2025年牛津译林版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年牛津译林版选择性必修3生物下册阶段测试试卷667考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、高等哺乳动物受精后不久；受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚；囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，如图为该过程中的某一时期示意图。下列有关叙述错误的是（）

A.图中①②③依次为透明带、滋养层、内细胞团B.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于图示时期，终止于生命结束C.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化D.进行胚胎分割时，应选择图示时期之后的胚胎进行2、上海医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可以大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍，标志着我国转基因研究向产业化的目标又迈进了一大步。以下与此有关的叙述，正确的是（）A.转基因牛的培育过程只涉及基因工程、胚胎工程的相关技术B.该培育过程一般需要用到乳腺蛋白基因的启动子等调控组件C.所谓“提高基因表达水平”主要是指提高人白蛋白基因在牛乳腺细胞中的含量D.人们只能在转基因牛的乳汁中获取到人白蛋白，是因为此基因只存在于乳腺细胞中3、下列有关植物细胞工程应用的叙述，不正确的是（）A.利用组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种B.利用组织培养技术获得人工种子，能保持亲本的优良性状C.利用细胞培养技术获得紫草素，实现了细胞产物的工厂化生产D.利用植物体细胞杂交技术获得“白菜—甘蓝”，克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍4、荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是：在PCR反应体系中加入与某条模板链互补的TaqMan荧光探针，当Taq酶在延伸子链时遇到探针，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即荧光每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列叙述错误的是（）

A.每次模板DNA的扩增都需要用到一对碱基序列互补的引物B.Taq酶催化DNA的合成方向总是从子链5'端到3'端延伸C.引物与探针均具特异性，与模板结合时都遵循碱基互补配对原则D.若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因的转录水平5、RNA干扰是指通过RNA的介导，特异性降解相应mRNA，从而导致的基因沉默现象。miRNA能介导RNA干扰。筛选来源于伊蚊的负向调节自身免疫的miRNA，构建表达伊蚊miRNA的工程菌株，可防治伊蚊。下列叙述错误的是（）A.RNA干扰导致基因沉默使相关基因虽能转录但无法翻译B.使用伊蚊来源的miRNA进行菌株改良容易使伊蚊产生抗性C.使用伊蚊特异miRNA可提高工程菌的寄主靶向性和特异性D.伊蚊存在能负向调节自身免疫的miRNA说明免疫具有稳态评卷人得分二、多选题(共5题，共10分)6、下列有关生物技术引起的安全性和伦理问题的叙述，不正确的是（）A.基因编辑制造婴儿的行为是不符合伦理道德的B.设计试管婴儿是为了治疗疾病，不会出现负面影响C.我国禁止生殖性克隆人和有关人胚胎干细胞的研究D.世界各国都应该禁止在任何情况下生产、储存和发展生物武器7、运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，必要的操作是（）A.对小动物注射特定抗原B.融合并筛选杂交瘤细胞C.原代培养效应B细胞D.将胰蛋白酶注入小动物腹腔8、重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥；互为模板；经过多次PCR扩增。从而获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方而具有广泛的应用前景，下图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列叙述正确的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物与模板DNA结合的稳定性越高B.在第一阶段由于引物2和引物3发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中C.引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制，共产生4种双链DNA分子D.在引物1、2组成的反应系统中，经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过3次复制9、某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素；给抗感染治疗带来很大困难。利用检测试条可检测细菌是否产β-内酰胺酶，试条左右两侧对称含有一定浓度梯度的抗生素，并在一侧添加克拉维酸（一种β-内酰胺酶抑制剂）。将两个含不同抗生素的检测试条放置在涂布有待检菌株的培养基上，培养一段时候后结果如下图所示。下列说法正确的是（）

A.抗生素的大量使用会导致产β-内酰胺酶细菌的出现B.由实验结果可知，越靠近试条两端的抗生素浓度越大C.该菌能产生β-酰胺酶，试条1中克拉维酸添加在试条右侧D.使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好10、为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（）A.将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率B.涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mLC.需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间D.挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析评卷人得分三、填空题(共7题，共14分)11、（1）致病菌：第二次世界大战期间，侵华日军在中国领土上修建了几十座_____工厂，曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了_____；造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）生化毒剂：如_____分子可以阻滞神经末梢释放_____；从而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）基因重组致病菌：这些致病菌是人类的_____致病菌，可让大批受感染者突然发病，而又无药可医。12、通过统计平板上的________________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在_________________________的平板进行计数。13、______——“分子缝合针”14、醋酸菌的最适生长温度为____________________℃。15、基因工程操作一般经历如下四个步骤：_____。16、常用的转化方法：

将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是_______，其次还有______和______等。

将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是_______。此方法的受体细胞多是_______。

将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是_______，最常用的原核细胞是_____，其转化方法是：先用______处理细胞，使其成为______，再将______溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。17、最后检测目的基因是否翻译成______，方法是从转基因生物中提取______，用相应的______进行______。评卷人得分四、判断题(共4题，共28分)18、酿酒酵母的最适生长温度为30度。()A.正确B.错误19、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术，体现了动物细胞的全能性。（选择性必修3P52）()A.正确B.错误20、胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。（选择性必修3P58）()A.正确B.错误21、蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共4题，共40分)22、在酿酒；酿醋、制作腐乳、酸奶过程中都要涉及各种微生物；请回答下列问题。

（1）酿酒利用的微生物是酵母菌，制作过程中，酵母菌先在有氧条件下大量繁殖，然后再进行酒精发酵，检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成________________色。如果葡萄酒酿造过程中葡萄汁中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将葡萄汁中的糖发酵为醋酸，原因是_______________________________________________________。

（2）醋酸发酵时温度一般应控制为_______________。

（3）在臭豆腐的制备过程中，常用的微生物主要是________________，在此过程中，豆腐相当于微生物生长的______________________。

（4）民间制作腐乳时，豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐、酒，若加入的酒精浓度（含量）过低，会出现什么现象？__________________________________。

（5）在腌制泡菜的过程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，用水封坛的作用是__________________________，欲检测泡菜在腌制过程中产生的亚硝酸盐含量，使用检测试剂后颜色变为_____________。23、β-苯乙醇是具有令人愉悦的玫瑰香味的高级芳香醇；广泛用于食品和日化用品等生产领域。化学合成β-苯乙醇会产生多种杂质，而植物萃取则周期长；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工业化新趋势。研究小组从玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下脚料及其肥料堆放的土壤中筛选可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），实验过程如图所示。回答下列问题：

(1)该实验需制作多种培养基，这些培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、__________等物质，培养基制作后需使用__________法进行灭菌，灭菌后的培养基再添加相应浓度的β-苯乙醇。由实验目的可知，初筛、复筛及再次复筛的培养基中，添加的β-苯乙醇的浓度应__________（填“保持不变”或“逐渐增大”或“逐渐降低”），理由是__________。

(2)若取稀释倍数为104的0．1mL稀释液涂布到含2g/L的YEPD培养基后培养至菌落稳定，计算得出每毫升菌悬液中含4．5×106个菌体，则在该稀释倍数下平板上的平均菌落数是__________个。将初筛获得的菌株进行液体培养，其目的是________。

(3)若选用葡萄糖作为碳源，为确定YDF-1增殖的最佳浓度，请设计一个较为简便的实验进行探究，实验设计思路是__________。24、科学家的发现给人类的生活带来了无限的想象；他们采集了某深海海域的沉积物样品，分离；鉴定得到其中的深海放线菌，以期获得具有前景的抗生素替代品。据此回答下列问题：

(1)研究人员欲筛选出深海放线菌进行研究，取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后取菌液通过_______________法接种到高氏一号（加数滴质量分数为10%的酚）培养基表面以获得单菌落。

(2)通过PCR技术扩增分离得到的放线菌的16SrRNA基因可进行菌株的种属鉴定。PCR技术中起关键作用的酶是_____________。该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR产物一般可通过_________________鉴定。

(3)科学家还将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中。2~3周后，这些细胞显示出ES细胞的形态、具有活跃的分裂能力，它们就是iPS细胞。在这个实验过程中，逆转录病毒的作用是_______________如何证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用？请写出实验设计思路______________25、微生物因具有体积小；易培养，繁殖快，且自身遗传物质结构简单，经人工处理或自然突变可获得新性状等特点，在发酵工程中应用广泛。回答下列问题：

(1)大肠杆菌是发酵工程中应用较为广泛的菌种之一。培养大肠杆菌时，需要将培养基的pH调至____性，再利用_________________法灭菌后进行接种。

(2)在发酵工程中，常常需要对菌种数目进行统计。相对真菌来说，细菌的体积较小，因此对细菌数目进行统计时，适合使用_________________（填“细菌计数板”或“血细胞计数板”）进行计数，且统计的细菌数目往往比实际活菌数目_________________（填“多”或“少”）。

(3)人工处理或自然突变往往会使菌种成为营养缺陷型菌株；现欲设计实验证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，可获得组氨酸缺陷型突变菌株，请简单描述实验思路并预计实验结果：

实验思路：_____________________________；

实验结果：_____________________________。评卷人得分六、综合题(共4题，共16分)26、利用基因工程技术可将不同种生物的优良基因集合起来达到人类的生产目的。某科学家将人的血清白蛋白基因转入牛的体内构建乳腺生物反应器获得血清白蛋白。请回答：

（1）在人体内获取目的基因时要用到的工具是________，为了确保该血清白蛋白只在牛乳汁中出现，在构建基因表达载体时需要将__________等元件和人血清白蛋白基因重组在一起。乳腺生物反应器有一定的局限性，只能在雌性动物中应用，若要打破性别限制，科学家还可以构建_________生物反应器。

（2）要确认转基因牛是否表达出相应的血清白蛋白，可以采用的方法是__________，该方法的原理是____________。

（3）单克隆抗体的制备是细胞工程应用的重要范畴，通常使用灭活病毒促进__________和骨髓瘤细胞的融合来制备单克隆抗体，单克隆抗体的优点是__________。27、金黄色葡萄球菌是一种能耐相对较高浓度食盐的致病菌；为探究某天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌；醉母曲的抑菌作用，某生物小组用无菌水将金黄色葡萄球菌、酵母菌稀释成菌液，分别在固体培养基制成含菌平板，在平板上放置经不同浓度的该天然植物抗菌液浸泡2〜3h的滤纸片，培养一段时间后，测定抑菌圈的直径，结果如下表所示（“一”表示未出现抑菌圈）。回答下列问题:

。天然植物抗菌液浓度/%

5．0

2．5

1．0

0．5

0．0（无菌水）

0．0（无菌水）

抑菌圈直径/

金黄色他的球菌。

2．8

2．7

2．3

1．4

1．2

—

mm

酵母菌。

3．3

3．1

2．7

0．8

—

（1）制备含菌平板时采用的接种方法是___________________。

（2）对吸管、培养基进行灭菌的方法分别是______、_______，为检测培养基的灭菌效果，可对培养基进行_________。

（3）酿制果酒时，发酵后期酵母菌的代谢类型属于________；自制果酒时，葡萄果瓶中的杂菌与酵母菌的种间关系主要是_________________。

（4）根据实验结果_____（填“能”或“不能”）得出“相同浓度的该天然植物抗菌液对酵母菌的抑菌作用更大”的结论。简述该天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用的特点_________。28、肠道微生物对宿主健康具有重要影响；但目前缺乏对特定菌株进行基因编辑的有效手段。科研人员尝试使用M13噬菌体作为载体，对大肠杆菌进行基因编辑。M13噬菌体与T2噬菌体相似；能够侵染大肠杆菌，但被M13噬菌体侵染的大肠杆菌不发生裂解。

(1)科研人员将绿色荧光蛋白基因特异性序列（sgfp）；Cas酶基因与利用特定方法得到的M13噬菌体的环状DNA进行重组；构建重组基因编辑质粒（pCG）、如图1。

①构建pCG需要用到的工具酶有_____。

②以pCG的绿色荧光蛋白基因特异性序列（sgfp）经_____过程形成的RNA；会靶向结合绿色荧光蛋白基因，从而使Cas酶能够切割绿色荧光蛋白基因。

(2)科研人员将绿色荧光蛋白基因和红色荧光蛋白基因导入大肠杆菌，获得GS菌株。先用添加GS菌株的饲料喂养小鼠，一段时间后，将小鼠分为实验组和对照组。其中，实验组小鼠用添加含_____的M13噬菌体和的_____饲料喂养，以筛选获得肠道微生物被基因编辑的小鼠。本实验对照组使用的质粒不包括图1中的_____。

(3)为确认M13噬菌体作为载体对大肠杆菌进行基因编辑的可行性和特异性；科研人员检测肠道微生物的变化，结果如图2；3所示。

①图2中，标号为b、c的区域分别代表含有红绿叠加色荧光的微生物和无荧光的微生物，a区代表含有_____荧光的微生物。

②解释实验组第0天到第14天肠道微生物荧光类型发生变化的原因：_____。29、科研人员通过设计来自小鼠肠道的天然大肠杆菌；然后将修饰过的工程原生细菌植入小鼠体内后诱导了持续性的生理变化，从而改善了动物糖尿病等慢性病病理状态。研究人员首先从实验小鼠的粪便样本中提取出天然大肠杆菌，并从中鉴定出一种遗传上易驯化的菌株，然后通过基因工程修饰使其表达了在胆汁酸代谢中具有重要作用的胆汁盐水解酶（BSH），将经过修饰的天然细菌重新植入小鼠肠道。进行一次治疗后，研究人员在小鼠的整个肠道中都发现了带有BSH基因的大肠杆菌，它们在宿主的整个生命周期中都保持着BSH活性，BSH活性对治疗小鼠糖尿病产生积极影响。回答下列问题：

(1)修饰大肠杆菌所用的BSH基因，不能直接从小鼠细胞内提取。通常提取小鼠细胞内的相应mRNA来合成BSH基因，原因是_____。

(2)如图是大肠杆菌的质粒和通过R-PCR技术合成的BSH基因（目的基因），进行体外拼接时，不能选择限制酶A，理由是_____；选用限制酶B和酶C切割质粒和目的基因的优点有_____。

(3)将重组质粒导入大肠杆菌，需用_____处理，使其处于_____。

(4)导入重组质粒的大肠杆菌需进行筛选后方可应用于临床治疗，简要说明重组大肠杆菌筛选的思路：_____。

(5)若科学家利用蛋白质工程技术，研制出了新的BSH，与天然BSH相比，其效果更好，起效快，更好保存。获得BSH基因的途径是；从预期的蛋白质功能出发→_____→推测应有的氨基酸序列→_____。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

分析题图；图示为胚胎发育过程某一时期示意图，该时期为囊胚期，其中①为透明带；②为滋养层，将来发育成胎盘或胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织。

【详解】

A；如图是囊胚期示意图；①②③依次称之为透明带、滋养层、内细胞团，A正确；

B；细胞分化贯穿于整个生命历程；在胚胎时期达到最大限度，高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束，B正确；

C；胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化；C正确；

D；进行胚胎分割时；应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，图示细胞所处时期可以进行，D错误。

故选D。2、B【分析】【分析】

转基因动物的受体细胞是受精卵；所以含有转基因的受精卵在形成个体时，所有细胞都会含有转入的基因，“提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞表达出更多的人白蛋白，而不是含有更多的白蛋白基因。只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞才表达。

【详解】

A；转基因牛的培育过程涉及基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术以及配套工程的相关技术；A错误；

B；由题意“使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高了30多倍”可知：该培育过程一般需要用到乳腺蛋白基因的启动子等调控组件使目的基因在乳腺细胞内表达；B正确；

C；提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞中含有的人白蛋白基因指导合成更多的人白蛋白；C错误；

D；人们只能在转基因牛的乳汁中获取到人白蛋白；是因为此基因只在乳腺细胞中表达，D错误。

故选B。3、A【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖；作物脱毒；人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。

【详解】

A；因为分生组织的病毒极少；甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养能获得脱毒植株，但不能获得抗病毒的新品种，A错误；

B；经细胞培养产生的胚状体可直接制作“人工种子”；由于该技术属于无性生殖，因此能保持亲本的优良性状，B正确；

C；组织培养技术除了在农业生产上的应用外；还可广泛应用于另一个重要的领域，即细胞产物的工厂化生产，如利用细胞培养技术可大量获得紫草素，C正确；

D；白菜和甘蓝不属于同一物种；它们之间存在生殖隔离，因此利用植物体细胞杂交技术培育的“白菜一甘蓝”，能够克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍，D正确。

故选A。4、A【分析】【分析】

PCR技术：

(1)概念：PCR全称为聚合酶链式反应；是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；

(2)原理：DNA双链复制；

(3)前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成一对引物；

(4)条件：模板DNA；四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)；

(5)过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶；高温条件下氢键可自动解开）；②复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。

【详解】

A；PCR中所用的引物只能与相应模板链的3'端互补；两个引物之间不能互补，否则体系中加入引物后，引物之间形成杂合链，会影响引物与模板链的结合，不能正常扩增，A错误；

B；Taq酶可以催化子链沿着5’→3方向延伸；B正确；

C；引物与探针均具特异性；与模板结合时遵循碱基互补配对原则，C正确；

D；若用cDNA作模板；荧光定量PCR技术也可检测某基因的转录水平，D正确。

故选A。5、B【分析】【分析】

RNA干扰是指通过RNA的介导；特异性降解相应mRNA，从而阻碍了表达的过程。

【详解】

A；由题干可知；RNA干扰是指通过RNA的介导，特异性降解相应mRNA，mRNA是翻译的模板，所以RNA干扰导致基因沉默使相关基因虽能转录但无法翻译，A正确；

B；使用伊蚊来源的miRNA进行菌株改良；该菌株能表达伊蚊miRNA，所以不易使伊蚊产生抗性，B错误；

C；构建表达伊蚊miRNA的工程菌株；该菌株能表达伊蚊miRNA，所以可提高工程菌的寄主靶向性和特异性，C正确；

D；伊蚊存在能负向调节自身免疫的miRNA；当伊蚊自身免疫强烈是可缓解自身免疫，说明免疫具有稳态，D正确。

故选B。二、多选题(共5题，共10分)6、B:C【分析】【分析】

人们现在的伦理道德观念还不能接受克隆人﹔设计试管婴儿是为了治疗疾病；但有可能被滥用，如用于设计婴儿性别等，可能会出现负面影响﹔进行基因检测时，可通过基因进行检测，也可通过测定基因的表达产物蛋白质来进行;对于基因歧视现象，可通过正确的科学知识传播；伦理道德教育和立法得以解决。

【详解】

A；基因编辑制造婴儿的行为不符合伦理道德；A正确；

B；设计试管婴儿如专门用来设计婴儿性别是不符合伦理道德的；可能会存在负面影响，B错误；

C；我国禁止生殖性克隆人；但允许人胚胎干细胞的研究在有关规定下进行，C错误；

D；生物武器危害巨大；世界各国都应禁止生物武器，D正确。

故选BC。7、A:B【分析】【分析】

在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞；在诱导细胞融合时，除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞；效应B细胞不能分裂；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时，可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体。

【详解】

A；在制备单克隆抗体的过程中；需要先对小鼠进行特定抗原免疫，使机体产生相应的浆细胞，A正确；

B；在诱导细胞融合时；除了异种细胞融合外，还有同种细胞融合，因此需要在培养基中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；效应B细胞不能分裂；C错误；

D；在获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞时；可以将其注入小鼠腹腔中，以备获得大量的单克隆抗体，而不需要将胰蛋白酶注入小动物腹腔，D错误。

故选AB。8、A:B【分析】【分析】

PCR扩增运用DNA分子复制的原理；经过变性；复性、延伸，最终获得大量DNA的过程。

【详解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之间是三个氢键连接，因此引物与模板DNA结合的稳定性越高，A正确；

B；图中可知；引物2和引物3分别作用同一段DNA的两条链，会发生碱基互补配对，因此两者置于不同反应系统中，B正确；

C；引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制；共产生2种双链DNA分子，C错误；

D；在引物1、2组成的反应系统中；经第一阶段要形成图示双链DNA，至少要经过2次复制，D错误。

故选AB。9、B:C:D【分析】【分析】

题干分析；某些细菌能产生β-内酰胺酶水解抗生素，从而产生抗药性。试条两侧含有抗生素，并在试条一侧添加β-内酰胺酶抑制剂（能抑制β-内酰胺酶的活性，从而不能水解抗生素），将其放在不含有抗生素的待测菌株上培养，一段时间后发现，试条1右侧和试条2的左右两侧都出现了抑菌圈，说明该部位的菌株能产生β-内酰胺酶。

【详解】

A；基因突变具有不定向性；抗生素使用之前，产β-内酰胺酶的细菌已经出现，抗生素只是起到选择作用，A错误；

B；由实验结果可知；越靠近试条两端的抑菌圈较大，说明抗生素浓度较大，B正确；

C；该菌能产生β-酰胺酶；使用克拉维酸能抑制该菌产生的β-酰胺酶的活性，进而不能抵抗抗生素，试条1右侧出现抑菌圈，左侧没有出现抑菌圈，说明试条1中克拉维酸添加在试条右侧，C正确；

D；试条2左右两侧的抑菌圈菌大于试条1；说明使用试条2中所含抗生素治疗该菌感染的效果更好，D正确。

故选BCD。

【点睛】10、A:B【分析】【分析】

培养基的配制：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。微生物的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。预实验可以为正式实验进一步的摸索条件；可以检验实验设计的科学性和可行性，避免人力；物力和财力的浪费。

【详解】

A；培养基应先灭菌再分装于培养皿中；A符合题意；

B、涂布用的菌浓度应控制在106倍；以避免菌种重叠而不能得到单菌落，B符合题意；

C；辐射剂量和诱变时间都是正式实验的无关变量；可通过预实验确定，C不符合题意；

D；石油降解菌能分解石油获得碳源；形成菌落，挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析，以获得能高效降解石油的菌种，D不符合题意。

故选AB。三、填空题(共7题，共14分)11、略

【分析】【详解】

（1）早在第二次世界大战中；侵华日军就组建了从事细菌战的731部位和100部队，并在中国领土上修建了几十座细菌武器工厂，大量培养鼠疫；霍乱、伤寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的传染性疾病。曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了细菌武器，造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）某些国家或恐怖组织大量生产肉毒杆菌毒素；肉毒杆菌毒素分子可以阻滞神经末梢释放乙酰胆碱，从而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已经在地球上消灭；但是某些国家至今保留着天花病毒菌株，今天，在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）目前，有一些国家对重组基因技术制造全新的致病菌表现了极大的兴趣，这些人类从来没有接触过的致病菌，可以让大批受感染者突然发病，而又无药可医。【解析】①.细菌武器②.细菌武器③.肉毒杆菌毒素④.乙酰胆碱⑤.天花⑥.从未接触过12、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】菌落数30～30013、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA连接酶14、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】30～3515、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法显微注射技术受精卵繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少大肠杆菌Ca2+感受态细胞重组表达载体DNA分子17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】蛋白质蛋白质抗体抗原－抗体杂交四、判断题(共4题，共28分)18、B【分析】【详解】

酿酒酵母的最适生长温度是28℃；但在发酵过程中，一般将温度控制在18-30℃，这是因为果皮表面附着的野生酵母菌可能有多种（有多种酵母菌参与了发酵过程），从实践的角度看，大致控制温度范围比较简单易行。

故本说法错误。19、B【分析】【详解】

动物细胞核移植技术体现了动物细胞核的全能性，不能体现动物细胞的全能性，高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，故错误。20、A【分析】【详解】

胚胎发育至囊胚期时，细胞逐渐分化。聚集在胚胎一端的细胞形成内细胞团，将来发育成胚胎的各种组织，即发育成完整的胚胎，而沿透明带内壁拓展和排列的细胞，称为滋养层细胞，它们将来发育成胎膜和胎盘，为胚胎的发育提供营养，故该表述正确。21、A【分析】【详解】

蛋白质工程是在分子水平上通过基因修饰或基因合成来完成的，是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程。故该说法正确。五、实验题(共4题，共40分)22、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧条件下可生产二氧化碳和水，无氧条件下可生产酒精和二氧化碳。

2；腐乳制作中用盐腌制的目的：①盐能抑制微生物的生长；避免豆腐块腐败变质；②加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程中不会过早酥烂；③有调味作用。

（1）

检测酒精的原理是：橙色的重铬酸钾溶液；在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。醋酸菌是好氧型细菌，而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸或因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌的发酵需要充足的氧气），所以在酒精发酵旺盛时，醋酸菌不能将葡萄汁中的糖发酵为醋酸；

（2）

酵母菌的异化作用类型为兼性厌氧型；即在有氧条件下可生成水和二氧化碳，在无氧条件下生成酒精和二氧化碳；醋酸发酵的主要菌种是醋酸菌，醋酸菌的最适宜温度是30-35℃，故醋酸发酵时温度一般应控制为30～35℃；

（3）

豆腐的发酵中参与的微生物很多如青霉；酵母、曲霉、毛霉等；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物将豆腐中的营养基质如蛋白质、脂肪等分解；豆腐相当于培养基，能提供毛霉等菌种生长的条件；

（4）

民间制作腐乳时；豆腐块上生长的微生物，在制作时一般要加盐；酒（酒的含量一般控制在12%左右），若加入的酒精浓度（含量）过低，会出现不足以抑制微生物的生长，导致豆腐腐败变质的现象；

（5）

泡菜的制作的菌种是乳酸菌；属于厌氧型细菌，用水封坛的作用是隔绝空气，制造无氧环境，为乳酸菌的发酵提供无氧环境；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮反应生成重氮盐，重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

【点睛】

本题主要考查果酒的制作、腐乳的制作、腌制泡菜等知识点，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力。【解析】（1）灰绿醋酸菌是好氧型细菌；而果酒发酵是无氧环境(或醋酸菌需要在有氧且温度是30～35℃条件下，才能将糖转化为醋酸或因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌的发酵需要充足的氧气）

（2）30—35℃

（3）毛霉培养基。

（4）不足以抑制微生物生长；使豆腐腐败变质。

（5）制造无氧环境玫瑰红色23、略

【分析】【分析】

培养基是指供给微生物；植物或动物（或组织）生长繁殖的；由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。

【详解】

（1）培养基一般都含有水；无机盐、碳源和氮源等物质；以满足生物生长的需求；培养基制作后需使用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；由于本实验的目的是获得可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株，因此实验初筛、复筛和再次复筛时培养基中添加的β-苯乙醇浓度要逐渐升高。

（2）根据计算公式：（平均菌落数）÷涂布体积×稀释倍数=每毫升菌液中的菌体数，可知：（平均菌落数）÷0．1mL×104=4．5×106个；所以平板上的平均菌落数是45个；液体培养是指将微生物直接接种于液体培养基中，并不断振荡或搅拌，可以迅速得到大量繁殖体。

（3）由实验目的可知，该实验的自变量是葡萄糖溶液的浓度，因变量是YDF-1的增殖情况，可通过显微镜直接计数这一简便的方法来确定其增殖情况，因此实验的设计思路是设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度。【解析】(1)碳源；氮源高压蒸汽灭菌逐渐增大只有将培养基中β-苯乙醇的浓度逐渐增大；才能筛选得到可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株浓度。

(3)设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度24、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

【详解】

（1）分析题意可知；研究人员取1g沉积物样品接种在液体培养基中摇瓶培养，稀释后可通过稀释涂布平板法接种到培养基表面以获得单菌落。

（2）PCR技术是一项通过体外控制温度扩增DNA的技术，该技术中由于温度较高，起关键作用的酶是耐高温DNA聚合酶；PCR扩增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析题意，该技术能在放线菌总的DNA中专一性扩增出16SrRNA基因的原因是：引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的；PCR产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定：凝胶中的DNA分子通过染色；可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来。

（3）分析题意，科学家将Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通过逆转录病毒转入小鼠成纤维细胞中，该过程中逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞；分析题意，实验目的是iPS细胞的产生不是由于培养基的作用，故实验的自变量是外源基因的有无，因变量是IPS细胞的产生情况，实验设计应遵循对照与单一变量原则，故可设计实验如下：将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用。【解析】(1)稀释涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高温DNA聚合酶引物能与16SrRNA基因特异性结合（引物是根据16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列设计合成的）琼脂糖凝胶电泳。

(3)逆转录病毒是载体，能将外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纤维细胞。将转入外源基因的细胞和没有转入外源基因的细胞分别培养在相同的培养基中，在相同且适宜的条件下，如果只有转入外源基因的细胞转化成了iPS细胞，则可以证明iPS细胞的产生不是由于培养基的作用25、略

【分析】【分析】

1；利用显微镜进行直接计数；也是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。该方法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和。细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。血细胞计数板比细菌计数板厚，常用于相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。

2；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物；包括芽孢和孢子。湿热灭菌：高压蒸汽灭菌（压力为100kPa、温度为121℃、15~30min）；干热灭菌：160~170℃热空气维持2~3h。耐高温的和需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金属用具等；灼烧灭菌：接种工具。接种过程中，试管口、瓶口等容易被污染的部位。

【详解】

（1）大肠杆菌是细菌；培养培养大肠杆菌时，需要将培养基的pH调至中性或弱碱性，对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（2）细菌计数板和血细胞计数板的计数原理相同。血细胞计数板比细菌计数板厚；常用于相对较大的酵母菌细胞；霉菌孢子等的计数。用细菌计数板可对细菌等较小的细胞进行观察和计数。该方法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，所以统计的细菌数目往往比实际活菌数目多。

（3）本实验为了证明野生型大肠杆菌经紫外线照射后；可获得组氨酸缺陷型突变菌株，可将野生型大肠杆菌经紫外线照射后接种于不含组氨酸的完全培养基上，适宜条件下培养一段时间后观察大肠杆菌是否生长，如果在培养基上无大肠杆菌生长，说明野生型大肠杆菌经紫外线照射后，获得了组氨酸缺陷型突变菌株。具体实验思路及结果如下：

实验思路：使用稀释涂布平板法将紫外线照射后的大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上；标记为甲组；使用稀释涂布平板法将等量的野生型大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为乙组；将未接种的不含组氨酸的完全培养基标记为丙组；将甲；乙、丙组培养基放于相同且适宜的环境中培养，一段时间后观察并统计培养基上的菌落数。

实验结果：乙组培养基出现较多菌落；甲组培养基没有出现菌落或出现菌落、但菌落数少于乙组；丙组培养基无菌落。【解析】(1)中性或弱碱高压蒸汽灭菌（或湿热灭菌）

(2)细菌计数板多。

(3)使用稀释涂布平板法将紫外线照射后的大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为甲组；使用稀释涂布平板法将等量的野生型大肠杆菌接种于不含组氨酸的完全培养基上，标记为乙组；将未接种的不含组氨酸的完全培养基标记为丙组；将甲、乙、丙组培养基放于相同且适宜的环境中培养，一段时间后观察并统计培养基上的菌落数乙组培养基出现较多菌落；甲组培养基没有出现菌落或出现菌落、但菌落数少于乙组；丙组培养基无菌落六、综合题(共4题，共16分)26、略

【分析】【分析】

基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取；基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

（1）目的基因可以从自然界已有的物种中分离出来；也可以用人工方法合成。

（2）一个基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子、标记基因等。

（3）将目的基因导入植物细胞一般采用农杆菌转化法；将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术；将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞转化法。

（4）目的基因的检测与鉴定可采用DNA分子杂交技术；分子杂交技术、抗原—抗体杂交法、个体水平的鉴定。

【详解】

（1）在人体内获取目的基因时要用到的工具是限制酶；它能识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开；一个基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子、标记基因等，为了确保该血清白蛋白只在牛乳汁中出现，在构建基因表达载体时需要将牛乳腺蛋白基因启动子等元件和人血清白蛋白基因重组在一起；乳腺生物反应器有一定的局限性，只能在雌性动物中应用，若要打破性别限制，科学家还可以构建膀胱生物反应器，从尿液中收集人血清白蛋白。

（2）要确认转基因牛是否表达出相应的血清白蛋白；即检测目的基因是否翻译成蛋白质，可以采用的方法是抗原—抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因表达出相应的血清白蛋白；该方法的原理是抗原抗体的结合具有特异性。

（3）单克隆抗体的制备利用了动物细胞融合技术；通常使用灭活病毒促进已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合，通过多次筛选和抗体检测，以获得能产生专一抗体的能迅速大量繁殖的杂交瘤细胞，进而通过体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，获得单克隆抗体。单克隆抗体的优点是特异性强；灵敏度高、可大量制备。

【点睛】

本题主要考查基因工程的应用和单克隆抗体相关知识，要求考生掌握基因工程的基本工具和步骤以及相关应用，能根据题干信息分析实际应用过程中的各类问题，并明确单克隆抗体制备原理和特点。【解析】限制酶牛乳腺蛋白基因启动子膀胱抗原—抗体杂交抗原抗体的结合具有特异性已免疫的B淋巴细胞特异性强、灵敏度高、可大量制备27、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法；接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体—菌落。

（1）

制备含菌平板时采用（稀释）涂布平板法接种。

（2）

对吸管；培养基的灭菌方法分别是干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法。为检测灭菌效果可对培养基进行不接种培养（或空白培养）；若在适宜条件下培养无菌落出现，则培养基没有被污染，否则培养基被污染了。

（3）

酵母菌在无氧时；进行无氧呼吸才能产生酒精，故酿制果酒时，发酵后期酵母菌的代谢类型属于异养厌氧型；自制果酒时，葡萄果浆中的杂菌与酵母菌的种间关系主要是竞争关系。

（4）

实验中没有设置不同浓度的该天然植物抗菌液对酵母菌的抑菌作用影响；故根据实验结果，不能得出“相同浓度的该天然植物抗菌液对酵母菌的抑菌作用更大”的结论。该天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用的特点是：该天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌有抑制作用，且在一定范围内随浓度增大，其抑制作用越明显。

【点睛】

本题主要考查微生物的灭菌方法及其培养，考查学生的理解能力。【解析】（1）（稀释）涂布平板法。

（2）干热灭菌法高压蒸汽灭菌法不接种培养（或空白培养）

（3）异养厌氧型竞争。

（4）不能该天然植物抗菌液对金黄色葡萄球菌有抑制作用，且在一定范围内随浓度增大，其抑制作用越明显28、略

【分析】【分析】

1；目的基因：主要指编码蛋白质的结构基因；也可以是一些具有调控作用的因子。获得目的基因的方法：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增