凝集反应课件

免疫学检验第五章凝集反应直接凝集反应间接凝集反应Coombs试验自身红细胞凝集试验冷凝集实验5凝集反应凝集反应

Agglutination细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原，或可溶性抗原或抗体与载体颗粒结合为致敏颗粒后，它们与相应抗体或抗原发生特异性反应，在适当电解质存在下，形成肉眼可见的凝集现象。

5凝集反应凝集反应的特点抗原颗粒性抗原或致敏颗粒。反应的二个阶段抗原抗体的特异性结合和出现肉眼可见的凝集现象。在一定pH及适量电解质存在下才能发生。在凝集反应中IgM类抗体的作用强度比IgG类要大数百倍，lgG类抗体常出现不完全反应，即不可见的抗原抗体反应。凝集试验为定性检测，也可进行半定量检测。5凝集反应直接凝集反应directagglutination

颗粒性抗原在适当电解质参与下直接与相应抗体反应，当二者比例适当时，出现凝集。

反应中的抗原称为凝集原agglutinogen参与反应的抗体称为凝集素agglutinin玻片凝集试验试管凝集试验5凝集反应玻片凝集试验

玻片凝集试验为定性试验方法。一般用已知抗体作为诊断血清，与受检颗粒性抗原如菌液或红细胞悬液各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后可用肉眼或低倍显微镜观察凝集结果。

出现颗粒凝集者为阳性反应，也可用已知颗粒性抗原测定病人血清中特异性抗体。

§ABO血型鉴定5凝集反应CircleAshowsapositivetest(agglutinationofthelatexparticles.)TheothercirclesB-Eshownegativetests(noagglutinationofthelatexparticles).玻片凝集试验5凝集反应玻片凝集试验5凝集反应ABObloodtypeKarlLandsteiner(1968-1943)anAustrianimmunologist5凝集反应ABO血型鉴定5凝集反应ABO血型及Rh血型抗体检测5凝集反应试管凝集试验

试管凝集试验为半定量试验方法。

在微生物学检验中常用已知细菌作为一定浓度悬液抗原与一系列稀释的受检血清混合，经静置保温后观察每管内颗粒性抗原凝集程度。

通常以产生明显凝集现象的最高稀释度为血清中抗体的效价。

§肥达试验Widaltest§外斐试验Weil-Felixtest5凝集反应肥达试验WidaltestFernand

Widal(1862–1929）Frenchphysicianandbacteriologistwhomadeimportantcontributionstothediagnosis,treatment,andpreventionofmanydiseases.5凝集反应Atestofbloodserumthatusesanagglutinationreactiontodiagnosetyphoidfever.AntigensdetectedaretheO(somatic),H(flagellar)andVi(virulence)antigens.肥达试验

theWidalreaction5凝集反应外斐试验Weil-FelixtestAnagglutinationtestusedinthelaboratorytodiagnoserickettsialdiseases.5凝集反应RickettsialInfection5凝集反应外斐试验Weil-FelixtestItdependsonanon-specificcrossreactionbetweenantibodiesproducedbytherickettsialinfectionwiththeOX-2,OX-19andOXKantigensoftheGramnegativerod,Proteussp（变形杆菌）.

Thediagnosisofrickettsialinfectionisconfirmedbyafour-foldriseinantibodytitrebetweenacuteandconvalescentsamples.5凝集反应间接凝集反应indirectagglutination将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联与免疫无关大小适当的颗粒表面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜的电解质存在条件下，出现特异性的凝集现象。也称被动凝集反应Passiveagglutination)。5凝集反应正向间接凝集反应用抗原致敏载体以检测标本中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合，再与样品中的抗体反应，通过抗体桥联，形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块者，为阳性反应。§伤寒沙门菌多糖抗原-绵羊红细胞+抗体5凝集反应Agglutination5凝集反应血清稀释法1234565凝集反应反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体以检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏载体，与检测样品中待测抗原反应，通过抗原桥联，形成肉眼可见的凝集者为阳性。§HBsAb-绵羊红细胞+HbsAg,§AFP,FetalAlphaGlobulin,AlphaFetoprotein5凝集反应间接凝集抑制试验用已知抗原致敏的颗粒载体及相应的标准抗体，检测标本中与致敏抗原相同的抗原。检测方法将标本与抗体试剂相加反应，然后加入致敏载体。出现凝集现象，结果阴性。未出现凝集现象，凝集反应被抑制，结果阳性。5凝集反应HemagglutinationInhibition5凝集反应反向间接凝集抑制试验用抗体致敏载体颗粒及相应的抗原作为诊断试剂，以检测标本中的抗体。检测方法将待检标本与已知标准抗原相加反应，然后加入抗体致敏载体。出现凝集现象，结果阴性。未出现凝集现象，凝集反应被抑制，结果阳性。5凝集反应间接血凝试验

indirecthemagglutinationassay,IHA

用已知抗原（或抗体）致敏红细胞，检测标本中相应的抗体（或抗原）。正向间接血凝试验反向间接血凝试验正向间接血凝抑制试验反向间接血凝抑制试验§抗核抗体，类风湿因子5凝集反应Coombs试验（桥梁凝集反应）1945年由Coombs建立的一种抗球蛋白参与的间接血凝试验，检测抗红细胞不完全抗体的一种非常经典的方法。不完全抗体多半是7S的IgG抗体，该抗体能与其相应抗原牢固结合，一般条件下不出现可见反应。由于不完全抗体只能与一方红细胞抗原的决定簇结合，而不能同时与双方红细胞上的抗原决定'簇连接(又称单价抗体)，Coombs试验利用抗球蛋白抗体作为第二抗体达到桥梁的作用，连接与红细胞表面抗原结合的特异性抗体，使红细胞凝集。5凝集反应Coombs试验的应用§Coombs试验新生儿溶血特发性自身免疫性贫血自身免疫性溶血Rh-抗D抗体5凝集反应DirectCoombsTest5凝集反应IndirectCoombsTest5凝集反应新生儿溶血症

CoombsTest5凝集反应冷凝集实验ColdAgglutination冷球蛋白cryoglobulin，CG

是血清中一种特殊蛋白质，在4℃时不溶解并自发沉淀，30℃易于聚合，37℃时便溶解。它能固定补体产生炎症反应，类似免疫复合物引起的疾病。冷球蛋白有两种类型即单株型及混合型：IgG或IgM单株型冷球蛋白混合型冷球蛋白IgG、IgM或(和)IgA多株型IgG、IgM和补体C3混合型。5凝集反应冷凝集实验ColdAgglutinationColdagglutinindiseaseisanautoimmunediseasecharacterizedbythepresenceofhighconcentrationsofcirculatingantibodiesdirectedagainstredbloodcells.Itisaformofautoimmunehemolyticanemia,specificallyoneinwhichantibodiesonlybindredbloodcellsatlowtemperatures,typically28-31°C.5凝集反应冷凝集实验ColdAgglutinationPathophysiologyAllindividualshavecirculatingantibodiesdirectedagainstredbloodcells,buttheirconcentrationsareoftentoolowtotriggerdisease(titersunder1:64at4°C).Inindividualswithcoldagglutinindisease,theseantibodiesareinmuchhigherconcentrations(titersover1:1000at4°C).5凝集反应冷凝集实验ColdAgglutination5凝集反应自身红细胞凝集试验

Autologousredcellagglutinationassay反应中的红细胞为未经致敏的受检者新鲜红细胞。主要试剂材料为抗人O型红细胞单克隆抗体，这种抗体能与各种血型的红细胞结合，但不发生凝集反应。抗人O型红细胞单克隆抗体与另一特异性抗体连接的双功能抗体可用于检测标本中的抗原；若与特异性抗原连接，则可检测标本中的抗体。§HIVAb,HBsAg

5凝集反应凝集反应在临床中的应用1直接凝集反