2024年沪教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2024年沪教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、甲；乙、丙是三种微生物；下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）

。

粉状硫。

10g

K2HPO4

4g

FeS04

0.5g

蔗糖。

10g

(NH4)2S04

0.4g

H20

100ml

MgS04

9.25g

CaCl2

0.5g

I

+

+

+

+

+

+

+

Ⅱ

+

+

+

+

+

+

+

Ⅲ

+

+

+

+

+

+

+

+

A.甲、乙、丙都是异养微生物B.甲、乙都是自养微生物，丙是异养微生物C.甲是异养微生物，乙是固氮微生物，丙是自养微生物D.甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物2、土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒（如下图所示）；在侵染植物细胞的过程中，其中的T-DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是（）

A.若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏B.将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用Ca2+处理细菌C.用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞，可以通过植物组织培养成具有抗旱基因的植物D.若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功3、下列有关基因工程的叙述正确的是（）A.限制酶只存在于原核生物中，只能识别DNA分子的特定核苷酸序列B.只有同种限制酶切割的末端才能连接，不同限制酶切割的末端不能连接C.基因工程中，直接利用天然质粒上的标记基因进行检测目的基因是否表达D.动植物病毒也可以作为基因工程的载体4、下列关于生物武器的说法，错误的是（）A.生物武器包括致病菌类，病毒类，生化毒剂类等B.利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强，死亡率高的特点C.中美两国发布联合声明，重申在一般情况下不发展、不生产、不储存生物武器D.彻底销毁生物武器是世界上大多数国家的共识5、下表为培养某种微生物的培养基配方下列相关叙述错误的是（）。成分NaNO3K2HPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4（CH2O）H2O青霉素含量3g1g0．5g0．5g0．01g30g1L0．1万单位

A.依物理性质划分，该培养基属于液体培养基B.依用途划分，该培养基属于选择培养基C.培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3D.若用该培养基培养分解纤维素细菌则应除去（CH2O），仅添加纤维素就可以6、据下图分析；下列有关基因工程的说法不正确的是（）

A.能够检测到标记基因表达产物的受体细胞中，也一定会有目的基因的表达产物B.限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键C.与启动子结合的应该是RNA聚合酶D.为防止目的基因与质粒任意结合而影响基因的表达，应用限制酶Ⅰ、Ⅱ同时切割二者评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)7、如表为不同动物受精卵发育成胚胎进入子宫的时间（小时）；依据题表分析正确的是（）

。动物种类2细胞4细胞8细胞16细胞桑葚胚进入子宫时受精卵的发育天数和发育阶段小鼠24～3838～5050～6060～7068～803牛27～4244～6546～9096～120120～1444～5马2430～3650～607298～1066A.小鼠胚胎进入子宫时的发育程度比牛的高B.体外马胚胎移植到子宫时选择16细胞阶段C.受精卵发育的阶段顺序为2-4-8-16-桑葚胚D.2-4-8-16细胞发育阶段进行的是有丝分裂8、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔9、下列关于植物组织培养及其应用的说法中，正确的是（）A.植物体体内具完整细胞结构的活细胞均可作为组织培养的外植体B.不同培养阶段的培养基中生长素与细胞分裂素的比例应不同C.单倍体育种和转基因植物的培育需要利用植物组织培养技术D.利用植物组织培养技术可实现某些重要细胞产物的工厂化生产10、驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（）A.驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍B.驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法C.驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，无细胞脱分化和再分化的过程D.驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因突变11、下图表示动物细胞培养的基本流程。有关叙述正确的是（）

A.在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养B.培养瓶D可以通过松盖处理满足细胞培养的气体环境需要C.培养瓶D无需放置在CO2培养箱中，但需要保持恒温D.D瓶细胞出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞分瓶培养12、熔喷布是口罩生产的重要原料；主要成分是聚丙烯，其易降解程度是评价口罩合格性的重要指标之一。某研究小组从土壤中分离出高效降解聚丙烯的细菌，部分流程如图所示。下列说法正确的是（）

A.②中的选择培养基以聚丙烯为唯一碳源B.步骤③所用的接种工具是接种环C.在配制步骤②、③的培养基时，应先调pH后高压蒸汽灭菌D.对③中平板上的菌落进行计数，可以计算出土壤浸出液中细菌的浓度13、大肠杆菌经溶菌酶和洗涤剂处理后，拟核DNA就会缠绕在细胞壁碎片上，静置一段时间，质粒分布在上清液中，利用上述原理可初步获得质粒DNA。用三种限制酶处理提取的产物，电泳结果如图所示。下列关于质粒的粗提取和鉴定的叙述正确的是（）

A.提取DNA时可加入酒精，使溶于酒精的蛋白质等物质溶解B.将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂进行鉴定C.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理D.根据电泳结果，质粒上一定没有限制酶Ⅰ和Ⅱ的切割位点，而有限制酶Ⅲ的切割位点14、相较于其他模型动物（如小鼠和大鼠），兔的免疫系统可对更广泛的抗原产生应答且其较大的脾脏可产生更多抗体。除此之外，兔的单克隆抗体具有天然多样性、高亲和力和特异性、全新的表位识别、易于人源化（已成为将外源抗体转化为有效安全的治疗药物的重要方式）等优势。下列相关叙述错误的是（）A.利用人源化兔单克隆抗体进行治疗时，机体将会发生细胞免疫B.给兔子注射抗原后，兔子体内的抗体只有很少一部分是单克隆抗体C.利用选择培养基筛选的杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的能力D.体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95％的氧气和5％的CO2评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)15、______——“分子手术刀”16、转化的概念：是______进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持______的过程。17、获取目的基因的方法______、______、______18、请回答有关植物细胞工程的问题：

（1）在植物中，一些分化的细胞，经过________的诱导，可以脱分化失去其__________而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中，将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温_________（填：“光照”或“黑暗”）条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到_________培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到__________的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含_____的培养基上，获得所需个体。19、科学家采用定点诱变的方法构建T4溶菌酶的新蛋白质，发现其中一种新蛋白质的第9和第164位氨基酸残基被转换为半胱氨酸残基，并形成一个二硫键。这种新蛋白质的热稳定性会有什么变化？这项技术的要点是什么？_________20、近年来，克隆技术的发展取得了巨大突破｡在日常生活中，我们遇到过与克隆技术有关的问题吗？_____。评卷人得分四、实验题(共3题，共27分)21、学校开展以“利用传统发酵技术制作食品”为主题的相关活动。小余同学兴致勃勃地回家；发现冰箱中可用的原材料有草莓；豆腐、白萝卜、牛奶等。请回答下列问题：

（1）传统发酵技术一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次发酵保存下来的发酵物中的______进行发酵；制作食品的技术。

（2）小余同学将草莓洗净、切块，装入瓶中。加入原浆醋（经粮食直接酿制，不经勾兑）少许、白糖两勺，置于保温箱中，每隔一段时间拧开瓶盖换气，两周后得到草莓醋。小余同学加入原浆醋的目的是接种更多的______，加入糖并经常开盖换气的目的是保证______都充足。保温箱温度应保持在______℃。

（3）小余同学还打算制作一些腐乳和萝卜泡菜给住宿生作早餐。从豆腐到腐乳，多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是_______，属于______（填“真核”或“原核”）生物。豆腐中的成分也会发生一定的变化，其中蛋白质被分解成______，脂肪被分解成______；用白萝卜制作泡菜的过程中，能达到缩短腌制时间的操作有______（填下面的序号）。

①将白萝卜切成小块②用沸水短时间处理白萝卜块。

③添加陈泡菜汁④向容器中通入无菌空气。

（4）小余同学欲从泡菜汁中分离制作酸奶的乳酸菌，首先对陈泡菜汁进行过滤，然后取滤液用无菌水进行充分______，再用涂布器接种到特定的______培养基中进行初步筛选。22、豆豉是中国传统特色发酵豆制品调味料。豆豉以黑豆或黄豆为主要原料；利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，经复杂工序制作而成。程序如下：黑豆→筛选→洗涤→浸泡→沥干→蒸煮→冷却→接种→制曲→洗豉→浸→拌盐→发酵→晾干→成品（干豆豉）。请回答下列问题：

（1）蒸煮目的是_________，冷却后再接种的原因是_____________。

（2）观察发现发酵容器中上层豆类的发酵效果比底层的好，说明该菌是________。

（3）制作过程中要加入适量的盐，盐能______________；避免变质。

（4）从黑豆到豆豉。它的成分会发生一定的变化。其中最显著的变化是________。

（5）豆豉制作过程中用到的菌种与课本上_________________________制作的菌种最接近，从细胞结构看，它们属于___________生物。23、嗜热土壤芽孢杆菌产生的β-萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶。为使其在工业生产中更好地应用；开展了以下实验。如图为质粒限制酶酶切图谱，如表为几种限制酶的识别序列及酶切位点。请回答下列问题：

(1)通常情况下，获得的目的基因需要进行扩增，最简便的方法是_________技术。

(2)分析上图，可选择_______和_______两种不同的限制酶切割质粒，以防止质粒自身环化。质粒被切割后，可用_______将其与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是_______。

(3)大肠杆菌不能降解纤维素，但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力，这是因为_______。

(4)蛋白质工程是二代基因工程，它的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→_______→_______→找到相对应的脱氧核苷酸序列。评卷人得分五、综合题(共3题，共24分)24、λ噬菌体有极强的侵染能力；并能在细菌中快速地进行DNA的复制，最终导致细菌破裂（称为溶菌状态），或者整合到细菌基因组中潜伏起来，不产生子代噬菌体（称为溶原状态）。在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体，使其在受体细菌中大量扩增外源DNA，进而构建基因文库，相关操作如下图，请分析回答相关问题：

（1）组装噬菌体时，可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36～51kb，则λgt10载体可插入的外源DNA的长度范围为____________________。

（2）λ噬菌体的溶菌状态；溶原状态各有用途。现有一种imm434基因；该基因编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物。但如果直接插入该基因，会使载体过大而超过噬菌体蛋白质的包装能力，需要删除λ噬菌体原有的一些序列。据图分析下列问题：

①如果需要获得大量含目的基因的噬菌体，应当使λ噬菌体处于________状态，相应的改造措施是删除λ噬菌体DNA中的________（填“左臂”“中部”或“右臂”）；

②如果需要目的基因在细菌中大量克隆，应当使λ噬菌体处于________状态，相应的改造措施是__________________________________________。25、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌；将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。请回答：

(1)步骤③将土壤悬浮液稀释了____________倍，步骤④所用的接种工具是____________。

(2)下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的____________培养基，并加入琼脂后进行高压蒸汽灭菌、倒平板。纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是_______。

Ashby培养基：甘露醇（C6H14O6）10g，KH2PO40．2g，MgSO4·7H2O0．2g，NaCl0．2g，K2SO40．3g，CaCO35g；蒸馏水1000mL。

LB培养基：蛋白胨1g；酵母提取物5g，NaCl5g，蒸馏水1000mL，pH7．0-7．2

(3)将纯化的固氮菌置于完全培养液中扩大培养48小时；经离心后收集下层细胞并转移至特定培养基中进行固氮能力的测定，筛选出固氮能力最强的菌种CM12为进一步鉴定其固氮，科研人员选用发芽一致的玉米种子进行3组盆栽实验，30d后测定土壤微生物有机氮含量，结果如下图。

CK：对照处理组。

N：尿素处理组（每盆土壤中50mL有全营养液：成份为在1000mL无氮植物营养液中加入0．12g尿素）

CM12：自生固氮菌CM12处理组（每盆土壤浇50mL接种自身固氮菌的无氮植物营养液）

①对照组（CK）的处理为____________。

②实验结果表明：____________

③自生固氮菌较共生固氮菌（如根瘤菌）的应用范围更广，原因是____________。26、人β防御素（由H基因编码）是一种抗菌肽；科研人员欲利用酵母对其进行生产。

(1)获得H基因的序列信息后，可以其cDNA为模板通过_____方法获得该基因。

(2)由于人β防御素会损伤酵母细胞；组成型表达（持续表达）H的酵母菌最大种群数量偏低，限制了最终产量。科研人员在酵母菌基因组DNA中插入Р和S基因，使质粒上H基因的表达受到红光控制。红光调控H基因表达的原理如图1所示。

P和S基因应为_____（填“组成型表达”或“红光诱导表达”）。

(3)发酵后菌体和产物分离是发酵工艺的基本环节。定位于细胞表面的F蛋白可使酵母细胞彼此结合；进而沉淀在发酵罐底部。科研人员引入蓝光激活系统（图2），在酵母菌基因组中插入了2个E基因，使F基因的表达受到蓝光控制（图3）。

图3中两个E基因作用分别是_____。

(4)工程菌泄露到环境中可能引发环境问题。科研人员利用两种阻遏蛋白基因（T和L）和调控元件；使酵母细胞在红光和蓝光同时照射时才激活致死基因N的表达，进而诱导工程菌死亡（图4）。

图4中①②应选用的启动子为：①_____，②_____。

A．JubB．ACTC．CYC

图4中③④处结合的阻遏蛋白为：③_____，④_____。

a、T蛋白b；L蛋白。

(5)写出利用该工程菌发酵生产人β防御素的步骤。_____参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

根据表格分析；甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培养基缺氮，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培养基中没有有机碳源，说明乙能够合成有机物，属于自养微生物；而丙不能在Ⅰ培养基，说明不能固氮；又不能在Ⅱ培养基中生长，说明不能合成有机物，只能在Ⅲ培养基中生长，说明属于异养微生物。

【详解】

根据以上分析已知，乙属于自养微生物，A错误；甲能够在Ⅰ中正常生长繁殖，但是不能在Ⅱ培养基中生长繁殖，说明其为异养微生物，B错误；根据以上分析已知，丙属于异养微生物，C错误；根据以上分析已知，甲是固氮微生物，乙是自养微生物，丙是异养微生物，D正确。2、D【分析】【分析】

农杆菌的特点是易感染双子叶植物和裸子植物；对单子叶植物没有感染力。农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。农杆菌转化过程：目的基因插入Ti质粒的T-DNA→农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。

【详解】

A；土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒；在侵染植物细胞的过程中，其中的T-DNA片段可转入植物的基因组，所以若用Ti质粒作为抗旱基因的载体时，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏，A正确；

B、将目的基因导入细菌时，需要用Ca2+处理细菌；使其成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，B正确；

C；用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染植物细胞；使其具有抗旱基因，然后再通过植物组织培养技术将受体细胞培养成具有抗旱基因的植物，C正确；

D；能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因；只能说明目的基因导入成功，不能说明该基因成功表达，即不能说明该基因工程项目获得成功，D错误。

故选D。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能从题文提取有效信息，并结合所学知识，对生物学问题作出准确判断的能力。3、D【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶大多来自于原核生物；只能识别DNA分子的特定核苷酸序列，A错误；

B；不同限制酶切割的粘性末端相同也能连接；B错误；

C；天然的质粒不能直接作为载体；基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的；检测目的基因是否表达出蛋白质，可采用抗原一抗体杂交法，C错误；

D；动植物病毒也可以作为基因工程的载体；D正确。

故选D。4、C【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

A；生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等，A正确；

B；利用炭疽杆菌制成的生物武器；具有传染性强，死亡率高的特点，B正确；

C；1998年6月；中美两国发布联合声明，重申在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；

D；世界上爱好和平的人们是占多数的；彻底销毁生物武器是世界上大多数国家的共识，D正确。

故选C。5、D【分析】【分析】

微生物的营养物质主要包括碳源；氮源、水和无机盐等；有些微生物还需要特殊的营养物质，如维生素、生长因子等；培养基中含有琼脂的一般为固体培养基；选择培养基是指通过培养混合的微生物，仅得到或筛选出所需要的微生物，而其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。

【详解】

A、该培养基配方中没有凝固剂琼脂，依物理性质划分，该培养基属于液体培养基，A正确；

B、该培养基配方中含有青霉素，依用途划分，该培养基属于选择培养基，B正确；

C、培养基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3，C正确；

D、细菌对青霉素敏感，含青霉素的培养基不能培养细菌，因此用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去（CH2O）和青霉素，再添加纤维素，D错误。

故选D。

【点睛】

本题主要考查培养基的相关知识，意在强化先是对培养基的营养物质的组成成分、培养基的分类等的识记、理解与掌握。6、A【分析】【分析】

基因表达载体的构建：

1；过程：用限制酶切割目的基因和运载体；再用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子。

2；目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。

3；基因表达载体的组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。（1）启动子在基因的首段；它是RNA聚合酶的结合位点，能控制着转录的开始；（2）终止子在基因的尾端，它控制着转录的结束；（3）标记基因便于目的基因的鉴定和筛选。

【详解】

A；重组DNA分子上的抗性基因（标记基因）可用于目的基因的检测与鉴定；但即使存在目的基因也不一定表达了相关产物，A错误；

B；限制酶、DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键；前者是切割磷酸二酯键，后者是连接磷酸二酯键，B正确；

C；启动子是一段有特殊结构的DNA片段；是RNA聚合酶的结合位点，能启动转录过程，C正确；

D；限制酶Ⅰ和酶Ⅱ识别的核苷酸序列不同；所以用限制酶Ⅰ和酶Ⅱ同时切割目的基因和质粒可防止二者任意结合，D正确。

故选A。二、多选题(共8题，共16分)7、A:C:D【分析】【分析】

分析表格：不同动物胚胎发育的时间及进入子宫的时间不同；小鼠在胚胎发育3天进入子宫，牛在胚胎发育4-5天进入子宫，马在胚胎发育6天进入子宫。

【详解】

A；小鼠胚胎在发育3天进入子宫；此时处于桑椹胚时期，牛在胚胎发育4-5天进入子宫，此时处于16细胞时期，故小鼠胚胎进入子宫时的发育程度比牛的高，A正确；

B；马在胚胎发育6天进入子宫；此时大概处于囊胚期，故体外马胚胎移植到子宫时选择囊胚期，B错误；

C；由表格信息可知；受精卵发育的阶段顺序为2-4-8-16-桑椹胚-囊胚期，C正确；

D；2-4-8-16细胞发育阶段进行的是有丝分裂；不改变遗传物质，D正确。

故选ACD。8、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。9、A:B:C:D【分析】【分析】

植物组织培养：1；过程：离体的植物组织；器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，再分化产生胚状体，最好发育成植株（新植体）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要。

2；原理：植物细胞的全能性。

3；应用：植物繁殖的新途径（快速繁殖优良品种、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种和突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；用于培养的植物细胞必须具有完整的细胞核；以保证有全套的遗传信息，因此植物体体内具完整细胞结构的活细胞均可作为组织培养的外植体，A正确；

B；脱分化过程和再分化过程所需的培养基中生长素与细胞分裂素的比例应不同；如生长素与细胞分裂素用量比值适中时，促进愈伤组织的形成；生长素与细胞分裂素用量比值低时，有利于芽的形成；生长素与细胞分裂素用量比值高时，有利于根的形成，B正确；

C；单倍体育种和转基因植物的培育都要经历细胞到植株的过程；因此都需要用到植物组织培养技术，C正确；

D；利用某些细胞能产生特定的产物；通过组织培养使细胞数量增加，进而增加产量，实现工厂化生产，D正确。

故选ABCD。

【点睛】10、C:D【分析】【分析】

植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞；进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。在进行植物体细胞杂交时需要使用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁，使用化学方法（聚乙二醇）或物理方法诱导原生质体融合，不能用灭活的病毒诱导。可根据植物细胞的质壁分离和复原鉴定杂种细胞是否再生细胞壁，从而确定原生质体融合是否完成。植物体细胞杂交的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍；培育作物新品种方面所取得的重大突破。

【详解】

A；驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的；采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；

B；要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体；需要采用酶解法（纤维素酶、果胶酶），诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法（电刺激等），B正确；

C；驱蚊草培育过程不同于植物组织培养；但需要采用植物组织培养技术，因此有细胞脱分化和再分化的过程，C错误；

D；驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术；育种原理是染色体数目变异，D错误。

故选CD。11、A:B:D【分析】【分析】

动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；将动物组织分散为单个细胞制成细胞悬液中进行的第一次培养为原代培养；因此在C瓶中进行的细胞培养称为原代培养，A正确；

BC、进行动物细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，以满足细胞培养的气体环境需要，其中氧气是细胞呼吸必需的，CO2是为了维持培养液的pH；B正确；C错误；

D；D瓶细胞出现接触抑制时；应用胰蛋白酶处理使其分散为单个细胞，再用离心法收集细胞分瓶以进行传代培养，D正确。

故选ABD。12、A:C【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；根据题意；熔喷布是口罩生产的重要原料，主要成分是聚丙烯，本实验目的是筛选出可以高效降解一次性口罩的细菌，②中的选择培养基要以聚丙烯为唯一碳源，A正确；

B；步骤③接种方法为稀释涂布平板法；接种工具为涂布器，B错误；

C；在配制步骤②、③的培养基时；为避免杂菌污染，应先调pH值后再进行高压蒸汽灭菌，C正确；

D；对③中平板上的菌落进行计数；可以计算出土壤浸出液中细高效降解聚丙烯的细菌的浓度，D错误。

故选AC。13、A:B:C【分析】【分析】

DNA的粗提取和鉴定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白质溶于酒精，以及DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，可以将DNA与蛋白质分离开；在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。

【详解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA时可加入酒精，是为了让DNA析出，蛋白质等物质溶解，A正确；

B；将提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺试剂在沸水条件进行鉴定，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色，B正确；

C；DNA带负电；电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，C正确；

D；因为质粒的本质是环状的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ处理后电泳只有一条条带，可能是该质粒上有一个切割位点，也可能没有切割位点，D错误。

故选ABC。14、A:B:D【分析】【分析】

单克隆抗体的制备（1）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体。②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。（2）单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应；之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

【详解】

A；抗体参与的是体液免疫；A错误；

B；单克隆抗体是由特异性杂交瘤细胞产生的；B错误；

C；杂交瘤细胞具有能迅速大量增殖的能力；C正确；

D、体外培养特异性杂交瘤细胞时，需要给予95％的空气和5％的CO2，D错误。

故选ABD。三、填空题(共6题，共12分)15、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】限制性核酸内切酶（限制酶16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因稳定和表达17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术18、略

【分析】【分析】

植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

（1）在植物中；一些分化的细胞，经过激素的诱导，可以脱分化失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中；将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温黑暗条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含一定浓度的盐的培养基上，获得所需个体。

【点睛】

本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的过程、原理及条件，掌握植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确分析，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】①.激素②.特有的结构和功能③.黑暗④.分化⑤.培养条件和外界压力⑥.一定浓度的盐19、略

【分析】【详解】

蛋白质形成二硫键，使蛋白质的结构更加稳定，因此T4溶菌酶的热稳定性会提高。这项技术属于蛋白质工程技术，其步骤为从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。【解析】会提高T4溶菌酶的耐热性。这项技术属于蛋白质工程技术，该技术的要点是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需的蛋白质。20、略

【分析】【详解】

在日常生活中；我们遇到过的与克隆技术有关的问题有：

①濒临灭绝动物的克隆：克隆可以拯救濒危的国家保护动物以及植物；我们可运用克隆，复制濒临灭绝的生物，让其不至于在我们的生活中消失；

②农业克隆：应用于农业等领域；通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；

③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题；比如胚胎干细胞；

④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。【解析】有，比如：①濒临灭绝动物的克隆；②农业克隆：应用于农业等领域，通过转基因的方式，增加粮食的亩产量，提高土地的单位出产量；③细胞克隆替代或者修复人体细胞问题，比如胚胎干细胞；④畜牧业克隆：应用于畜牧业，提升优良品种群体基数，缩短畜牧育种年限。四、实验题(共3题，共27分)21、略

【分析】【分析】

醋酸菌是好氧性细菌；当缺少糖源和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。

【详解】

（1）传统发酵技术一般是指直接利用原材料中天然存在或前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物进行发酵；制作食品的技术；一般不需要严格灭菌。

（2）原浆醋中含有发酵产生醋酸的醋酸菌；加入原浆醋的目的是接种更多的醋酸菌，加入糖并经常开盖换气的目的是保证糖源；氧气都充足，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。醋酸菌适宜的发酵温度为30~35℃，故保温箱温度应保持在30~35℃。

（3）腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉；毛霉属于真核生物，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。①将白萝卜切成小块可以扩大白萝卜与腌料的接触面积，缩短腌制时间，①正确；②用沸水短时处理，可抑制某些微生物的繁殖，提高泡菜品质，也可缩短腌制时间，②正确；③泡菜汁中含有一定量的发酵菌种，所以在腌制过程中，加入一些已经腌制过泡菜汁可缩短腌制时间，③正确；④泡菜制作所需菌种为乳酸菌，制作过程中应保持无氧环境，向容器中通入无菌空气不利于腌制，④错误；综上分析，①②③操作能达到缩短腌制时间。

（4）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌；首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液用无菌水进行稀释，再用涂布分离的方法在特定的热选择培养基中进行初步筛选乳酸菌。

【点睛】

本题考查传统发酵技术的应用，意在考查考生对发酵原理、发酵过程的识记和应用能力。【解析】微生物醋酸菌糖源、氧气30~35毛霉真核小分子肽和氨基酸甘油和脂肪酸①②③稀释选择22、略

【分析】豆豉的制作原理与腐乳的制作类似：起主要作用的是真菌中的毛霉；适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸；甘油和脂肪酸。

【详解】

（1）黄豆煮熟的目的主要破坏黄豆内部结构；使蛋白质变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用，冷却后再接种的原因是防止高温杀死菌种；

（2）发酵装置的上层含氧量比较高；发酵装置内上层黄豆的发酵效果比底层好，说明该发酵菌是需氧菌，其新陈代谢类型是异养需氧型；

（3）盐能抑制微生物生长所以制作豆豉过程中要加入适量的盐；避免变质；

（4）大豆到豆豉的过程中；主要利用毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用，所以其中最显著的变化是蛋白质被蛋白酶分解成小分子肽和氨基酸；

（5）腐乳的制作过程也是利用了毛霉；曲霉等微生物产生的蛋白酶的作用；毛霉、曲霉等微生物都是真核生物。

【点睛】

本题考查了豆豉制作的相关知识，要求考生能够识记豆豉制作的原理；能够利用酶的专一性解答蛋白酶和脂肪酶作用的产物是解答本题的关键。【解析】破坏大豆内部分子结构，使蛋白质适度变性，淀粉达到糊化程度，易于水解，同时可起到灭菌的作用防止高温杀死菌种好氧菌抑制微生物生长蛋白质转变成氨基酸和肽。腐乳真核23、略

【分析】【分析】

1；基因工程的基本操作过程主要包括四个步骤：目的基因的获取；基因表达载体的构建；将目的基因导人受体细胞；目的基因的检测与鉴定。（1）目的基因的获取方法目的基因的获取方法主要有从自然界已有的物种中分离出来（如鸟枪法从基因文库或cDNA文库中获取）、人工合成（常用的方法有化学合成法和反转录法）、PCR技术扩增目的基因。（2）构建基因表达载体；需分别用限制酶切割目的基因和质粒，用限制酶切割质粒时，选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点、启动子、终止子等必须的结构。用DNA连接酶连接，构成重组质粒。（3）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法：将含有目的基因的表达载体提纯→从雌性动物体内取出卵（可在体外受精，也可在体内受精）→采用显微注射仪进行显微注射→将注射了目的基因的受精卵经胚胎早期培养一段时间后，移植到雌性动物的输卵管或子宫内，使其发育成为具有新性状的动物。

2；蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。

【详解】

（1）获取目的基因的方法主要有三种；最简便的是PCR技术。

（2）用限制酶切割质粒时；选择的限制酶不可以破坏质粒上的标记基因和复制原点；启动子、终止子等必须的结构，由图可知可选用NdeⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割质粒。用DNA连接酶将切割后的质粒与目的基因连接。在动物基因工程中将目的基因导入受体细胞时通常的方法是显微注射法。

（3）上述建构好的表达载体含有能够表达β-萄糖苷酶(BglB)的基因；转基因大肠杆菌能够分泌出有活性的β-萄糖苷酶，所以能够降解纤维素。

（4）蛋白质工程的基本途径是从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。【解析】(1)PCR

(2)NdeⅠBamHⅠDNA连接酶显微注射法。

(3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶。

(4)设计预期的蛋白质结构推测应有的氨基酸序列五、综合题(共3题，共24分)24、略

【分析】【分析】

噬菌体属于病毒；病毒的繁殖过程为：吸附→注入→合成→组装→释放等五个步骤。在吸附过程中，DNA分子注入细菌体内，而蛋白质外壳留在外面。

【详解】

（1）人工改造后的λgt10载体的长度是43.4kb，而可被噬菌体蛋白质包装的DNA长度约为36～51kb，因此λgt10载体可插入的外源DNA的最大长度是51－43.4＝7.6kb，故长度范围为0～7.6kb。

（2）如果需要获得大量含目的基因的噬菌体；应当使λ噬菌体处于溶菌状态，则应删除λ噬菌体的DNA中含控制溶原生长的序列，即中部；如果需要目的基因在细菌中大量克隆，应当使λ噬菌体处于溶原状态，则应删除λ噬菌体的DNA中含编码蛋白质外壳序列，即删除λ噬菌体DNA中的左臂，并插入imm434基因。

【点睛】

本题综合考查基因工程和DNA是主要