移动或菌落被完全培养基冲散D.形态较小的新菌落可能是代谢缺陷型大肠杆菌11、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源12、下图是快速RT-PCR过程示意图；①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（）

A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR不能检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒评卷人得分三、填空题(共8题，共16分)13、一般包括______、______等技术14、DNA连接酶与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将______加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_____的末端，形成磷酸二酯键。15、回答下列问题。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，酒精发酵时一般将温度控制在_________，醋酸菌是一种________细菌，它的最适生长温度为_______________，乳酸菌是________细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接种方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目___________，这是因为______________________________。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定，将滤膜放在____________培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________；从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括化学结合法、____________和物理吸附法。酶更适合采用__________和___________固定化，而细胞多采用___________固定化。16、毛霉等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以将_____________水解成_________________和________________。17、大多数蛋白质不能忍受60—80℃的高温，而DNA在_________℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解或破坏_______，食盐能____________细胞膜。18、蛋白质工程是指以______作为基础，通过______，对现有蛋白质进行_____，或制造一种______，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产______的蛋白质）

19、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。20、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________评卷人得分四、判断题(共3题，共21分)21、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误22、我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。（选择性必修3P108）()A.正确B.错误23、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共18分)24、厨余垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比；用于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理；如下表所示：

。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌1∶00∶11∶12∶1将等量上表菌液分别接种于100mL_____中进行震荡培养。本实验中对照组的处理应为_____。

②培养3天后测定活菌数。取各组菌液采用_____法接种于基本培养基中，培养一段时间后选取菌落数在_____范围内的平板进行计数；并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果见图。

由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是______________。接种量比例为_____________时；废液中两菌的有效活菌数最多。

（2）为进一步探究菌种比例对该厨余垃圾废液中蛋白质；脂肪等有机物的降解效果；测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知，对该厨余垃圾废液中蛋白质、脂肪的降解效果最好的两种菌接种比分别为_____、_____。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质、淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料；收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晾晒干后制成蛋白饲料；通过以上处理可实现_____（选填选项前的符号）。

A．物质循环再生B．能量多级利用C．提高能量传递效率25、玉米是重要的粮食作物；其叶片细胞中的P蛋白是一种水通道蛋白，由P基因编码，在植物生长发育过程中对水分的吸收具有重要的调节功能。科研人员成功培育出超量表达P蛋白转基因玉米，所用DNA片段和Ti质粒的酶切位点如图所示，请回答下列问题：

(1)强启动子是一段有特殊结构的DNA片段，能被_______识别并结合，驱动基因的持续转录，如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，可获得该基因_______突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，应优先选用_______酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。T-DNA在该实验中的作用是_______。

(2)将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行组织培养，培养基中需加入_______进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，使植物的光合作用和_______受到干扰；从而引起植物细胞死亡。

(3)愈伤组织是一种相对没有分化的_______团，经液体悬浮培养叮以分散成胚性细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成_______；再继续发育成转基因玉米株系。

(4)影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及_______等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是_______。评卷人得分六、综合题(共4题，共40分)26、严重联合性免疫缺陷症是一种T淋巴细胞缺乏腺苷脱氨酶（ADA）引起的疾病，通过基因工程的方法将正常ADA基因导入患者细胞中进行治疗。如图分别表示正常ADA基因、金属硫蛋白基因（含有该基因的细胞能在含重金属镉的培养基中生长）和质粒（总长为3.8kb，lkb=1000对碱基），ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ均为限制酶。

（1）尝试写出基因工程的两点主要理论依据________；________。

（2）为了筛选含有目的基因的受体细胞；需要先将目的基因和标记基因连接形成融合基因。首先用限制酶________切割正常腺苷脱氨酶基因与金属硫蛋白基因，然后用________酶将它们连接形成融合基因。

（3）将上述融合基因与图的质粒构建成重组质粒时；应选用的限制酶是________。

（4）若该融合基因长1.9kb，据图分析，此重组质粒大小为________kb。

（5）重组质粒应导入的受体细胞是病人的________细胞。为筛选出含重组质粒的受体细胞，需在培养基中添加的物质是________。27、大熊猫是我国特有的珍稀野生动物；每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12~38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_________。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_________培养基。

（2）配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_________。

（3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路_________。

（4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_________，理由是_________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重（%）纤维素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3228、PCR技术是20世纪80年代发展起来的新技术；广泛用于分子生物学；基因工程及其他与DNA鉴定相关的领域，如疾病检测、法医鉴定等。通过咽拭子取样进行RT-PCR技术检测是目前临床上诊断新型冠状病毒感染疑似患者的常用方法，用于核酸检测的RT-PCR试剂盒的部分工作原理简图（如图所示）:

（1）RT-PCR是指以病毒的RNA为模板通过__________过程合成cDNA，并对cDNA进行PCR扩增的过程。利用RT-PCR试剂盒对新型冠状病毒进行检测时，除借助上述RT-PCR技术外，还需要有特异性探针，利用该探针对新型冠状病毒进行核酸检测的原理是__________。若用RT-PCT技术扩增胰岛素基因，应选择__________细胞提取RNA。

（2）PCR与体内DNA复制相比，不需要__________酶。利用PCR技术扩增目的基因的前提是__________。

（3）若将1个DNA分子拷贝10次，则需要在缓冲液中至少加入__________个引物。

（4）PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、__________三步，其中复性的结果是__________。29、请根据下列两个资料回答相关问题：

资料1：用化学方法激活小鼠成熟的卵母细胞得到phESC（孤雌单倍体干细胞）；然后利用基因编辑技术沉默phESC中的相关基因，使phESC的细胞核状态接近精子细胞核的状态，如图1．

资料2：用化学方法激活小鼠的精子得到ahESC（孤雄单倍体干细胞）；然后对ahESC中的相关基因进行编辑，使ahESC的细胞核具有卵细胞核的特点，如图2．

(1)体内受精时，在精子触及卵细胞膜的瞬间，__会迅速产生生理反应阻止后来的精子进入；精子入卵后，______也会立即发生生理反应拒绝其他精子再进入，接下来卵子发生的变化有__。

(2)用_______激素对雌性小鼠进行___处理可得到较多卵母细胞。

(3)ahESC与精子和去核卵细胞融合后，得到的融合细胞的性染色体组成可能是____。融合细胞需要进行早期胚胎培养，一般早期胚胎发育至___期才能进行移植。

(4)据资料分析，只依赖雄性小鼠___（填“能”或“不能”）用上图方法得到孤雄小鼠；请写出两个理由支持你的判断。

理由1：________；

理由2：_______。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、B【分析】【分析】

1；试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术。

2；转基因生物的安全性问题：食物安全（滞后效应、过敏源、营养成分改变）、生物安全（对生物多样性的影响）、环境安全（对生态系统稳定性的影响）．对待转基因技术的利弊；正确的做法应该是趋利避害，不能因噎废食。

【详解】

A；试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精；属于有性生殖，A错误；

B；我国禁止生殖性人克隆实验；允许治疗性克隆研究，B正确；

C；用转基因食品不会导致外源基因转入人体细胞；C错误；

D；变异的流感病毒不是新病毒；接种流感疫苗对预防变异的流感病毒感染有一定效果，D错误。

故选B。

【点睛】2、D【分析】【分析】

将目的基因导入受体细胞的方法：

1．将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）（2）基因枪法：是单子叶植物中常用的一种基因转化方法；但是成本较高。（3）花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我国的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的）；

2．将目的基因导入动物细胞方法：显微注射技术。（最有效一种方法）

3．将目的基因导入微生物细胞：Ca2+处理法（感受态细胞法）。

【详解】

A；农杆菌转化法只适用于双子叶植物；与农杆菌转化法相比，花粉管通道法还适用于玉米等单子叶植物的转基因培育，A正确；

B；花粉管通道法可以直接实现转基因植物的自然生成；而基因枪法和农杆菌转化法，还需要对成功导入目的基因的受体细胞进行植物组织培养获得转基因植物，而花粉管通道法避免了植物组织培养这一操作，B正确；

C；授粉过程需要在雌蕊成熟后；因此，花粉管通道法也应该必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法，C正确；

D；要让目的基因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表达；不管采用什么导入方法，都需要构建重组载体才能实现，外源DNA也需要构建基因表达载体，才能借助花粉管通道进入受体细胞并表达，D错误。

故选D。3、A【分析】【分析】

植物组织培养的原理是细胞的全能性；植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和全能性，动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性。

【详解】

A；植物组织培养的原理是细胞的全能性；单克隆抗体的制备的原理是细胞膜的流动性和细胞的增殖，A错误；

B；植物细胞壁的成分是纤维素和果胶；用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁制备原生质体，利用了酶的专一性，B正确；

C；用物理法或者化学法使得原生质体融合和动物细胞融合；利用了细胞膜具有一定的流动性的特点，C正确；

D；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养目的是获得更多细胞或细胞产物；其原理只涉及细胞增殖，D正确。

故选A。4、C【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是钙离子处理法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测；①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

A；基因工程的核心步骤是构建基因表达载体；不是通过PCR扩增获取目的基因，A错误；

B；由于载体E只有产生黏性末端的酶切位点；要使中间载体P接入载体E，同时防止载体E自身环化，需要用两种限制酶分别切割载体E和中间载体P，据图可知，中间载体P和载体E均含有XhoI和PstI酶识别序列，故可选用XhoI和PstI酶进行酶切，载体P的这两种酶识别序列中含有EcoRV识别位点，并且其切割的为平末端，可以用于连接目的基因，SmaI酶虽然也能切割得到平末端，但是其识别位点没有位于XhoI和PstI酶识别位点之间，故不能选择其对中间载体P进行切割，B错误；

C；由图可知；载体P是中间质粒，不含有有表达MT基因的启动子和终止子，C正确；

D；受体细胞表现出抗性基因的相应性状；可能是导入了重组质粒，也可能只导入了空质粒（不含目的基因的质粒），D错误。

故选C。5、D【分析】【分析】

分析题图：图示为线虫细胞中Lin-4miRNA调控基因Lin-14表达的相关作用机制。图中①表示转录过程；②表示miRNA前体1经过加工形成miRNA前体2过程。miRNA与Lin-14mRNA部分配对；使其翻译受阻。

【详解】

A；转录miRNA的模板链碱基序列与miRNA*的碱基序列可以发生碱基互补配对；而不是相同，A错误；

B；据图可知；Lin-4基因的转录产物经加工后形成miRNA-miRNA*双链，其中miRNA与Lin-14mRNA部分配对，使其翻译受阻，说明Lin-4基因属于调控基因，并没有形成蛋白质，故不能用抗原-抗体杂交技术检测到线虫内Lin-4基因表达的蛋白质，B错误；

C；图中过程①为转录；需要RNA聚合酶催化，过程②为miRNA前体1经过加工形成miRNA前体2过程，需要剪切RNA的RNA剪切酶催化，而限制性核酸内切酶识别的是DNA的特定序列，是对DNA的特定部位进行剪切，C错误；

D；根据分析可知；Lin-4基因调控Lin-14基因选择性表达的结果是Lin-14基因翻译水平降低，D正确。

故选D。

【点睛】二、多选题(共7题，共14分)6、B:C【分析】【分析】

分析题图：图中表示将4个关键基因移植入已分化的肌肉细中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞）以及多能干细胞的分化过程，即图中①②③表示细胞分化。

【详解】

A；用iPS细胞诱导分化成需要的器官后进行自体移植；没有免疫排斥反应，可缓解器官移植时器官供应不足的问题，A正确；

B；将4个关键基因移植入已分化的肌肉细中并表达；使这个细胞成为多能干细胞（iPS细胞），可见iPS细胞所带遗传信息与肌肉细胞不同，B错误；

C；图中关键基因表达形成iPS细胞；没有使细胞功能趋向专门化，C错误；

D；用患者自己的体细胞通过体外诱导成iPS细胞；所以将iPS细胞增殖分化出的不同细胞移植回病人体内，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。

故选BC。7、A:C:D【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，进行有氧呼吸大量繁殖；（2）在无氧条件下，产生酒精和二氧化碳。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作时；除了产生酒精，还会产生大量二氧化碳，因此发酵瓶中容易产生较多泡沫，A正确；

B；用果酒制作果醋过程中；液面出现一层白色菌膜，而不是褐色菌膜，B错误；

C；制作腐乳过程中；豆腐表面发黏且长有白色菌丝，C正确；

D；用固定化酵母进行酒精发酵；酒精浓度越来越高，因此凝胶珠逐渐浮上液面，D正确。

故选ACD。

【点睛】8、B:C:D【分析】【分析】

题干分析；某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素，从而产生抗药性。试条两侧含有抗生素，并在试条一侧添加β-内酰胺酶抑制剂（能抑制β-内酰胺酶的活性，从而不能水解抗生素），将其放在不含有抗生素的待测菌株上培养，一段时间后发现，试条1右侧和试条2的左右两侧都出现了抑菌圈，说明该部位的菌株能产生β-内酰胺酶。

【详解】

A；基因突变具有不定向性；抗生素使用之前，产β-内酰胺酶的细菌已经出现，抗生素只是起到选择作用，A错误；

B；由实验结果可知；越靠近试条两端的抑菌圈较大，说明抗生素浓度较大，B正确；

C；该菌能产生β-酰胺酶；使用克拉维酸能抑制该菌产生的β-酰胺酶的活性，进而不能抵抗抗生素，试条1右侧出现抑菌圈，左侧没有出现抑菌圈，说明试条1中克拉维酸添加在试条右侧，C正确；

D；试条2左右两侧的抑菌圈菌大于试条1；说明使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好，D正确。

故选BCD。

【点睛】9、A:C:D【分析】【分析】

酵母菌是一类单细胞真菌；能以多种糖类作为营养物质和能量的来源，因此在一些含糖量较高的水果；蔬菜表面经常可以发现酵母菌的存在。酵母菌是兼性厌氧微生物，在无氧条件下能进行酒精发酵，可用于酿酒、制作馒头和面包等。温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28℃。

【详解】

A、发酵产生果酒的菌种是酵母菌，酵母菌在有氧呼吸产生CO2；但不产生酒精，A错误；

B；切片后对发酵液进行消毒；防止杂菌污染，再进行分组，B正确；

C；压榨倒罐用于主发酵需保留空间以促进酵母菌的有氧呼吸；二次倒罐时菌种是进行无氧呼吸，C错误；

D；主发酵先有氧促进酵母菌大量繁殖；后无氧进行酒精发酵，后发酵要控制无氧，D错误。

故选ACD。10、C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；大肠杆菌是原核生物；没有染色体，A错误；

B；首次出现的菌落做标记时应标记在皿底上；B错误；

C；夹层培养法不需要对大肠杆菌进行再次接种；可避免细菌移动或菌落被完全培养基冲散，C正确；

D；由于代谢缺陷型大肠杆菌不能在基本培养基上生长；所以形态较小的新菌落可能是代谢缺陷型大肠杆菌，D正确。

故选CD。11、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。12、B:C【分析】【分析】

据图可知，逆转录酶可以催化以RNA为模板合成cDNA，还可催化以cDNA为模板合成其互补DNA；RT-PCR过程中需要a、b两种引物。

【详解】

A；逆转录酶催化合成DNA；所以具有DNA聚合酶的能力，A正确；

B、③PCR过程需要引物a、b；因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的，也有与cDNA一致的，B错误；

C；RT-PCR可检测基因的转录情况从而推知基因的表达水平；C错误；

D；通过设计RNA的特异性引物进行RT-PCR检测新冠病毒等RNA病毒；D正确。

故选BC。三、填空题(共8题，共16分)13、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】单个核苷酸两个DNA片段15、略

【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；来源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌种保藏中心，条件是无氧；温度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制备的菌种是醋酸菌，条件是发酵过程中充入无菌氧气，温度为30～35℃。

【详解】

（1）酒精发酵时一般将温度控制在18～25℃；醋酸菌是一种好氧细菌，它的最适生长温度为30～35℃。乳酸菌是厌氧细菌，在无氧的情况下，将葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接种方法很多；最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，稀释涂布平板法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）饮用水中大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定；将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现黑色，从而计算出水样中大肠杆菌的数目。

（4）固定化技术一般包括化学结合法；包埋法和物理吸附法。酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化；而细胞多采用包埋法固定化。

【点睛】

本题考查果酒和果醋制备原理，意在考查学生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识的网络结构，属识记内容。【解析】18－25℃好氧30－35℃厌氧乳酸平板划线法稀释涂布平板法低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落伊红美蓝黑色包埋法化学结合法物理吸附法包埋法16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80细胞膜溶解18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系基因修饰或基因合成改造新的蛋白质自然界已存在19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖20、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。四、判断题(共3题，共21分)21、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。22、A【分析】【详解】

生殖性克隆存在伦理道德等方面的问题，我国政府一再重申四不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验。本说法正确。23、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。五、实验题(共2题，共18分)24、略

【分析】【分析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。在统计菌落数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）①要探究圆褐固氨菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比；故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水，在相同的条件下培养。

②测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质。当两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长；脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维；蛋白质、淀粉等物质；可加工形成有机复合肥、蛋白饲料等，利用了物质循环再生、能量多级利用的生态工程的原理，AB正确。故选AB。

【点睛】

本题结合图形和表格，主要考查微生物的分离和培养的相关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法的操作流程，识记微生物计数的方法，能结合所学知识和图形信息准确答题。【解析】某厨余垃圾废液加入等量无菌水稀释涂布平板法30~300两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质（一种菌的代谢产物是另一种菌的营养物质）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB25、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子是RNA聚合酶识别并结合的位点；能驱动基因的转录；如将强启动子插入到玉米叶绿体某基因内部，则会破坏该基因，获得该基因沉默（失活）突变株。为使P基因在玉米植株中超量表达，则需要强启动子和P基因不被破坏，因此应优先选用BamHⅠ和SacⅠ酶组合，将Ti质粒切开后构建重组表达载体。农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上，因此T-DNA在该实验中的作用是将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。

（2）由图可知；G418抗性基因位于Ti质粒的T-DNA上，随T-DNA一起整合到玉米细胞染色体DNA上，因此将农杆菌浸泡过的玉米愈伤组织去菌后进行植物组织培养，培养基中需加入G418进行筛选，此物质属于氨基糖苷类抗生素，它能抑制蛋白质在叶绿体和线粒体中合成，其中叶绿体是光合作用的场所，线粒体是细胞有氧呼吸的主要场所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代谢）受到干扰，从而引起植物细胞死亡。

（3）愈伤组织是一种相对没有分化的薄壁细胞团；经液体悬浮培养可以分散成胚性单细胞，在适宜的培养基中，这种单细胞可以发育成胚状体，再继续发育成转基因玉米株系。

（4）影响玉米愈伤组织能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈伤组织继代次数以及玉米的基因型等。目前，组织培养过程中培养瓶常用透气封口膜封口，目的是防止杂菌污染。【解析】(1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶将强启动子和P基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞的染色体DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代谢

(3)薄壁细胞胚状体。

(4)玉米的基因型防止杂菌污染六、综合题(共4题，共40分)26、略

【分析】【分析】

分析题图：图中正常的ADA基因为目的基因，金属硫蛋白基因为标记基因，应该先用限制酶ClaⅠ切割目的基因和标记基因，形成融合基因；再用限制酶SacⅠ、XbaⅠ切割融合基因和质粒；接着用DNA连接酶将融合基因和质粒连接起来，形成重组质粒。

【详解】

（1）基因工程的理论依据是不同生物DNA结构相似；密码子具有通用性即所有共用同一套遗传密码。

（2）根据以上分析已知，将正常ADA基因与金属硫蛋白基因形成融合基因时，应该选择ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠ；然后用DNA连接酶将两者连接起来。

（3）根据以上分析已知，将融合基因与质粒重组时，应该选择的限制酶是SacⅠ和XbaⅠ。

（4）质粒长度为3.8kb，经过限制酶切割后长度=3.8-0.4=3.4kb，融合基因长度为1.9kb，因此重组质粒长度=3.4+1.9=5.3kb。

（5）本实验的目的是治疗T淋巴细胞缺乏腺苷脱氨酶（ADA）引起的疾病；所以需要将重组质粒导入病人的T淋巴细胞；金属硫蛋白基因作为标记基因，所以为筛选出含重组质粒的受体细胞，需在培养基中添加的物质是重金属镉。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具及作用，掌握基因工程的操作步骤，能结合图中信息准确答题。【解析】不同生物DNA结构相似共用同一套遗传密码（答案合理即可）ClaⅠ、XbaⅠ和SacⅠDNA连接酶SacⅠ和XbaⅠ5.3T淋巴重金属镉27、略

【分析】【分析】

1；分解纤维素的微生物分离的实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长；

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

2、消毒和灭菌：。消毒灭菌概念使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）常用方法煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌适用对象操作空间、某些液体、双手等接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

【详解】

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶；Cx酶和葡萄糖苷酶；前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。

（2）配制培养基的常用高压蒸汽灭菌；即将培养基置于压力100kPa；温度121℃条件下维持15～30分钟，目的是为了杀死培养基中的所有微生物（微生物和芽孢、孢子）。为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜条件下培养无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。

（3）为测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数；常采用稀释涂布平板法，在适宜的条件下对大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌进行纯化并计数时，对照组应该涂布等量的无菌水。将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后，取0.1mL涂布到若干个平板（每个稀释度至少涂布三个平板），对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数。

（4）测定酶活力时可以用单位时间内；单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知；在适宜的条件下，C菌株在相同的温度和时间下，秸秆失重最多，纤维素降解率最大，说明该菌株的纤维素分解菌产生的纤维素酶活力最大。

【点睛】

本题考查微生物的实验室培养，要求考生识记计数微生物的方法；识记培养基的种类及功能；掌握纤维素分解分离和鉴别的原理，能结合所学的知识准确答题。【解析】①.C1酶、Cx酶