检验科肌酐测定标准操作规程

玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-020版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第4页共4页编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01肌酐测定标准操作规程1检验申请单独检验项目申请：血清肌酐测定(缩写CRE)，尿液肌酐测定；组合项目申请：肾功能测定，内生肌酐清除率测定。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定一天，普通冰箱中（2～8℃）稳定3天。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。3方法原理肌酐酶肌酐+H2O肌酸肌酸酶肌酸+H2O肌氨酸+urea肌氨酸氧化酶肌氨酸+H2O+O2氨基乙酸+H2O2+甲醛过氧化物酶F-DAOS+H2O2+4-氨基安替比林蓝色染料该染料在600nm波长下吸光度的变化与样品中肌酐浓度成正比4试剂及其他用品4.1试剂：肌酐测定试剂盒（货号CR6113），由北京利德曼生化股份有限公司出品。4.2试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定14天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3试剂准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4试剂盒主要成分：组成R1:R2=3:1混合后的浓度磷酸盐缓冲液PH=7.7，100mmol/L肌氨酸氧化酶≥75U/mL4-氨基安替比林5mmol/L肌酐酶≥160kU/LF-DAOS1mmol/L抗坏血酸氧化酶≥10kU/L过氧化物酶≥5KU/L肌酸酶≥15KU/L叠氮钠0.1%5校准品与校准模式5.1校准品：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校准液（P/N442600），其浓度可溯源至美国国家标准技术研究所（NIST）标准参考材料。5.2校准类型和校准点数目：线性模式，1个校准点。5.3校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。5.4校准液重建方法：Beckman-CoulterSYNCHRONLXMULTI校准液即开即用，无需特殊准备。6质控品与室内质控规则6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。7适用仪器适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。9主要分析参数化学原理：碱性苦味酸法；测定原理:比色法；测定方法：速率法；反应方向：正反应；单位：μmol/L；校准模式：线性；校准周期：3天；校准点：2个；波长:520nm；样本量：16.5μl(血清)；5.5μl(尿液)；试剂：0.57ml；测定时间：20.5-26.4sec；分析范围：8.84-2210μmol/L。10结果计算肌酐（CREA）含量（umol/L）=（标本吸光度÷标准管吸光度）×标准液浓度11检验结果的报告及范围11.1结果的报告11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2报告范围：0-6000μmol/L，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。12操作性能12.1精密度：批内CV＜5.0%；总CV＜6%。12.2线性范围：0-6000μmol/L。12.3方法的有限性及干扰因素：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。13参考范围及医学决定水平40-120umol/L。14临床意义14.1肌酐是小分子量含氮化合物，主要由肌肉产生且与肌肉的总量相关。血中肌酐浓度指示肾小球的滤过率（GFR），常作为肾功能的指标。但血CRE浓度反映GFR的灵敏度不是太好，对早期较轻微的肾功能受损不灵敏。血CRE浓度还与个体肌肉量有关，故个体间差异较大，儿童中血CRE浓度尢低。14.2由同时测定的血CRE与24h尿CRE浓度可计算比值称为内生肌酐清除率。14.3凡GFR下降的疾病如急慢性肾小球肾炎、急性或慢性肾功能不全等均可有不同程度的血清CRE浓度升高。14.4血清CRE浓度还用于慢性肾功能不全的分期。第一期（肾功能不全代偿期）：SCr133～177µmol/L；CCr51～80ml/min。第二期（肾功能不全失代偿期）：SCr178～442；CCr50～20ml/min。第三期（肾功能衰竭期）：SCr443～707µmol/L；CCr19～10ml/min。第四期（尿毒症期）：SCr≥707µmol/L；CCr﹤10ml/min。14.5同时测定尿素氮和肌酐对临床诊断有更大帮助。若两者单位均以mg/dl计，正常情况下尿素氮与肌酐比为15～24：1，在肾前性少尿时，血清尿素氮比肌酐增高更明显，尿素氮与肌酐之比可达40：1，在这些情况下，经常出现肌酐值正常，而尿素氮值明显增高。由于尿道阻塞而使非蛋白含氮化合物滞留，则将出现尿素氮和肌酐成比例增高。在严重肾小球损害时，尿素氮与肌酐之比可降至10：1以下。14.6肌酐产生量较恒定，当肾功能损伤不严重时，尿中肌酐的排泄较少受尿液浓缩和稀释和影响，故尿中的肌酐浓度测定常作为尿中其它物质浓度排泄的参照物。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3相关项目：审核与血尿素、其他反映肾功能的指标如CysC等的关系，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16威胁生命的“紧急值”及报告规定：根据危急值报告制度执行。血肌酐浓度＞442μmol/L。有可能是急性肾功能衰竭，常伴多器